胎兒染色體異常的包遺傳學(xué)產(chǎn)前診斷技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)(醫(yī)學(xué)PPT課件)

1、胎兒染色體異常的細(xì)胞遺傳學(xué)產(chǎn)前診斷技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)戚慶煒北京協(xié)和醫(yī)院婦產(chǎn)科簡介(1)中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)胎兒常見染色體異常與開放性神經(jīng)管缺陷的產(chǎn)前篩查與診斷技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)第1部分：中孕期母血清學(xué)產(chǎn)前篩查第2部分：胎兒常見染色體異常的細(xì)胞遺傳學(xué)產(chǎn)前診斷技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)簡介（2）由衛(wèi)生部醫(yī)療服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)專業(yè)委員會(huì)提出并歸口已通過會(huì)審及函審將由中華人民共和國衛(wèi)生部批準(zhǔn)本部分主要起草單位中國醫(yī)學(xué)科學(xué)與北京協(xié)和醫(yī)院云南省第一人民醫(yī)院四川大學(xué)華西第二醫(yī)院浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院主審：夏家輝，孫念怙 主要起草人：邊旭明，朱寶生，劉俊濤，王和，呂時(shí)銘，戚慶煒，蔣宇林，馬良坤法律法規(guī)依據(jù)1994年中華人民共和國母嬰保健法199

2、6年中華人民共和國母音保健法實(shí)施辦法2002年衛(wèi)生部產(chǎn)前診斷技術(shù)管理辦法以及七個(gè)配套文件有利于上述法律法規(guī)的貫徹執(zhí)行相關(guān)法規(guī)2006年衛(wèi)生部醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法2004年國務(wù)院病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例中華人民共和國標(biāo)準(zhǔn)法國務(wù)院中華人民共和國標(biāo)準(zhǔn)法實(shí)施條例標(biāo)準(zhǔn)性質(zhì)涉及通用技術(shù)、檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)制定的依據(jù)基于中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院等單位完成的國家十一五攻關(guān)課題“胎兒染色體異常的產(chǎn)前篩查與診斷”結(jié)合衛(wèi)生部全國產(chǎn)前診斷專家組針對產(chǎn)前篩查工作規(guī)范所提出的相關(guān)建議文件參考美國醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)會(huì)2006年版臨床遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容范圍術(shù)語和定義臨床工作產(chǎn)前診斷的實(shí)驗(yàn)室工作產(chǎn)前診斷

3、病例的追蹤和隨訪資料性附錄范圍規(guī)定了產(chǎn)前診斷的臨床工作、實(shí)驗(yàn)室工作、以及產(chǎn)前診斷病例的追蹤和隨訪標(biāo)準(zhǔn)適用于：已取得產(chǎn)前診斷技術(shù)服務(wù)資質(zhì)的醫(yī)療保健機(jī)構(gòu)采用細(xì)胞遺傳學(xué)方法等國家認(rèn)可的相關(guān)技術(shù)對孕婦實(shí)施胎兒染色體檢查對胎兒是否患目前細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)可診斷的染色體積并作出產(chǎn)前診斷術(shù)語和定義染色體計(jì)數(shù)：在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定數(shù)量的中期細(xì)胞中具有著絲粒的染色體數(shù)目分析細(xì)胞數(shù)（analyzed cells）在鏡下或計(jì)算機(jī)處理圖像、或根據(jù)照片對顯帶標(biāo)本中期細(xì)胞中每一條染色體的形態(tài)進(jìn)行分析的細(xì)胞數(shù)量核型分析細(xì)胞數(shù)（keryotyped cells）：根據(jù)ISCN 1995或ISCN 2005規(guī)則對一個(gè)細(xì)胞的染色體照片

