一級反滲透水微生物方法學驗證方案(201206)(不寫了)(共15頁)

1、一級反滲透水微生物方法學驗證方案編碼：VP/QBV-12-T000-00頁碼： PAGE 7/7PAGE 頭孢呋辛鈉無菌檢查方法確認方案編碼：VP/QMV-T001-00頁碼： PAGE 3/8項目人員 ItemPersonnel部門/崗位Dept./Position簽名Signature日期Date方案起草Prepared byQC/檢驗員年 月 日 (Y) (M) (D) 方案審核Reviewed byQC/經理 年 月 日 (Y) (M) (D)QA/副經理 年 月 日 (Y) (M) (D)QA/經理年 月 日 (Y) (M) (D)方案批準Approved by質量受權人 年 月 日

2、 (Y) (M) (D)頒發(fā)部門Issued byQA生效日期Effective Date 年 月 日 (Y) (M) (D)分發(fā)部門Distributed to QC制作備份：1份Copies prepared: 1pcs目 錄 TOC o 1-1 h z u HYPERLINK l _Toc312850836 1.概述(i sh) PAGEREF _Toc312850836 h 3 HYPERLINK l _Toc312850837 2.目的(md) PAGEREF _Toc312850837 h 3 HYPERLINK l _Toc312850838 3.依據(yj)及參考文件 PAGE

3、REF _Toc312850838 h 3 HYPERLINK l _Toc312850839 4.驗證小組和各部門職責 PAGEREF _Toc312850839 h 3 HYPERLINK l _Toc312850840 5.驗證時間安排 PAGEREF _Toc312850840 h 4 HYPERLINK l _Toc312850841 6.確認內容 PAGEREF _Toc312850841 h 4 HYPERLINK l _Toc312850842 7.偏差情況6 HYPERLINK l _Toc312850843 8.變更6 HYPERLINK l _Toc312850844 9

4、.驗證結果評價內容6 HYPERLINK l _Toc312850845 附件1 ：培訓確認表 PAGEREF _Toc312850845 h 1 HYPERLINK l _Toc312850846 附件2：文件檢查確認表2 HYPERLINK l _Toc312850847 附件3 ：設備確認結果3 HYPERLINK l _Toc312850848 附件4 ：試驗器材確認結果4 HYPERLINK l _Toc312850849 附件5 ：試驗用菌種確認結果4 HYPERLINK l _Toc312850850 附件6：培養(yǎng)基確認結果5 HYPERLINK l _Toc312850851

5、附件7：試劑確認結果5 HYPERLINK l _Toc312850852 附件8：器皿確認結果6 HYPERLINK l _Toc312850853 附件9：細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)驗證結果記錄7 HYPERLINK l _Toc312850836 附件10：檢驗記錄81.概述(i sh)本公司(n s)制備的一級反滲透水為飲用水經一次反滲透法制備(zhbi)的制藥用水，本方案以中國藥典2010年版為依據，參照純化水微生物限度檢驗方法進行驗證，以證明其方法對一級反滲透水的適用性。方法擬定為：取一級反滲透水2ml置50mlpH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液中，濾干，同法制備2張膜，將濾膜菌面朝上分別

6、貼于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)，營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基置3035倒置培養(yǎng)3天，玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基置2328倒置培養(yǎng)5天，測定菌數(shù)。2.目的根據中國藥典2010年版確定一級反滲透水的微生物限度檢查方法。3.依據及參考文件3.1中國藥典2010年版二部附錄 = 11 * ROMAN XI J“微生物限度檢查法”3.2中國藥品檢驗標準操作規(guī)范2010年版“微生物限度檢查法”3.3 SOP-QC-0213-V01微生物限度檢查法3.4 SOP-QA-017-V01驗證管理規(guī)程4.驗證小組和各部門職責4.1驗證小組及對應職責職位姓名部門具體職責組長林武裝QC驗證總協(xié)調工作，并審核驗證的數(shù)據組員

7、黃微QC負責驗證方案和驗證報告的起草，負責驗證數(shù)據的收集，負責檢品的檢測與驗證記錄的填寫。辛海安QC負責檢品的檢測與驗證記錄的填寫。林明鳳劉利吳東丹代珊QC監(jiān)督驗證過程實施及驗證過程中的偏差及OOS處理。彭艷妃吳東琴QA負責驗證方案和驗證報告的歸檔保存。監(jiān)督驗證過程實施及驗證過程中的偏差及OOS處理。4.2驗證(ynzhng)委員會姓名職務職責顏杰質量受權人1.負責驗證方案及報告的批準；2.負責驗證過程中出現(xiàn)的偏差/OOS的批準放行。馬立如QA經理1.負責驗證方案及報告的審核；2.負責驗證過程中出現(xiàn)的偏差/OOS的評估。張德志QA副經理5. 驗證(ynzhng)時間(shjin)安排時 間工作

