三明治elisa定量igg操作流程_第1頁
三明治elisa定量igg操作流程_第2頁
三明治elisa定量igg操作流程_第3頁
全文預覽已結束

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、起草人：起草日期：部門主管：審閱日期：QA：審閱日期：機構：批準日期：1目的規(guī)范采用三明治 ELISA 方法去定量 IgG 的操作流程。職責22.12.2規(guī)范相關實驗操作；保證相關的安全和規(guī)范；3使用范圍此方法適用于本部門的 IgG 定量分析實驗。內(nèi)容/流程44.14.2將所有試劑放到室溫條件下；準備試劑：國產(chǎn)平板；稀釋羊抗人 K 鏈抗體到 2ug/ml；稀釋試劑：10mM sodium每孔吸取 100ul；osate, 150 mM NaCl,7.8；在 4 C 或 37 C 條件下孵育 2hrs。孵育結束后，將平板倒置，輕拍去掉多余的液體（無需潤洗）準備試劑：國產(chǎn)平板；稀釋羊抗人 K 鏈抗

2、體到 2ug/ml。封閉：準備 5% BSA 溶于 PBS (22 ml 每板)；每孔用 200 ul 的封閉液覆蓋；室溫條件下震蕩封閉至少 1 小時 ；孵育結束后，將平板倒置，輕拍去掉多余的液體（無需潤洗）。標準曲線的制定：稀釋標準人 IgG 到 250ng/ml；用 PBS 連續(xù)按照 1：2 稀釋(200l Std + 200l PBS for each serial dilution)。準備樣品（溶于 PBS）：依據(jù)效價對樣品做 3-5 次的稀釋；每空吸取 100ul 標樣和樣品；室溫條件下震蕩封閉至少 1 小時；平板用 PBST 潤洗 3 次（ 250ul/次）。檢測抗體的準備：將 HRP 交聯(lián)羊抗人 IgG 按 1:10000 稀釋；每空吸取 100ul 稀釋后的抗體；室溫條件下震蕩封閉至少 1 小時；平板用 PBST 潤洗 3 次（ 250ul/次）；加 50ul 的 TMB 底物 A ；加 50ulof TMB 底物 B and 孵育 5 到 10 min；4.34.44.54.64.7加 50ul 終止液；在 450 nm 條件下檢測 ；5表格5.1無6參考文獻6.1附件7.1無7無

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論