4、或者計(jì)算機(jī)處理圖像進(jìn)行分組、排隊(duì)、配對并進(jìn)行形態(tài)分析的細(xì)胞數(shù)量集落：經(jīng)收獲并染色后貼附在細(xì)胞培養(yǎng)物生長基底上相對聚集的細(xì)胞克隆異?？寺。褐辽儆袃蓚€(gè)細(xì)胞含有相同的額外染色體結(jié)構(gòu)異常，或至少有3個(gè)細(xì)胞丟失同一號(hào)染色體臨床工作門診工作程序知情同意書的簽署病例資料和樣本采集門診工作程序（1)由經(jīng)過專門培訓(xùn)的、有資質(zhì)的醫(yī)師承擔(dān)進(jìn)行遺傳咨詢或者婦產(chǎn)科產(chǎn)前咨詢應(yīng)讓孕婦理解采取侵入性取材手術(shù)可能發(fā)生的各種并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)對于年齡在35歲以上，或者符合其它產(chǎn)前診斷指征的孕婦，均應(yīng)推薦其做產(chǎn)前診斷門診工作程序（2）細(xì)胞遺傳學(xué)產(chǎn)前診斷指征35歲以上的高齡孕婦產(chǎn)前篩查出來的胎兒染色體異常高風(fēng)險(xiǎn)的孕婦曾生育過染色體病患兒的

5、孕婦產(chǎn)前B超檢查懷疑胎兒可能有染色體異常的孕婦夫婦一方為染色體異常攜帶者醫(yī)師認(rèn)為有必要進(jìn)行產(chǎn)前診斷的其他情形門診工作程序（3）介入性產(chǎn)前診斷手術(shù)絨毛取材術(shù)孕10-13周+6羊膜腔穿刺術(shù)孕16-22周+6經(jīng)皮臍血管穿刺術(shù)孕18周之后應(yīng)選擇合適的時(shí)期和方法進(jìn)行產(chǎn)前診斷術(shù)前應(yīng)正確掌握產(chǎn)前診斷及取材手術(shù)的適應(yīng)征和禁忌征，并完成必要的檢查知情同意書的簽署應(yīng)向孕婦說明：細(xì)胞遺傳學(xué)產(chǎn)前診斷技術(shù)的局限性即常規(guī)染色體檢查不能：診斷染色體微小結(jié)構(gòu)改變單基因遺傳病多基因遺傳病環(huán)境以及藥物導(dǎo)致的胎兒宮內(nèi)發(fā)育異常如因細(xì)胞培養(yǎng)失敗而無法得到結(jié)果，則有再次取材的可能產(chǎn)前診斷病歷書寫要求產(chǎn)前診斷病歷保存規(guī)格和期限按照重要技術(shù)

6、檔案保存保存期限至少20年標(biāo)本采集取材手術(shù)的質(zhì)量控制羊膜腔穿刺術(shù)一次穿刺成功率99%以上術(shù)后一周內(nèi)的胎兒丟失率小于0.5%絨毛取材術(shù)一次穿刺成功率98%以上術(shù)后一周內(nèi)的胎兒丟失率小于1.5%經(jīng)皮臍血管穿刺術(shù)一次穿刺成功率90%以上術(shù)后一周內(nèi)的胎兒丟失率小于2%產(chǎn)前診斷的實(shí)驗(yàn)室工作標(biāo)本的接收登記細(xì)胞培養(yǎng)外周血淋巴細(xì)胞染色體（植物凝集素刺激）檢查產(chǎn)前診斷實(shí)驗(yàn)室的一般要求羊水細(xì)胞染色體分析絨毛細(xì)胞染色體分析胎兒臍帶血染色體分析細(xì)胞遺傳學(xué)檢查報(bào)告產(chǎn)前診斷病歷資料存檔及標(biāo)本保存細(xì)胞培養(yǎng)一般要求：細(xì)胞接種操作應(yīng)在超凈工作臺(tái)進(jìn)行培養(yǎng)箱應(yīng)定期清洗并檢查培養(yǎng)箱每個(gè)工作日檢查指示的培養(yǎng)箱內(nèi)溫度和二氧化碳濃度應(yīng)注明

7、最高與最低溫度控制應(yīng)制定并張貼出儀器運(yùn)行的合理范圍當(dāng)讀數(shù)超過合理范圍時(shí)應(yīng)有相應(yīng)處理方案每周檢查儲(chǔ)氣瓶氣體和實(shí)驗(yàn)室空氣濕度外周血淋巴細(xì)胞染色體（植物血凝刺激）檢查（1）一般要求每份標(biāo)本至少建立兩個(gè)獨(dú)立的培養(yǎng)系統(tǒng)90%以上的常規(guī)外周血分析應(yīng)在收到標(biāo)本之日起21個(gè)工作日之內(nèi)發(fā)出最終書面報(bào)告特殊染色和分析可以酌情延遲發(fā)放報(bào)告時(shí)間有特殊情況時(shí)要及時(shí)與被檢人和送檢單位取得聯(lián)系每年的診斷失敗率不超過2%外周血淋巴細(xì)胞染色體（植物血凝刺激）檢查（2）G帶現(xiàn)代染色體標(biāo)本應(yīng)達(dá)到320條帶的分辨率外周血染色體分析標(biāo)準(zhǔn)計(jì)數(shù)：至少計(jì)數(shù)20個(gè)細(xì)胞，記錄任何觀察到的貪色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常。對可能有性染色體異常病例的標(biāo)本，至少

