氣相色譜法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1、*有限公司第 頁 共11頁文件名稱文件編碼ZL-SOP-030-01氣相色譜法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程制定人日期審核人日期審核人日期批準(zhǔn)人日期頒發(fā)部門質(zhì)量管理科分發(fā)數(shù)量份生效日期分發(fā)部門：質(zhì)量管理科、中心化驗(yàn)室.目的：規(guī)范氣相色譜法檢驗(yàn)操作，保證檢驗(yàn)的質(zhì)量。.范圍：適于本公司原輔料的氣相色譜法操作。.責(zé)任：質(zhì)量管理科、中心化驗(yàn)室、檢驗(yàn)員。.檢驗(yàn)依據(jù)：中國(guó)藥典2015年版四部氣相色譜法操作方法。.內(nèi)容：簡(jiǎn)述氣相色譜儀是以氣相色譜法原理為基礎(chǔ)而設(shè)計(jì)的儀器。填充柱式氣相色譜 儀是將固定液涂布于惰性載體上，裝入玻璃或不銹鋼材料制成的色譜柱內(nèi)。 毛細(xì)管柱 氣相色譜儀多用將固定液交聯(lián)或鍵合于空管彈性石英毛細(xì)管內(nèi)壁，稱

2、作融熔石英空心毛細(xì)管柱。流動(dòng)相用氣體，稱為載氣。儀器由氣路系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、柱分離系統(tǒng)、檢 測(cè)系統(tǒng)、上述三者的溫度控制系統(tǒng)和數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)所組成。氣相色譜法分析固態(tài)及液 態(tài)樣品時(shí)，是在加溫狀態(tài)下使樣品處于氣態(tài)，在載體上的固定液和載氣間進(jìn)行分配分 離。加溫系統(tǒng)耗電量大，約23kw,故須有可供1015A的電源，儀器接地應(yīng)良好。儀器及性能要求儀器應(yīng)按國(guó)家技術(shù)監(jiān)督局 JJG700- 90氣相色譜儀檢定的規(guī)程的要求作定文件名稱氣相色譜法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼ZL-SOP-030-01期檢定氣路系統(tǒng)氣源 載氣的氮、氮、氫等。常用氮作載氣。氮純度最好使用99.99%的高純氮。但填充柱以氫火焰離子化檢測(cè)器亦可用 9

3、9.9%純氮，氮多用6m高壓鋼瓶裝，按照高壓容器安全操作規(guī)程操作。當(dāng)氣瓶氣壓 下降到20kg/cm2時(shí)，應(yīng)停止使用。由于氫有分子量小、熱導(dǎo)系數(shù)大、粘度小等特點(diǎn)， 因此在缺乏氮的情況下，常采用作熱導(dǎo)檢測(cè)器載氣，在火焰離子化檢測(cè)器中它是必用 的燃?xì)狻榱颂岣咻d氣的線速度，縮短分析時(shí)間，用毛細(xì)管柱分析某些樣品時(shí)，可采 用氫作載氣、氮用補(bǔ)氣、空氣助燃的辦法。氫的來源目前除了氫高壓鋼瓶外，還可采 用氫發(fā)生器，但要用超純水，以防鉗管失效。即使如此，鉗管壽命仍較短，有條件的 地方以采用鋼瓶氫為宜。氫易燃、易爆。使用時(shí)應(yīng)特別注意安全，特別要注意氣路的 各聯(lián)接部分的漏氣檢查?？諝馐菤溲鏅z測(cè)器助燃?xì)怏w，可用小型空

4、氣壓縮機(jī)提供氣源。氣路連接、氣流指示和調(diào)節(jié)在安裝氣瓶減壓閥時(shí)，應(yīng)先將瓶口聯(lián)結(jié)處的灰塵擦干凈，將瓶口向外，旋閥門開磁放氣數(shù)次，吹除灰塵，將減壓閥用扳手?jǐn)Q緊， 再用聯(lián)接管將減壓閥出口聯(lián)至氣相色譜儀。 用表面活性劑溶液檢查連接處氣密性。 為 了保證色譜定性和定量分析的準(zhǔn)確性，載氣流量要求恒定（變化小于1%,在氣相色譜儀中一般都采用減壓閥、穩(wěn)壓閥和穩(wěn)流閥串聯(lián)使用，以控制氣流的穩(wěn)定。在使用這 些閥時(shí)，輸入壓力應(yīng)符合說明書的規(guī)定，以維持壓力的穩(wěn)定。氣流的測(cè)量 氣體的流速是以單位時(shí)間內(nèi)通過色譜柱或檢測(cè)器的氣體體 積大小來表示（ml/min）,通常使用轉(zhuǎn)子流量計(jì)和壓力表換算法，觀察直觀方便，但 不太準(zhǔn)確，比較

