人教版新高考生物二輪復(fù)習(xí)專題訓(xùn)練--大題分析與表達練7 基因工程類大題突破

1、 大題分析與表達練7基因工程類大題突破1.(2021山東日照二模)新型冠狀病毒主要通過其表面刺突蛋白(S蛋白)與人體細(xì)胞膜上的ACE2蛋白結(jié)合實現(xiàn)感染。截至2021年4月12日,中國成為全球首個能提供三種生產(chǎn)新型冠狀病毒疫苗技術(shù)路線(滅活疫苗、重組蛋白疫苗和腺病毒載體疫苗)的國家。三種新型冠狀病毒疫苗研發(fā)途徑的技術(shù)原理如下:滅活疫苗是用各種理化方法滅活病原微生物及其代謝產(chǎn)物,再通過純化等步驟制備出相應(yīng)疫苗;重組蛋白疫苗是將病毒的目標(biāo)抗原基因整合到表達載體中,然后將表達載體轉(zhuǎn)化到中國倉鼠卵巢細(xì)胞中,經(jīng)誘導(dǎo)表達出大量的抗原蛋白,再通過純化而得到的疫苗;腺病毒載體疫苗是以腺病毒作為載體,將目標(biāo)抗原基

2、因重組到載體病毒基因組中得到的疫苗。回答下列問題。上述滅活疫苗中的“滅活”是使新型冠狀病毒失去，但并不破壞該病毒的。制備重組蛋白疫苗和腺病毒載體疫苗均需要獲取S蛋白基因，獲取過程是提取新型冠狀病毒總RNA,在酶的作用下合成DNA，再采用PCR技術(shù)選擇性擴增出S蛋白基因。PCR技術(shù)的前提是要有一段，以便根據(jù)這一序列設(shè)計出特異性的引物。腺病毒載體疫苗是將S蛋白基因重組到改造后的腺病毒內(nèi)，導(dǎo)入人體，在體內(nèi)產(chǎn)生S蛋白，刺激人體產(chǎn)生相應(yīng)抗體。改造后的腺病毒載體應(yīng)具備的條件(答出兩點即可)。與重組蛋白疫苗相比，腺病毒載體疫苗的優(yōu)點體現(xiàn)。腺病毒載體疫苗注入人體后，其發(fā)揮作用的機理是2.(2021山東青島二模

3、)基因工程抗體又稱重組抗體，是指利用重組DNA及蛋白質(zhì)工程技術(shù)對編碼抗體的基因按不同需要進行加工改造和重新裝配，經(jīng)轉(zhuǎn)染適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞所表達的抗體分子。下圖為某研究所制備小鼠抗甲型肝炎病毒抗體的流程圖。回答下列問題。AcvRTV儒選導(dǎo)人骨龍痕細(xì)脛注射到小鼠膻腔輩爼質(zhì)粒VCffRliMMMKI抗性基因fccRVBamHIPS仏Z堊因加叫I器羅倉I提取抗體實驗室構(gòu)建重組質(zhì)粒時,為保證目的基因與載體的正確連接，過程最好選擇的限制酶是。在重組質(zhì)粒中，目的基因首端的啟動子能夠，從而驅(qū)動目的基因的轉(zhuǎn)錄。除啟動子之外,重組質(zhì)粒還應(yīng)該包含等。為了篩選出導(dǎo)入目的基因的骨髓瘤細(xì)胞，可以在過程的培養(yǎng)液中添加，過程所獲

4、得的細(xì)胞具有的特點。（4）臨床試驗發(fā)現(xiàn)，過程提取的小鼠抗甲型肝炎病毒抗體具有外源性,容易被人體的免疫系統(tǒng)清除，從而導(dǎo)致其治療效果大大降低。下圖抗體中的A區(qū)是與抗原特異性結(jié)合的區(qū)域,B區(qū)是引起人體免疫反應(yīng)的區(qū)域。若要避免小鼠抗甲型肝炎病毒抗體被人體免疫系統(tǒng)清除,請?zhí)岢龊侠淼母脑焖悸贰?.（2021山東德州二模）某研究小組從土壤中分離獲得能分解纖維素的細(xì)菌（A菌），從A菌中提取出一種纖維素酶基因（CBHII,長度為1.4kbp）并進行PCR擴增,然后與高效表達載體pUT質(zhì)粒（長度約為11.7kbp）連接構(gòu)建成重組質(zhì)粒并導(dǎo)入A菌，從而獲得分解纖維素能力更強的工程菌（B菌）。回答下列問題。（1）采集土