8、內容2012年06月方案起草、審批2012年06月2012年07月標準確認、檢驗方法確認2012年07月完成報告6.確認內容6.1驗證前準備6.1.1培訓確認本次確認內容是否已對相關人員進行培訓，檢查確認結果記錄在附件1培訓確認表。6.1.2文件確認本次確認前確認方案及相關指導的SOP是否已經批準。檢查確認結果記錄在附件2文件檢查確認表。如無相關文件，則需要增加發(fā)放。6.1.3儀器設備確認檢查所涉及的設備是否符合實驗要求，確認結果填寫在附件3 設備確認結果中。可接受標準：設備應經確認，在校準有效期內。6.1.4試驗器材確認檢查所涉用試驗器材，確認結果填寫在附件4試驗器材確認結果中，可接受標準：

9、試驗器材各配件應齊全，無損壞。6.1.5試驗(shyn)用菌種確認檢查所涉及的試驗用菌種是否(sh fu)符合實驗要求，確認結果填寫在附件5 試驗(shyn)用菌種確認結果中?？山邮軜藴剩壕N形態(tài)特征應良好、菌種代數(shù)不得超過第五代。6.1.6培養(yǎng)基確認檢查所涉及的培養(yǎng)基是否符合實驗要求，確認結果填寫在附件6 培養(yǎng)基確認結果。可接受標準：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基應在有效期內，應做培養(yǎng)基適應性檢查；因目前中國食品藥品檢定研究院（原中國藥品生物制品檢定所）沒有改良馬丁瓊脂對照培養(yǎng)基，所以未對改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基進行適應性檢查，此次確認只確認該培養(yǎng)其應在有效期內。6.1.7試劑確認檢查所涉用試

10、劑是否符合實驗要求，確認結果填寫在附件7試劑確認結果中。可接受標準：試劑應在有效期內。6.1.8器皿確認檢查所涉用器皿是否符合實驗要求。確認結果填寫在附件8器皿確認記錄中。可接受標準：一般玻璃器皿要求潔凈，無破損，量器要進行校準。6.1.9確認用培養(yǎng)基、緩沖液、平皿、刻度吸管應置121濕熱滅菌30分鐘。6.2驗證方法6.2.1 菌液制備：取金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中經3035培養(yǎng)1824小時、白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基中經2328培養(yǎng)2448小時，分別加入0.9%無菌氯化鈉溶液10ml洗下菌苔轉移至空試管中作為菌懸液原液，用0.9%無

11、菌氯化鈉溶液進行10倍梯度稀釋至含菌數(shù)50100cfu/ml的菌懸液。取黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基中經2328培養(yǎng)57天，加入含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液10ml洗下孢子吸出，轉移至空試管中作為菌懸液原液，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液進行10倍梯度稀釋至含孢子數(shù)50100cfu/ml的孢子懸液。6.2.2菌液計數(shù)：分別(fnbi)取上述5種菌液1ml（小于100cfu加入(jir)培養(yǎng)皿，注入不超過45營養(yǎng)(yngyng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基1520ml，每種菌液作平行2個平板，于3035倒置培養(yǎng)247

12、2小時，測定菌數(shù)。6.2.3供試液制備：由取樣組人員取樣，用已滅菌規(guī)格250ml的無菌藍蓋瓶取100ml一級反滲透水1瓶。6.2.4細菌、霉菌及酵母菌數(shù)回收率測定：驗證試驗至少應進行3次獨立的平行試驗，并計算各試驗菌每次試驗的回收率。要求回收率不低于70%。具體擬定方法如下：6.2.4.1試驗組：取一級反滲透水2ml置50mlpH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液中，同時加入1ml試驗用菌液（含50100cfu的金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌、黑曲霉或白色念珠菌），濾干，每種菌平行制備2張膜，將濾膜菌面朝上貼于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)，細菌置3035倒置培養(yǎng)2天，霉菌及酵