5、準(zhǔn)確的方法是用皂膜流量計(jì)， 它可以直接準(zhǔn)確測(cè)出氣體的流量。 采用 23mnrt徑填充柱用氮?dú)鉃檩d氣時(shí)，流速在 3060ml/min之間?，F(xiàn)代儀器有電子流 量檢測(cè)器和電子壓力控制器，可編程控制柱頭壓力和載氣流量。進(jìn)樣系統(tǒng)進(jìn)樣量的大小、進(jìn)樣時(shí)間的長(zhǎng)短，直接影響到柱的分離和最終定量結(jié)果。 在藥物分析中大多是液體進(jìn)樣。微量注射器的使用液體樣品大都采用微量注射器進(jìn)樣，注射器取樣后，針頭刺入氣化室進(jìn)樣口的密封硅橡膠墊， 將液體樣品推入氣化室。為了達(dá)到進(jìn)樣重復(fù) 性，在進(jìn)樣操作時(shí)必須注意：文件名稱氣相色譜法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼ZL-SOP-030-01要用同一根或校準(zhǔn)過的微量注射器進(jìn)樣。?由于液體進(jìn)樣是用注射

6、器刺入膠墊注入較高溫度的氣化室，針頭內(nèi)液體會(huì)因受熱膨脹擠入氣化室中，故每次進(jìn)樣操作應(yīng)當(dāng)一致，用同樣方式和速度進(jìn)樣。以保 證進(jìn)樣的準(zhǔn)確和重現(xiàn)性。?使用前應(yīng)檢查注射器針尖光滑性，使用后必須及時(shí)清洗干凈。進(jìn)樣器?氣化進(jìn)樣氣相色譜液體進(jìn)樣需經(jīng)加熱使樣品氣化，由載氣帶入色譜柱，因此要有氣化室。為了避免氣化的樣品與金屬接觸產(chǎn)生分解， 一般氣化室裝有玻 璃或石英的插管，此種進(jìn)樣方法使未氣化物體殘留在插管內(nèi)，應(yīng)不時(shí)取出插管更換或 清洗。? 柱上氣化進(jìn)樣為了避免樣品的熱分解及氣化室死體積對(duì)樣品稀釋與擴(kuò)散作用，采用柱上氣化進(jìn)樣，即色譜柱進(jìn)口端一段不裝填料，此段空管插入氣化室， 樣品液直接注于填料上。此種進(jìn)樣法不適

7、用于溶劑殘留量測(cè)定， 因其有大量不揮發(fā)供 試品，結(jié)在色譜柱進(jìn)口端。?毛細(xì)管色譜柱進(jìn)樣器 分為分流進(jìn)樣和不分流進(jìn)樣。分流進(jìn)樣氣化室內(nèi)插管內(nèi)徑較不分流進(jìn)樣大，并具有分流調(diào)節(jié)閥，以便調(diào)節(jié)分流比，分去大部分樣品，以 免柱過載。?除分流以調(diào)節(jié)閥外，儀器另串聯(lián)有分流截止閥于分流氣路中。不分流進(jìn)樣則關(guān)閉此閥。常用分流進(jìn)樣方式是先將分流截止閥關(guān)閉， 進(jìn)樣后等候一定時(shí)間打開分 流截止閥分流。除有明確規(guī)定外，可根據(jù)予試選擇最佳條件（如靈敏度、重復(fù)性、分 離度等）進(jìn)行。?進(jìn)樣密封硅橡膠墊應(yīng)先加熱老化，除去揮發(fā)性物質(zhì)再用。柱箱柱箱溫度的波動(dòng)會(huì)影響色譜分析結(jié)果的重現(xiàn)性，因此要求柱箱控溫 精度在 1C,柱箱溫度波動(dòng)小于0