5、樣時,可以選擇樹林中多年落葉形成的腐殖土,原因是。采集到的樣品加無菌水稀釋后（填“需要”或“不需要”）進行滅菌處理。（2）CBHlI基因兩端需添加相關(guān)酶切位點才能與圖1所示的pUT質(zhì)粒連接，因此擴增CBHII基因時需MspIpUT質(zhì)粒(U.7bp)晨VET1抗生盍M抗性基因終此子“抗生素W抗性姑囲fiamUI圖1在兩種引物上分別添加序列和序列。限制酶識別序列及酶切位點BginAjGATCTBstEnGjGTAACCSacTGiAGCTCMspTCjCGGBamHTGjGATCC刪U孫奴&達啟動子,r為了鑒定重組質(zhì)粒是否構(gòu)建成功，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入A菌，并將其接種在含的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，然后提取3個不同

6、菌落的質(zhì)粒分別進行雙酶切驗證,將酶切片段和CBHII基因分別進行電泳，結(jié)果如圖2所示。據(jù)此分析,菌落.中成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒。06713156145339442標(biāo)糧DNACRHBI233?6bpI2i：;圖2為檢測B菌的纖維素分解能力，將含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的纖維素的培養(yǎng)基分為3組，一組接種B菌,一組不作處理，一組接種，在相同條件下培養(yǎng)一段時間，測定培養(yǎng)基中纖維素含量，結(jié)果如4.(2021山東聊城二模)菊天牛是菊花的主要害蟲之一。科研人員將抗蟲基因轉(zhuǎn)入菊花，培育出抗蟲菊花。下圖是獲得轉(zhuǎn)基因菊花的技術(shù)流程圖。請據(jù)圖回答下列問題。枸慢甘檢生重組一含亜組離怵菊*愈傷些再蘭Ti質(zhì)純Ti質(zhì)?；ㄈ~片組戦舊的

7、農(nóng)桿菌紐織.舉基囲1絲Ti注卡那霉素抗性基因(KanR)作為標(biāo)記基因，菊花葉片對卡那霉素高度敏感。質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體,其化學(xué)本質(zhì)是，基因工程的核心是。將重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌的目的是利用農(nóng)桿菌能夠-上,最終形成轉(zhuǎn)基因植株。生產(chǎn)上常的特點，使目的基因進入受體細(xì)胞中，并插入菊花細(xì)胞的將轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)基因作物混合種植，其目的是若利用DNA分子雜交技術(shù)檢測轉(zhuǎn)基因菊花是否含有目的基因，應(yīng)該用作為探針;用PCR技術(shù)擴增目的基因需根據(jù)基因兩端的部分堿基序列設(shè)計特異性引物,若其中一種引物共用了31個，則目的基因最多擴增了次。5.(2021山東濱州二模)科學(xué)家利用基因編輯技術(shù)將抑癌基因ANp63a定

8、點插入小鼠胰腺癌細(xì)胞中，以研究其在胰腺癌細(xì)胞中的作用。具體方法是設(shè)計特定的sgRNA序列，構(gòu)建Cas9-sgRNA質(zhì)粒(如圖甲所示)，將其導(dǎo)入胰腺癌細(xì)胞并表達；sgRNA能識別并結(jié)合胰腺癌細(xì)胞基因組DNA中的特定序列，引導(dǎo)Cas9蛋白對特定位點進行剪切，使DNA雙鏈斷裂(如圖乙所示);攜帶ANP4Np63a基因的供體質(zhì)粒與斷裂DNA的高度同源序列(同源臂)發(fā)生互換,從而將ANPANp63a基因定點插入胰腺癌細(xì)胞基因組中(如圖丙所示)?；卮鹣铝袉栴}。PI#TlL畑口NA丙(1)圖甲所示的Cas9-sgRNA質(zhì)粒中，新霉素抗性基因的作用是，除去圖示結(jié)構(gòu)外，還應(yīng)有的結(jié)構(gòu)是.Cas9蛋白可對特定的DN