8、計(jì)數(shù)30個(gè)細(xì)胞。分析：分析5個(gè)細(xì)胞，所分析細(xì)胞的染色體分辨率應(yīng)達(dá)到320條帶水平核型分析：2個(gè)細(xì)胞，如果標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)有一個(gè)以上的細(xì)胞克隆，則每個(gè)克隆核型分析一個(gè)細(xì)胞產(chǎn)前診斷實(shí)驗(yàn)室的一般要求（1）至少應(yīng)建立兩個(gè)獨(dú)立的培養(yǎng)系統(tǒng)并分別置于不同的培養(yǎng)箱中除了經(jīng)皮臍血管穿刺獲取的臍血標(biāo)本除外，其他標(biāo)本應(yīng)由備份培養(yǎng)以備進(jìn)一步研究所需如果需要對父母的染色體進(jìn)行分析以助于鑒別胎兒染色體異?；虍悜B(tài)性，應(yīng)由同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行上述分析產(chǎn)前診斷實(shí)驗(yàn)室的一般要求（2）診斷失敗率不應(yīng)超過2%應(yīng)盡可能明確所有診斷失敗的原因診斷失敗的記錄以及相應(yīng)整改措施的記錄至少應(yīng)保存一年除了經(jīng)皮臍血管穿刺獲取的臍血染色體分析，90%以上的最終

9、結(jié)果應(yīng)在從接收到的標(biāo)本之日起28個(gè)工作日之內(nèi)完成并發(fā)出正式報(bào)告，除非需要進(jìn)行進(jìn)一步的研究產(chǎn)前診斷實(shí)驗(yàn)室的一般要求（3）不能達(dá)到上述標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)將標(biāo)本轉(zhuǎn)送到其他實(shí)驗(yàn)室，直至達(dá)到上述要求為止對異常診斷結(jié)果應(yīng)盡可能進(jìn)行細(xì)胞遺傳學(xué)隨訪，以對產(chǎn)前診斷結(jié)果進(jìn)行確認(rèn)羊水細(xì)胞染色體分析（1）培養(yǎng)瓶法：計(jì)數(shù):至少計(jì)數(shù)在2個(gè)以上獨(dú)立培養(yǎng)的培養(yǎng)瓶中平均分布的20個(gè)細(xì)胞，記錄任何觀察到的染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常分析：至少分析在2個(gè)以上獨(dú)立培養(yǎng)的培養(yǎng)瓶中的5個(gè)細(xì)胞，所分析的細(xì)胞的染色體分辨率應(yīng)達(dá)到320條帶水平核型分析：2個(gè)細(xì)胞，每個(gè)獨(dú)立的培養(yǎng)瓶各分析一個(gè)細(xì)胞羊水細(xì)胞培養(yǎng)分析（2）原位法： 計(jì)數(shù)：至少計(jì)數(shù)在2個(gè)以上獨(dú)立培

10、養(yǎng)的器皿中平均分布的15個(gè)細(xì)胞集落中的15個(gè)細(xì)胞，一個(gè)集落計(jì)數(shù)一個(gè)細(xì)胞如果沒有15個(gè)集落，則至少計(jì)數(shù)10個(gè)集落中的15個(gè)細(xì)胞記錄任何觀察到的染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常分析：至少分析在2個(gè)以上獨(dú)立培養(yǎng)的培養(yǎng)器皿中的5個(gè)細(xì)胞，所分析的細(xì)胞的染色體分辨率應(yīng)達(dá)到320條帶水平核型分析：2個(gè)細(xì)胞，共若發(fā)現(xiàn)有一個(gè)以上的細(xì)胞克隆，則每個(gè)克隆核型分析一個(gè)細(xì)胞絨毛細(xì)胞染色體分析（1）一般要求如果在臨床上采用直接法（未培養(yǎng)）染色體制備，則應(yīng)同時(shí)采用培養(yǎng)法（定義為培養(yǎng)時(shí)間在48小時(shí)以上）染色體制備方法。最終的書面報(bào)告應(yīng)包括細(xì)胞培養(yǎng)的方法絨毛細(xì)胞染色體分析（2）絨毛細(xì)胞染色體分析標(biāo)準(zhǔn)直接法（未培養(yǎng)）染色體制備方法：不建議使