8、.1 C/h ；溫度梯度波動(dòng)應(yīng)小于使用溫度的 2%溫 度控制分恒溫和程序升溫兩種，前者用于簡(jiǎn)單組分分析，后者用于復(fù)雜多組分分析。檢測(cè)器 氣相色譜檢測(cè)器有：火焰離子化（FID）、熱導(dǎo)（TCD、電子俘獲 （ECD、火焰光度（FPD、熱電離（TSD或稱氮磷（NPD檢測(cè)器等。在藥物分析中 火焰離子化（FID）檢測(cè)器是最常用的檢測(cè)器。FID檢測(cè)器操作條件文件名稱氣相色譜法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼ZL-SOP-030-01?氣體流速FID檢測(cè)器須用3種不同氣體：載氣、氫和空氣，通常 3種氣體流速比約為：1: 1: 10為合適。使用毛細(xì)管柱時(shí)要增加補(bǔ)氣，即在毛細(xì)管出口到 檢測(cè)器流路中增加補(bǔ)氣的輔助氣路，其目的是

9、增加柱出口到檢測(cè)器的載氣速度，以減少這段死體積的影響，使靈敏度和峰形有所改善。?檢測(cè)器溫度 溫度對(duì)FID檢測(cè)器的靈敏度和噪聲的影響不顯著，為了防止有機(jī)物冷凝，一般控制在比柱箱溫度高 3050C。此時(shí)氫在檢測(cè)器中燃燒生成水， 以水蒸氣逸出檢測(cè)器，若溫度低，水冷凝在離子化室會(huì)造成漏電并使色譜基線不穩(wěn)， 故檢測(cè)溫度應(yīng)高于150 C。TCDR作條件?檢測(cè)器溫度和載氣流速的波動(dòng)影響穩(wěn)定性，故必須穩(wěn)定。檢測(cè)器溫度一般設(shè)定與柱溫相同或高于柱溫。?因熱導(dǎo)檢測(cè)是基于參比池氣路中流過的純載氣與樣品池氣路中有被測(cè)組分流過時(shí)導(dǎo)熱系數(shù)的差別而測(cè)定，故選用與被測(cè)成份蒸氣導(dǎo)熱系數(shù)相差大的氣體作為 載氣靈敏度高。用作有機(jī)物、

10、水分測(cè)定時(shí)，理想的惰性載氣氮。若不須高靈敏度時(shí)， 也可采用氮。氫的導(dǎo)熱系數(shù)大，也可作分析某些品種的載氣，但須注意通風(fēng)。ECDS作條件?ECD勺放射源多用63Ni,可在450c以下工作，有些EC訓(xùn)瓶為放射源的，檢測(cè)器溫度不得超過200C。?ECD寸電負(fù)性成分靈敏度高，故要求載氣純度高，至少要在99.99%以上，檢測(cè)器的溫度對(duì)響應(yīng)值也有較大影響。色譜柱色譜分析好壞主要決定用色譜柱，氣相色譜柱分為填充柱和毛細(xì) 管柱兩大類。填充柱? 柱材、柱長(zhǎng)與柱徑 常用有不銹鋼柱和玻璃柱，不銹鋼柱主要優(yōu)點(diǎn)是堅(jiān)固、 耐用，但不適用于不穩(wěn)定的化合物，玻璃柱無以上缺點(diǎn)，但易破碎。柱長(zhǎng)常用13ml 以2m為最常用。柱徑一般

11、為24mm細(xì)徑柱的柱效比粗徑柱高。? 填料 色譜柱內(nèi)填料分為三大類：吸附劑類、多孔性高分子微球和涂布 固定液的硅藻土類載體，吸附劑常用于氣體。?多孔性高分子微球，它是以苯環(huán)為主鏈的交聯(lián)高分子，常用苯乙烯和二乙文件名稱氣相色譜法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼ZL-SOP-030-01烯基苯的共聚物，采用不同的制備條件和原料，可合成具有不同極性微球。商品不同型號(hào)的微球，適用于不同極性的化合物。微球具有交聯(lián)結(jié)構(gòu)，機(jī)械強(qiáng)度好，填充過程 不會(huì)破碎，有很寬的溫度使用范圍（78240C）,可用于分析永久性氣體或短鏈極性 化合物，醇、酸和胺類等，水在這類柱上分離出對(duì)稱的峰。微球可直接裝填，但因微 球帶有靜電，裝填不易，