9、A序列切割，在功能上最接近于酶。將Cas9-sgRNA質(zhì)粒和供TOC o 1-5 h z體質(zhì)粒導(dǎo)入胰腺癌細(xì)胞的方法。若要檢測ANp63a基因是否已導(dǎo)入成功，可使用技術(shù)。被ANp63a基因成功轉(zhuǎn)化的胰腺癌細(xì)胞體外培養(yǎng)時，在細(xì)胞水平上可能發(fā)生的變化有在上述基因編輯過程中，下列核酸序列中應(yīng)已知堿基序列的有。A.sgRNA識別序列B.同源臂1C.同源臂2D.CMV啟動子此技術(shù)優(yōu)于傳統(tǒng)基因工程之處在于。6.(2021山東臨沂二模)生物柴油作為新型能源已經(jīng)成為世界上應(yīng)用廣泛、發(fā)展迅猛的可再生能源之一。研究人員利用基因工程的方法,將油料作物紫蘇的產(chǎn)油基因DGAT1與含有氨芐青霉素抗性基因的pMD克隆質(zhì)粒構(gòu)建

10、pMD-DGAT1重組質(zhì)粒，然后導(dǎo)入大腸桿菌擴大培養(yǎng);再提取出擴增的pMD-DGAT1克隆質(zhì)粒，與pBI121空載體同時用XbaI、BamHI兩種限制酶酶切，構(gòu)建pBI121-DGAT1表達載體;最后將表達載體導(dǎo)入四尾柵藻獲得產(chǎn)油微藻，利用地?zé)釓U水培養(yǎng)產(chǎn)油微藻不僅能生產(chǎn)生物柴油，還能治理地?zé)釓U水?；卮鹣铝袉栴}。提取紫蘇組織細(xì)胞RNA經(jīng)過得到cDNA，再利用PCR技術(shù)擴增得到DGAT1基因。在PCR擴增之前,需要對DGAT1基因進行一次預(yù)變性的目的是；在擴增DGAT1基因時，需要根據(jù)設(shè)計特異性引物序列。在配制培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基時，要在培養(yǎng)基滅菌并冷卻到30C左右后，加入用無菌水配制的適宜濃度的

11、氨芐青霉素溶液，氨芐青霉素不能與培養(yǎng)基一同滅菌的原因可能將DGAT1基因插入pBI121空載體的啟動子與終止子之間的目的是。若用DGAT1基因探針檢測產(chǎn)油微藻，能檢測到細(xì)胞中的；判斷產(chǎn)油微藻細(xì)胞中DGAT1基因是否成功表達，需要加入進行檢測。為檢測產(chǎn)油微藻對地?zé)釓U水的去污能力，研究人員設(shè)計實驗并得到相應(yīng)實驗結(jié)果如下表所示。檢測指標(biāo)總氮總磷氟化物(mgLi)(mgL1)(mgLi)地?zé)釓U水23.24.324.56培養(yǎng)基培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)油微藻11d后1.90.450.84該實驗不能說明產(chǎn)油微藻顯著提高了去污能力，請進一步完善實驗設(shè)計。7.(2021山東實驗中學(xué)一模)研究發(fā)現(xiàn)，新型冠狀病毒外殼中的S蛋白

12、具有很強的抗原性，可利用其制備單克隆抗體，制備流程如下圖所示，相關(guān)限制酶及其識別序列如下表所示。請分析回答下列問題。新型新型用大腸桿1昭囂憑腫熾滬強的沁航RNA文庫i小粗限制酶識別序列和切割位點EcoRIGjAATTCBamHIGjGATCCBglllAiGATCTSalIGjTCGAC檢詞體外第選塔養(yǎng)細(xì)胞Y一單克隆抗怵無限增殖尸f二調(diào)控基因CZ?f蘇人體內(nèi)分泌抗體的細(xì)胞可來自細(xì)胞的增殖分化。根據(jù)病毒的結(jié)構(gòu)，圖中過程常用酶處理，完成過程需要的酶是。檢測過程是否成功的方法，過程常用的方法。利用PCR技術(shù)擴增無限增殖調(diào)控基因時，科研人員設(shè)計了如下一對引物(部分序列)：II：I:，.IIr“:Ivn

13、和T5川其中下劃線部分序列的設(shè)計依據(jù)是，方框部分序列的設(shè)計目的是抗體可變區(qū)氨基酸的組成和排列順序可隨抗體結(jié)合抗原的特異性不同而有較大的變異，由于可變區(qū)中氨基酸的種類以及排列順序千變?nèi)f化，故可形成許多種具有不同結(jié)合抗原特異性的抗體。為克服鼠源單克隆抗體輸入人體后產(chǎn)生的免疫排斥反應(yīng)，科研人員通過人工改造鼠源單克隆抗體獲得了嵌合抗體。分析下圖，你認(rèn)為最符合臨床要求的嵌合抗體是AD中的。嵌合抗體的研制屬于這一技術(shù)范疇。堿合抗體8.(2021山東濰坊三模)番茄果實后熟問題影響番茄的生產(chǎn)、加工和運輸。ACC合成酶是番茄細(xì)胞合成乙烯的關(guān)鍵酶,科學(xué)家利用反義基因技術(shù)培育出了耐儲存、利于長途運輸?shù)姆研缕贩N,具