13、母菌數(shù)置2328倒置培養(yǎng)3天，測定菌數(shù)。6.2.4.2菌液組：測定所加的試驗菌數(shù)。6.2.4.3供試品對照組：制備方法同試驗組，不加確認菌液。細菌置3035倒置培養(yǎng)3天，霉菌及酵母菌數(shù)置2328倒置培養(yǎng)5天，測定菌數(shù)。6.2.4.4稀釋劑對照組：用相應的稀釋液替代供試品，按試驗組的制備方法和菌落計數(shù)法測定菌數(shù)。試驗結果：結果見細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)驗證結果記錄6.2.4.5結果判斷：稀釋劑對照組的菌回收率均應不低于70%。若試驗組的菌回收率均不低于70%，則可按該供試液制備方法和計數(shù)法測定供試品的細菌、霉菌或酵母菌數(shù)；若任一次試驗中試驗組的菌回收率低于70%，需分析原因，采取適當方法重新確認。

14、注：試驗組回收率（%）=（試驗組平均菌落數(shù)供試品對照組平均菌落數(shù)）菌液組平均菌落數(shù)100%稀釋劑對照組回收率（%）= 稀釋劑對照組平均菌落數(shù)菌液組平均菌落數(shù)100%6.2.4.6結果統(tǒng)計 實驗結果填寫在細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)驗證結果記錄。7.偏差情況驗證(ynzhng)過程中如果(rgu)有任何偏差應及時記錄，分析原因，評價是否是關鍵偏差，并提出整改措施，并將偏差附于驗證(ynzhng)報告中。8.變更驗證過程中是否有變更，如有變更在再驗證報告中進行說明。9.驗證結果評價內容對驗證結果進行綜合評價，內容包括但不限于：驗證實驗是否有遺漏；確認驗證過程中是否有偏差，偏差是否已經采取糾偏措施和預防措

15、施；驗證記錄是否完整；是否需要進一步補充實驗。評價必須以書面形式寫出報告。藥液 PAGE 1一級反滲透水微生物方法學驗證編碼：R/QBV-12-T019-01頁碼： 1/7附件1 ：培訓(pixn)確認表 培訓(pixn)確認表培訓日期培訓人培訓對象部門簽名黃微代珊QC彭艷妃QC辛海安QC林明鳳QC劉利QC吳東丹QC吳東琴QA確認人/日期： QA復核/日期： 藥液 PAGE 1一級反滲透水微生物方法學驗證編碼：R/QBV-12-T019-01頁碼： 2/7附件2：文件(wnjin)檢查確認表文件檢查(jinch)確認表文件名稱文件編號是否已批準生測室管理規(guī)程SOP-QC-005-V00是 否培

16、養(yǎng)基管理規(guī)程SOP-QC-017-V01是 否菌種管理規(guī)程SOP-QC-012-V01是 否XG1.D型脈動真空滅菌柜使用保養(yǎng)標準操作規(guī)程SOP-QC-0343-V01是 否培養(yǎng)箱使用保養(yǎng)標準操作規(guī)程SOP-QC-303-V00是 否電子天平使用標準操作規(guī)程SOP-QC-317-V00是 否潔凈工作臺使用保養(yǎng)標準操作規(guī)程SOP-QC-304-V00是 否生物安全柜使用保養(yǎng)標準操作規(guī)程SOP-QC-0386-V00是 否Haier 藥品保存箱使用及保養(yǎng)標準操作規(guī)程SOP-QC-0395-V00是 否評價：確認人/日期： QA復核/日期： 一級反滲透水微生物方法學驗證編碼：R/QBV-12-T01

17、9-01頁碼： 3/7附件3 ：設備(shbi)確認結果設備(shbi)確認結果設備名稱型 號生產廠家及出廠編號校準有效期至確認編號霉菌培養(yǎng)箱MJ-300BS-上海新苗醫(yī)療器械制有限公司（0812240005）生化培養(yǎng)箱SPX-300BS-II上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司（0405011）霉菌培養(yǎng)箱MJ-300BS-上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司（0812240004）霉菌培養(yǎng)箱MJ-300BS-II上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司(1005240001)電熱恒溫培養(yǎng)箱DHP-9162上海一恒科技有限公司（035184）脈動真空滅菌柜XG1.DTX-0.24山東新華醫(yī)療器械股份有限公司（080549

18、）脈動真空滅菌柜XG1.DTX-0.36B山東新華醫(yī)療器械股份有限公司（20100953）生物安全柜BSC-1600A2蘇州安泰空氣技術有限公司（J10060420）生物安全柜BSC-1600A2蘇州安泰空氣技術有限公司（J10060421）生物安全柜BSC-1300A2蘇州安泰空氣技術有限公司（J10050341）電子天平PB602-N梅特勒-托利多儀器有限公司（1201130089）評價：確認人/日期： QA復核人/日期： 一級反滲透水微生物方法學驗證編碼：R/QBV-12-T019-01頁碼： 4/7GE6微生物限度檢查方法確認編碼：VP/QBV-T086-00頁碼： 2/7附件4 ：試