12、為此可用丙酮潤(rùn)濕過的紗布擦填充漏斗，以消除靜電，使填 充順利進(jìn)行。?硅藻土類載體，分為紅色和白色載體兩種。（1）紅色載體 是將天然硅藻土粉碎，并壓成磚形，在 900 c以上煨燒，由于 生成氧化鐵而產(chǎn)生紅色。紅色載體表面積大（4m3/g ）,孔穴密集，孔徑?。↖pmj）, 結(jié)構(gòu)緊密，機(jī)械強(qiáng)度好，但它表面活性中心較多，吸附性較大，適用于非極性固定液， 使用于分析非極性或弱極性物質(zhì)，若分析極性物質(zhì)時(shí)會(huì)有色譜峰拖尾現(xiàn)象。（2） 白色載體 在天然硅藻土中加入小量碳酸鈉助熔劑，在 900c高溫鍛燒 后，氧化鐵變成了無色的硅酸鈉鐵絡(luò)合物， 使原來淺灰色的天然硅藻土變成白色。 白 色載體的表面積小（1m2/g

13、）,孔徑粗（9pm）,結(jié)構(gòu)疏松，機(jī)械強(qiáng)度不如紅色載體。但它表面活性中心顯著減少，吸附性小，適用于極性固定液，可用于分析極性或氫鍵 型化合物。固定液 對(duì)固定液的要求：在操作范圍內(nèi)蒸氣壓低，熱穩(wěn)定性好，樣品各 組 分在其中應(yīng)有足夠溶解能力，選擇性高，即對(duì)兩個(gè)沸點(diǎn)相同或相近但屬于不同類型的 化合物有盡可能高的分離能力。固定液的選擇取決于樣品的組成。一般按“相似相溶”的原則，即組分的 結(jié)構(gòu)、性質(zhì)與固定液相似時(shí)，在固定液中溶解度大，因而保留時(shí)間長(zhǎng)；反之，溶解度 小，保留時(shí)間短。毛細(xì)管柱（空心柱）毛細(xì)管柱具有分離效能高，分析速度快，樣品用量少等特點(diǎn)。最常用FSOTt固定相。FSOT柱的選擇FSOT柱的選擇

14、應(yīng)考慮以下因素：? 固定相 在進(jìn)行樣品分析時(shí)，首先選用非極性固定相，因?yàn)檫@種柱性能 好，如柱效高、對(duì)氧不敏感、最高使用溫度高、柱壽命較長(zhǎng)等特點(diǎn)。必要時(shí)應(yīng)選用極 性較高的固定相，以增加組分與固定液的相互作用達(dá)到較好的分離。文件名稱氣相色譜法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼ZL-SOP-030-01?柱內(nèi)徑與固定相液膜厚度內(nèi)徑0.25mm膜厚0.25艮m的柱是常用 柱,兼顧了柱效和樣品容量。為了增加樣品容量?？蛇x擇內(nèi)徑較大、液膜較厚的柱，如 0.35mmid、0.50仙m的柱。但是增加樣品容量是在犧牲柱效的條件下獲得的。為了提 高柱效，可選用細(xì)內(nèi)徑、薄液膜柱如 0.53mmid的柱，液膜厚度15仙m，則在一定

15、 程度上可代替填充柱，且具有較高的柱效，對(duì)儀器及操作者的要求較低，定量分析的 再現(xiàn)性也提高。? 柱長(zhǎng) 商品術(shù)一般有12m 25m 50m三種，一般常采用25m長(zhǎng)柱，復(fù)雜 樣品需用較長(zhǎng)的柱。如樣品中組分不多、性質(zhì)不同，則用短柱比較有利，這包括分析 速度快，固定相流失少，費(fèi)用少等。? 柱的老化、維護(hù)與貯存?與填充柱一樣，新柱需要老化，以除去殘留溶劑及低分子量的聚合物。止匕外, 老的柱也應(yīng)定期老化，尤其是出現(xiàn)基線漂移，某些色譜峰開始拖尾時(shí)，以除去樣品中 的難揮發(fā)物在柱頭的積累。要用高純度的載氣，以免縮短柱壽命，如聚乙二醇固定相 柱最易被氧化、毛細(xì)管柱的前端數(shù)厘米處易損壞，如不揮發(fā)物的積累，進(jìn)樣溶劑的