14、體做法是采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將攜帶有反義ACC合成酶基因的重組質(zhì)粒M導(dǎo)入番茄栽培品種中，經(jīng)過卡那霉素篩選后，獲得番茄新品種。反義基因是指人工合成出的一段與某種基因堿基序列相同的DNA,經(jīng)過人為操作使之在轉(zhuǎn)錄生成mRNA時,模板鏈與原基因不同?；卮鹣铝袉栴}。農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法適用的植物種類。重組質(zhì)粒M中的抗性基因是。有同學(xué)提出若要提取番茄中控制ACC合成酶的基因，只能利用成熟的番茄組織。你認(rèn)為他的說法是否有道理?。作出判斷的依據(jù)是。ACC合成酶基因在番茄細(xì)胞中表達的過程發(fā)生在細(xì)胞內(nèi)的中。反義ACC合成酶基因轉(zhuǎn)錄啟動后，檢測發(fā)現(xiàn)番茄果實中乙烯含量顯著降低，推測其機理最可能大題分析與表達練7基因工程類大題突破

15、1.答案(1)感染性抗原結(jié)構(gòu)逆轉(zhuǎn)錄已知S蛋白基因的核苷酸序列具有一個至多個限制酶切割位點、能自我復(fù)制(或具有標(biāo)記基因)能夠持續(xù)表達抗原,免疫應(yīng)答持久腺病毒能夠?qū)蛋白基因轉(zhuǎn)化到受體細(xì)胞中，并在受體細(xì)胞中表達出S蛋白，作為抗原引起人體的免疫應(yīng)答解析:(1)由題干可知，滅活疫苗是用各種理化方法滅活病原微生物及其代謝產(chǎn)物，使其逐漸喪失感染性。作為疫苗，要保留有抗原性，以激發(fā)體內(nèi)的特異性免疫，所以并不破壞該病毒的抗原結(jié)構(gòu)。遺傳信息從RNA傳遞到DNA的過程稱為逆轉(zhuǎn)錄，需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化。PCR技術(shù)的前提條件是要有一段已知目的基因(S蛋白基因)的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設(shè)計出特異性的引物?；蚬こ讨?/p>

16、載體應(yīng)具備的條件有能自我復(fù)制，有一個至多個限制酶切割位點，具有標(biāo)記基因，能在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，不影響受體細(xì)胞的生命活動等。與重組蛋白疫苗相比，腺病毒載體疫苗的優(yōu)點體現(xiàn)在抗原基因在宿主細(xì)胞內(nèi)能持續(xù)表達出抗原(即S蛋白)，腺病毒載體疫苗一次接種即可獲得長期免疫力，免疫應(yīng)答更持久。腺病毒載體疫苗注入人體后，其發(fā)揮作用的機理是重組腺病毒能夠?qū)蛋白基因轉(zhuǎn)化到受體細(xì)胞中，并在受體細(xì)胞中通過轉(zhuǎn)錄、翻譯過程表達出S蛋白，作為抗原引起人體的免疫應(yīng)答。2.答案(l)EcoRI和BamHI與RNA聚合酶結(jié)合終止子、目的基因、標(biāo)記基因(復(fù)制原點)(適量的)青霉素既能大量增殖，又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體(抗甲型肝炎

17、病毒抗體)采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對小鼠抗甲型肝炎病毒抗體上B區(qū)域進行改造，或替換成人體相應(yīng)抗體的B區(qū)，進而降低人體對該抗體的免疫排斥。解析:(1)題圖中EcoRV會破壞目的基因，故不能用于切割目的基因，目的基因和載體共同含有的限制酶還有EcoRI和BamHI，為了保證目的基因與載體的正確連接,應(yīng)該選擇EcoRI和BamHI切割目的基因和載體。RNA聚合酶可以與目的基因的啟動子結(jié)合，驅(qū)動轉(zhuǎn)錄。重組質(zhì)粒應(yīng)該包含目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因等。重組質(zhì)粒中含有青霉素抗性基因，故可以在過程的培養(yǎng)液中添加青霉素，來篩選導(dǎo)入目的基因的骨髓瘤細(xì)胞。過程所獲得的細(xì)胞是含有目的基因的骨髓瘤細(xì)胞，既能大量增殖，又