19、驗器材確認(qurn)結果試驗器材確認(qurn)結果名稱型 號來 源檢查項目及標準檢查結果微孔濾膜孔徑0.45m，直徑50mm杭州高得泰林有限公司完整，無破損封閉式無菌檢查薄膜過濾器STV2、STV3型浙江寧海白石藥檢儀器廠完整，潔凈，無破損評價：確認人/日期： QA復核人/日期： 附件5 ：試驗(shyn)用菌種確認結果試驗用菌種確認結果菌種名稱及編號來 源保存方法及條件菌種代數(shù)（不得超過第五代）/形態(tài)特征金黃色葡萄球菌CMCC（B）26003中國藥品生物制品檢定所培養(yǎng)基斜面2-8大腸埃希菌CMCC（B）44102中國藥品生物制品檢定所培養(yǎng)基斜面2-8枯草芽孢桿菌CMCC（B）63501中

20、國藥品生物制品檢定所培養(yǎng)基斜面2-8白色念珠菌CMCC（F）98001廣州市藥品檢驗所培養(yǎng)基斜面2-8黑曲霉CMCC（F）98003廣州市藥品檢驗所培養(yǎng)基斜面2-8評價：確認人/日期： QA復核人/日期： 一級反滲透水微生物方法學驗證編碼：R/QBV-12-T019-01頁碼： 5/7附件6：培養(yǎng)基確認(qurn)結果培養(yǎng)基確認(qurn)結果培養(yǎng)基名稱來 源檢查項目及標準批號/有效期至/檢查結果玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基北京三藥科技開發(fā)公司1.應在有效期內2.應做適用性檢查營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基北京三藥科技開發(fā)公司1.應在有效期內2.應做適用性檢查改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基北京三藥科技開發(fā)公司應在有效期內評價：確認

21、人/日期： QA復核人/日期： 附件7：試劑(shj)確認結果 試劑確認結果試劑名稱規(guī)格來 源檢查項目及標準批 號/有效期至pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液250g/瓶北京三藥科技開發(fā)公司應在有效期內氯化鈉500g/瓶廣州化學試劑廠應在有效期內新潔爾滅溶液500ml/瓶廣東恒健制藥有限公司應在有效期內洗必泰5kg/箱錦州九泰制藥有限責任公司應在有效期內吐溫80500ml/瓶天津市大茂化學試劑廠應在有效期內評價：確認人/日期： QA復核人/日期： 一級反滲透水微生物方法學驗證編碼：R/QBV-12-T019-01頁碼： 6/7附件8：器皿(qmn)確認結果 器皿確認(qurn)結果容器名稱規(guī)格型號

22、檢查項目及標準檢查結果培養(yǎng)皿9cm潔凈，無破損燒杯1000ml、500ml潔凈，無破損藍蓋瓶500ml、250ml、100ml潔凈，無破損試管18mm180mm、30 mm200mm潔凈，無破損刻度吸管10 ml 、5 ml、2 ml、1ml潔凈，無破損量筒1000ml 、500ml、100ml潔凈，無破損應校準評價：確認人/日期： QA復核人/日期： 一級反滲透水微生物方法學驗證編碼：R/QBV-12-T000-00頁碼： 7/8附件(fjin)9：細菌、霉菌(mjn)及酵母菌計數(shù)驗證結果記錄 細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)驗證結果(ji gu)記錄檢品名稱：一級反滲透水 批號： 檢驗日期： 檢驗方法：試驗菌種菌種編號菌液組（確認加菌數(shù)）試驗組（檢品+確認加菌數(shù)）稀釋劑對照組（稀釋劑+確認加菌數(shù)）供試品對照組（檢品本底菌數(shù)）試驗組菌回收率%稀釋劑對照組菌回收率%組1組2平均組1組2平均組1組2平均組1組2平均金黃色葡萄球菌大腸埃希菌枯草芽孢桿菌白色念珠菌黑曲霉備注：試驗組的回收率（%）=（試驗組平均菌落數(shù)供試品對照組平均菌落數(shù)）菌液組的平均菌落數(shù)100%稀釋劑對照組的回收率（%）=稀釋劑對照組的平均菌落數(shù)菌液組的平均菌落數(shù)100%回收率應不低于70%結果評定：檢驗人/日期： 復核人/日期： 一級反滲透水微生物方法學驗證編碼：R/QBV-12-T000-00頁碼：