16、侵 蝕及機(jī)械損傷等。可以切除這受損害的幾厘米處，不至于影響總的柱效。切除時(shí)切口 應(yīng)平整。如果是橫向交聯(lián)或鍵合相柱，則可用適當(dāng)?shù)娜軇┫礈斐ノ廴疚铮?以使柱再 生。選擇何種溶劑取決于污染的性質(zhì)、程度和固定相的種類。一般用戊烷來洗滌。如 污染物物極性較大，可用二氯甲烷或甲醇。但橫向交聯(lián)的聚乙二醇一20M應(yīng)避免用極性溶劑和二氯甲烷洗滌。洗滌 FSOTS, 一般用2ml溶劑已足夠。選用一裝置，加 壓以使溶劑自出口端向入口端緩緩?fù)ㄟ^色譜柱。洗滌后，先在低溫下除去溶劑，再進(jìn)行老化處理。?毛細(xì)管色譜柱如不使用，應(yīng)小心貯存，可用硅橡膠塊將兩端封閉，置于盒中。?色譜數(shù)據(jù)采集處理系統(tǒng)，由于微電子技術(shù)的不斷發(fā)展，特

17、別是微處理機(jī)的出現(xiàn)，因此氣相色譜儀可以利用微處理機(jī)完成數(shù)據(jù)采集和處理，也可以對(duì)色譜儀的進(jìn)樣哭喊，柱溫、檢測(cè)器、溫度程序等參數(shù)進(jìn)行控制，使色譜分析自動(dòng)化成為可能， 因商品規(guī)格型號(hào)不同，具體操作也不一樣，可根據(jù)儀器說明書進(jìn)行操作。開機(jī)操作檢查儀器上電器開關(guān)，均處于“關(guān)”位置。文件名稱氣相色譜法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼ZL-SOP-030-01選好合用的色譜柱，柱兩端應(yīng)堵有盲堵。取下盲堵，分清入口端及出口端，裝于儀器上，擰緊固定螺母，但也勿過緊，以不漏氣為度。若有換下色譜柱，應(yīng)堵上盲堵保存。開啟載氣鋼瓶上總閥調(diào)節(jié)減壓閥至規(guī)定壓力。用表面活性劑溶液檢查柱聯(lián)接處是否漏氣，如有漏氣應(yīng)檢查刃環(huán)或再略加 緊固螺母

18、。如果儀器有恒壓和恒流閥調(diào)節(jié)氣流量，換柱后可不再調(diào)節(jié)，若有疑點(diǎn)應(yīng)用 皂膜流量計(jì)檢查和調(diào)節(jié)流量。打開各部分電路開關(guān)，設(shè)定氣化器、柱箱和檢測(cè)器溫度。開始加熱。待各部分溫度恒定后，開氫鋼瓶總閥、空氣壓縮機(jī)總閥，同載氣操作。按下點(diǎn)火按鈕，應(yīng)有“嚇”的點(diǎn)火聲，用玻璃片置火焰離子化檢測(cè)器氣體出口處，檢視玻璃片上應(yīng)有水霧，表示已點(diǎn)著火，同是時(shí)記錄器應(yīng)有響應(yīng)。調(diào)節(jié)儀器的放大器靈敏度等，走基線，待基線穩(wěn)定度達(dá)到可以接受范圍內(nèi)， 即可進(jìn)樣分析。氣相色譜法測(cè)定樣品溶液時(shí)，多用微量注射器進(jìn)樣。采用手工進(jìn)樣時(shí)，精 密度決定于操作熟練程度，各步操作應(yīng)盡量一致。為了消除注射器針頭進(jìn)入進(jìn)樣器期 間因溶液受熱膨脹造成進(jìn)樣體積不