18、能產(chǎn)生足夠數(shù)量的抗甲型肝炎病毒抗體。由于B區(qū)是引起人體免疫反應(yīng)的區(qū)域,若要避免小鼠抗甲型肝炎病毒抗體被人體免疫系統(tǒng)清除，可以采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對小鼠抗甲型肝炎病毒抗體上B區(qū)域進行改造，或替換成人體相應(yīng)抗體的B區(qū)，進而降低人體對該抗體的免疫排斥。3.答案(1)腐殖土中富含纖維素不需要AGATCTGGTAACC(3)抗生素N2、3(4)A菌B菌分解纖維素的能力最強解析:(1)在自然條件下篩選目的菌,應(yīng)在富含該菌種的環(huán)境中尋找,因腐殖土中富含纖維素,故欲從土壤中分離獲得能分解纖維素的細(xì)菌,應(yīng)選擇樹林中多年落葉形成的腐殖土;為避免目的菌被殺死,采集到的樣品加無菌水稀釋后不需要進行滅菌處理。為保證目的基

19、因能正常表達,目的基因應(yīng)插入啟動子和終止子之間,且應(yīng)至少保留一個標(biāo)記基因，故應(yīng)選擇Bglll和BstEII進行酶切,故擴增CBHII基因時需在兩種引物上分別添加AGATCT序列和GGTAACC序列。由于用BglI和BstEII進行酶切后,抗生素M抗性基因被破壞，故為了鑒定重組質(zhì)粒是否構(gòu)建成功，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入A菌，并將其接種在含抗生素N的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。由題圖可知，用BglII和BstEII進行酶切后,該環(huán)狀DNA應(yīng)得到兩個長度的片段，而圖2中的2和3酶切片段有兩個，符合題意，故據(jù)此推測，菌落2和3中成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒。本實驗的目的為檢測B菌的纖維素分解能力，則實驗的自變量為菌種類型，因變量為纖維

20、素的分解能力，可用纖維素的剩余量進行比較說明，實驗設(shè)計應(yīng)遵循對照與單一變量原則，故將含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的纖維素的培養(yǎng)基分為3組(無關(guān)變量一致)，一組接種B菌,一組不作處理，一組接種A菌;由題圖3可知,對照組1的纖維素含量最高,B菌的纖維素含量最低，說明B菌分解纖維素的能力最強。答案(1)DNA構(gòu)建基因表達載體感染菊花細(xì)胞，并將Ti質(zhì)粒上的T-DNA轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞染色體DNA降低害蟲種群中抗性基因頻率的增長速率放射性同位素(或熒光分子)標(biāo)記的抗蟲基因5解析：質(zhì)粒是小型環(huán)狀DNA分子,其化學(xué)本質(zhì)是DNA，基因工程的核心是構(gòu)建基因表達載體。根據(jù)農(nóng)桿菌能夠感染菊花細(xì)胞且農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒中的T-DNA

21、可以轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上的特點，通常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。生產(chǎn)上常將轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)基因作物混合種植，其目的是降低害蟲種群中抗性基因頻率的增長速率。用放射性同位素標(biāo)記的抗蟲基因作為探針，用PCR技術(shù)擴增目的基因需根據(jù)基因兩端的部分堿基序列設(shè)計特異性引物,假設(shè)目的基因擴增了n次,則需要引物的對數(shù)為21,已知其中一種引物共用了31個，則2-1=31,n=5。答案(1)鑒別受體細(xì)胞中是否含有Cas9基因和sgRNA基因，從而將含Cas9基因和sgRNA基因的細(xì)胞篩選出來終止子限制顯微注射法PCR細(xì)胞停止分裂，細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變，恢復(fù)(出現(xiàn))接觸抑制現(xiàn)象ABC可

22、將目的基因定點插入所需位點，而不是隨機插入解析:新霉素抗性基因作為標(biāo)記基因，其作用是便于鑒別受體細(xì)胞中是否含有Cas9基因和sgRNA基因，從而將含Cas9基因和sgRNA基因的細(xì)胞篩選出來。基因表達載體含有復(fù)制原點、啟動子、終止子、目的基因、標(biāo)記基因，圖甲基因表達載體中還應(yīng)添加終止子。Cas9蛋白能識別特定核苷酸序列并在特定位點剪切特定的堿基序列，使磷酸二酯鍵斷裂，由此可見,Cas9蛋白在功能上屬于限制性內(nèi)切核酸酶(限制酶)。經(jīng)常用顯微注射技術(shù)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入動物細(xì)胞,因此將Cas9-sgRNA質(zhì)粒和供體質(zhì)粒導(dǎo)入胰腺癌細(xì)胞的方法是顯微注射法。檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞,可采用PCR等技術(shù)。在