11、用絨毛細(xì)胞染色體分析（3）培養(yǎng)法：計(jì)數(shù)：至少計(jì)數(shù)在2個(gè)以上獨(dú)立培養(yǎng)的培養(yǎng)瓶中獨(dú)立分布的20個(gè)細(xì)胞，記錄任何觀察到的染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常分析：至少分析在2個(gè)以上獨(dú)立培養(yǎng)的培養(yǎng)器皿中的5個(gè)細(xì)胞，所分析的細(xì)胞的染色體分辨率應(yīng)達(dá)到320條帶水平核型分析：2個(gè)細(xì)胞，共若發(fā)現(xiàn)有一個(gè)以上的細(xì)胞克隆，則每個(gè)克隆核型分析一個(gè)細(xì)胞臍血細(xì)胞染色體分析標(biāo)準(zhǔn)計(jì)數(shù)：至少計(jì)數(shù)在2個(gè)以上獨(dú)立培養(yǎng)的培養(yǎng)瓶中平均分布的20個(gè)細(xì)胞，記錄任何觀察到的染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常分析：至少分析在2個(gè)以上獨(dú)立培養(yǎng)的培養(yǎng)器皿中的5個(gè)細(xì)胞，所分析的細(xì)胞的染色體分辨率應(yīng)達(dá)到相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)。核型分析2個(gè)細(xì)胞，如果發(fā)現(xiàn)有一個(gè)以上的細(xì)胞克隆，則每個(gè)克隆核型分析一

12、個(gè)細(xì)胞細(xì)胞遺傳學(xué)檢查報(bào)告（1）細(xì)胞核型分析記錄及染色體異常的命名法：采用ISCN 1995或ISCN 2000均可最終書面報(bào)告應(yīng)包括以下信息：一般信息：患者姓名、年齡、標(biāo)本采集日期、實(shí)驗(yàn)室收到標(biāo)本日期、實(shí)驗(yàn)室編號(hào)、標(biāo)本的唯一編號(hào)、送檢醫(yī)師的姓名檢查內(nèi)容的報(bào)告應(yīng)包括：產(chǎn)前診斷指征；細(xì)胞培養(yǎng)的方法；顯帶方法、染色體分辨率；對所分析細(xì)胞的現(xiàn)行ISCN命名；除非有明確胎兒性別的醫(yī)療指征，不得報(bào)告胎兒性別。應(yīng)標(biāo)注實(shí)驗(yàn)室結(jié)果報(bào)告的局限性細(xì)胞遺傳學(xué)檢查報(bào)告（2）至少應(yīng)由兩個(gè)有資質(zhì)的人員對細(xì)胞進(jìn)行分析和評估對結(jié)果的解釋應(yīng)包括：和臨床信息之間的關(guān)系；對結(jié)果的意義的討論；應(yīng)建議進(jìn)行進(jìn)一步的遺傳咨詢實(shí)驗(yàn)室信息應(yīng)包括：實(shí)驗(yàn)室名稱、技術(shù)人員姓名、簽發(fā)報(bào)告的實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人姓名和簽名。對正常核型的報(bào)告：按ISCN（1995）或ISCN （2005）書寫和描述，并建議遺傳咨詢產(chǎn)前診斷病歷資料存檔及標(biāo)本保存產(chǎn)前診斷病歷含術(shù)前相關(guān)檢查登記，知情同意書、細(xì)胞遺傳學(xué)分析實(shí)驗(yàn)記錄合并入病歷中，存入產(chǎn)前診斷檔案保存，保存期限20年以上細(xì)胞培養(yǎng)及染色體標(biāo)本制備的實(shí)驗(yàn)記錄按實(shí)驗(yàn)室工作日志保存檔案，保存期限5年以上用于診斷性實(shí)驗(yàn)的玻片保存期限有限，如果是永久性的顯帶方法（G-,C-,R-帶），玻片宜保存兩年。熒光染色體的染色