19、準(zhǔn)確的因素，可試用以下進(jìn)樣方法：將微量注射器用配制樣品的溶劑充分沖洗。輕輕推入活塞至完全進(jìn)入針筒，使針頭內(nèi)充滿溶劑。在空氣中小心抽出活塞至一定刻度，例如510 n的注射器可將活塞端抽至 1.0，刻度處。將注射器針頭插入樣品溶液中，慢慢抽取數(shù)N l樣品溶液，可以看到針筒 內(nèi)靠近活塞端有一段溶劑（具體積為針頭內(nèi)的體積），中間有一段空氣，靠近針頭一 段為樣品溶液。取出注射器，慢慢推出樣品溶液，使活塞端至所需進(jìn)樣體積加抽取空氣體 積處，例如按3.10.3項(xiàng)在1.0口，欲進(jìn)樣1.0口，則推至2.0/ 刻度處。用濾紙擦凈針頭外部。再次小心抽出活塞，使空氣進(jìn)入針筒，并使樣品溶液一空氣界面準(zhǔn)確至一 整數(shù)刻度處

20、，便于讀取樣品溶液體積，例如至 1.0口，此時(shí)可以看到針筒內(nèi)自針頭文件名稱氣相色譜法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼ZL-SOP-030-01處至活塞端共有四段：（1）空氣（1.0 口處）；（2）樣品溶液（1.02.0口）；（3）空氣（2.03.0口）；（4）溶劑（具體積為針頭內(nèi)體積）。核對(duì)樣品溶液體積。將注射器針頭全部插入進(jìn)樣器。注入樣品，并拔出針頭，即完成進(jìn)樣。分析完畢，待各組分均流出后，可關(guān)斷各加熱電源開關(guān)，同時(shí)關(guān)氫，空氣, 待檢測(cè)器及柱箱降溫至約150c以下，關(guān)載氣使用登記。如工作完畢欲取下色譜柱，取下后應(yīng)將柱兩端用盲堵堵上。如果是做溶劑殘留量試驗(yàn)，應(yīng)取出氣化器內(nèi)玻璃或石英插管，清洗干凈再 放入。

21、樣品的測(cè)定儀器系統(tǒng)適用性試驗(yàn)應(yīng)符合藥典或部頒標(biāo)準(zhǔn)各品種項(xiàng)下的要求。供試品及對(duì)照品的配制 精密稱取供試品和對(duì)照品各 2份，按各該品種 項(xiàng)下的規(guī)定方法，準(zhǔn)確配制供試品溶液和對(duì)照品溶液， 按規(guī)定精密加入內(nèi)標(biāo)液或用外 標(biāo)法測(cè)定。預(yù)試驗(yàn) 初次測(cè)定該品種時(shí)，可先經(jīng)預(yù)試驗(yàn)以確定儀器參數(shù)，根據(jù)預(yù)試 驗(yàn)情況，可適當(dāng)調(diào)節(jié)柱溫，載氣流速，進(jìn)樣量等，使色譜峰的保留時(shí)間、分離度、峰 面積或峰高的測(cè)量能符合要求。如用積分儀作峰面積應(yīng)不得少于10, 000pV-s0否則應(yīng)調(diào)節(jié)進(jìn)樣量，也可調(diào)節(jié) FID的靈敏度，但應(yīng)注意信噪比是否達(dá)到。正式測(cè)定 正式測(cè)定時(shí)，每份校正因子測(cè)定溶液（或?qū)φ掌啡芤海┘肮?試品溶液各進(jìn)樣2次，2份共4

22、個(gè)校正因子及4個(gè)供試品數(shù)據(jù)結(jié)果平均值相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差 （RSD不得大于1.5%。用外標(biāo)法測(cè)定同上相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差不得大于 2.5%。如超過應(yīng)重新 測(cè)定。多份供試品測(cè)定時(shí)，每隔 5批應(yīng)再進(jìn)對(duì)照品2次，核對(duì)一下儀器有無改變。原始記錄氣相色譜分析的原始記錄，除按一般藥品檢驗(yàn)記錄的要求記錄外，應(yīng)注 明儀器型號(hào)，色譜柱號(hào)，氣化室、色譜柱箱、檢測(cè)器的溫度，載氣流量，放大器靈敏 度及衰減，進(jìn)樣體積，并附色譜圖及處理打印結(jié)果。填充色譜柱的填充及其它維護(hù)柱清洗 不銹鋼新柱先用溫?zé)?%- 10%K氧化鈉液浸泡，先后用水、乙醇、文件名稱氣相色譜法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼ZL-SOP-030-01丙酮清洗，烘干。玻璃柱用稀硝酸（5%