23、適宜的條件下進行體外培養(yǎng)，癌細(xì)胞能夠無限增殖。抑癌基因在被激活的情況下，它們具有抑制細(xì)胞增殖作用。若抑癌基因ANp63a定點插入小鼠胰腺癌細(xì)胞中，被4Np63a基因成功轉(zhuǎn)化的胰腺癌細(xì)胞體外培養(yǎng)時，細(xì)胞停止分裂，細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變，恢復(fù)(出現(xiàn))接觸抑制現(xiàn)象。題述基因編輯技術(shù)中，sgRNA是根據(jù)靶基因設(shè)計的引導(dǎo)RNA，能準(zhǔn)確引導(dǎo)Cas9切割與sgRNA配對的靶基因DNA序列，堿基序列已知,A項符合題意。由于同源臂與靶基因的DNA正好配對，能將表達載體準(zhǔn)確地帶到靶基因的位置，所以堿基序列已知,B、C兩項符合題意。因為基因中啟動子的堿基序列不能被轉(zhuǎn)錄，所以由基因表達產(chǎn)物無法推知啟動子堿基序列,D項不符合

24、題意。與傳統(tǒng)的基因工程相比，運用基因編輯技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因生物的明顯優(yōu)點是可將目的基因定點插入所需位點，避免了因目的基因隨機插入受體細(xì)胞DNA引起的生物安全性問題。6答案(1)逆轉(zhuǎn)錄提高DGAT1基因的變性概率DGAT1基因兩端核苷酸(或堿基)序列高溫會破壞氨芐青霉素的結(jié)構(gòu)而導(dǎo)致其失效保證DGAT1基因能在產(chǎn)油微藻細(xì)胞中表達DGAT1基因及其轉(zhuǎn)錄出的mRNADGAT1抗體添加用地?zé)釓U水培養(yǎng)四尾柵藻的對照組，11d后檢測總氮、總磷和氟化物的含量解析:以RNA為模板產(chǎn)生cDNA的過程是逆轉(zhuǎn)錄;在PCR擴增之前,需要對DGAT1基因進行一次預(yù)變性的目的是破壞其中可能存在的較難破壞的二級結(jié)構(gòu)，提高DGAT

25、1基因的變性概率;引物是與模板鏈互補的一段序列,在擴增DGAT1基因時，需要根據(jù)DGAT1基因兩端核苷酸(或堿基)序列設(shè)計特異性引物序列。氨芐青霉素不耐高溫，高壓滅菌會破壞氨芐青霉素的結(jié)構(gòu)而導(dǎo)致其失效?；虻谋磉_需要啟動子和終止子，啟動子與RNA聚合酶結(jié)合驅(qū)動轉(zhuǎn)錄發(fā)生，終止子可使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停下來，所以將DGAT1基因插入pBI121空載體的啟動子與終止子之間的目的是保證DGAT1基因能在產(chǎn)油微藻細(xì)胞中表達。DGAT1基因探針能與DGAT1基因及其轉(zhuǎn)錄出的mRNA形成雜交帶，所以可以檢測到DGAT1基因及其轉(zhuǎn)錄出的mRNA。檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)可用抗原一抗體雜交技術(shù)，需要加入DGAT1抗體檢測。實驗缺少對照組,不能確定受體四尾柵藻本身有無去污能力,所以需要增加一組實驗,即添加用地?zé)釓U水培養(yǎng)四尾柵藻的對照組,11d后檢測總氮、總磷和氟化物的含量，如果11d后檢測總氮、總磷和氟化物的含量比培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)油微藻11d后數(shù)據(jù)高，說明轉(zhuǎn)基因產(chǎn)油微藻有去污能力。7答案(1)B細(xì)胞和記憶B(2)蛋白逆轉(zhuǎn)錄酶(3)抗原抗體雜交顯微注射法介導(dǎo)序列兩端的部分DNA序列使擴增出的介導(dǎo)序列兩端含有限制酶EcoRI和BamHI的識別序列D蛋白質(zhì)工程解析:(1)人體分泌抗體的細(xì)胞是漿細(xì)胞,漿細(xì)胞可來自B細(xì)胞或記憶