23、-10%浸泡,再用水、乙醇清洗，烘干。為 了減少拖尾現(xiàn)象，可作硅烷化處理：方法是用5%!氯二甲基硅烷（DMCS的甲苯溶液浸泡510分鐘，傾出后，用甲苯?jīng)_洗1次，再用甲醇沖洗，然后再烘干。處理 了的空柱子如不立即使用，兩端應(yīng)用套子套好。填料顆粒大小的選擇 選用顆粒直徑有0.250.18mm（6080目）； 0.18 0.15mm（80100 目）;0.15 0.125mm（100120 目）3 種,要求粒度均勻， 在20目以內(nèi)，填裝后顆問孔隙一致，減少渦流擴(kuò)散。一般24mmft徑柱，23m柱長(zhǎng)，使用0.250.18粒度比較適合，柱前壓低。如果使用于難分離物質(zhì)對(duì)時(shí)，可用 0.180.15mm使柱長(zhǎng)

24、不超過2m以上。0.150.125mn#度，最好用于1.5m長(zhǎng)度以 下的色譜柱。固定液的涂布固定液涂布量白色載體用作分析柱的涂布量一般可選 10% 蒸發(fā)法 先將一量的固定液溶解于一定體積的溶劑中，加入一定量的過 篩的載體，注意載體加入后能被溶劑全部浸沒，輕輕攪動(dòng)后，移入蒸發(fā)皿中，在通風(fēng) 廚中使溶劑揮發(fā)，在揮發(fā)同時(shí)不斷輕輕攪拌載體，直至溶劑揮發(fā)后，再移入紅外燈下 使溶劑揮發(fā)干燥，移入烘箱中100120c烘2小時(shí)。如果涂布硅酮類固定液，如 SE -30在室溫溶劑中溶解完全需16小時(shí)以上，應(yīng)使用回流加熱法，即將溶解在適宜溶 劑的固定液，置于回流瓶中（磨口）在水浴上加熱回流1小時(shí)，使固定液溶解完全，放

25、冷，加入一定量載體，再加熱回流 2小時(shí)，將載體和溶劑移入蒸發(fā)皿中，以下操 作同上述方法。此種蒸發(fā)法固定液在溶劑蒸發(fā)時(shí)有爬逸現(xiàn)象，造成涂布不勻，可于蒸 發(fā)時(shí)用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，但這樣容易使載體破碎，故應(yīng)多涂布一些，烤干后再過篩一次。過濾法其主要優(yōu)點(diǎn)是固定相涂布均勻，這對(duì)低濃度的固定相尤為重要， 另處也很少發(fā)生載體破損現(xiàn)象，但是難于得到再現(xiàn)的、精確的固定相含量。即準(zhǔn)確稱 取一定量的固定液，溶于溶劑中，使成一定濃度的固定液，用本法涂布固定液時(shí)，配 制的固定液的濃度與預(yù)期載體上固定液含量（重量比）相同。如用白色硅藻土載體， 固定液溶液濃度約為預(yù)期的載體上固定液含量之半。因?yàn)榧t色載體每克吸收溶液 1ml, 一般白色擔(dān)體吸收溶液約2ml。操作方法：先將配制好的溶液置于抽濾瓶中， 溶液用量約為載體重量的4倍，稱取一定量的載體（通常為 25g左右），分散于固定 液溶液中，緩緩減壓抽空后，再旋動(dòng)抽濾幾分鐘以便釋出載體中的空氣，使溶液滲入文件名稱氣相色譜法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼ZL-SOP-030-01到載體顆粒中，然后放氣。輕輕地旋動(dòng)抽濾瓶，將擔(dān)體懸浮起來，迅速一次傾入布氏 漏斗中，使形成光滑平整的載體層，抽濾時(shí)，真空度應(yīng)保持盡可能低，待抽濾到開始 出現(xiàn)滴狀時(shí)，立即停止抽濾，把載體轉(zhuǎn)移到蒸發(fā)皿中，鋪平，自然揮發(fā)干燥，然