原子力顯微鏡對星形細胞瘤、間變性星形細胞瘤的鑒別診斷

1、原子力顯微鏡對星形細胞瘤、間變性星形細胞瘤的區(qū)分診斷張佳怡紀小龍王美娥【摘要】目的通過原子力顯微鏡af不雅察星形細胞瘤(ii/h)細胞、間變性星形細胞瘤iii/h)細胞的細胞膜外貌超微布局的變革和差異，為臨床的星形細胞瘤、間變性星形細胞瘤區(qū)分診斷提供幫助和指導(dǎo)。要領(lǐng)拔取星形細胞瘤、間變性星形細胞瘤各30例，每例隨機拔取10個細胞作為研究工具，應(yīng)用af并對每例的10個細胞舉行掃描，對每個細胞膜外貌1地區(qū)的均勻粗糙度、峰值、外貌積差值舉行丈量，比擬不雅察兩組細胞膜外貌的納米布局變革、尋出腫瘤細胞特異性的形態(tài)學(xué)特性。效果通過不雅察創(chuàng)造星形細胞瘤、間變性星形細胞瘤的細胞膜外貌存在著明顯的差異，星形細胞

2、瘤細胞膜外貌的均勻粗糙度、峰值、外貌積差值均顯著低于間變性星形細胞瘤(p0.05)。結(jié)論本實行應(yīng)用af對星形細胞瘤細胞、間變性星形細胞瘤細胞舉行不雅察，并根據(jù)細胞膜外貌數(shù)據(jù)對星形細胞瘤、間變性星形細胞瘤舉行區(qū)分診斷。【關(guān)鍵詞】原子力顯微鏡星形細胞瘤間變性星形細胞瘤膜卵白原子力顯微鏡atifreirspe,af1是具有原子級區(qū)分率的新一代顯微鏡，可以在通例生理環(huán)境中清楚出現(xiàn)出細胞膜外貌的超微布局并舉行數(shù)據(jù)闡發(fā)。af的出現(xiàn)對膜卵白布局的熟悉提供了更廣的空間，卵白質(zhì)分子在脂質(zhì)上有紀律地擺列大概能在膜上形成二維晶體，均得當于應(yīng)用af研究2，3，使人們對生命的熟悉開始深化到了納米級程度上的超微不雅范疇。

3、當代醫(yī)學(xué)研究表白4-6：腫瘤細胞膜外貌受體卵白與細胞外部生長因子或別的刺激因素結(jié)合后的跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)在腫瘤的產(chǎn)生中起著緊張作用。細胞外部信號無論是作用于細胞核內(nèi)照舊核外，它們的通報都必需經(jīng)過細胞膜，并與細胞膜外貌的特異性受體卵白結(jié)合，然后通報至細胞內(nèi)而發(fā)揮作用。一旦細胞外貌受體卵白的布局與成效出現(xiàn)非常，那么其連續(xù)的激活狀態(tài)將導(dǎo)致細胞增殖失控，從而促進腫瘤的產(chǎn)生。腫瘤細胞的生長歷程一定伴有細胞膜外貌卵白數(shù)目和形態(tài)的改變。接納af對星形細胞瘤細胞和間變性星形細胞瘤細胞舉行不雅察，研究二者細胞膜外貌超微布局的差異，為其臨床的區(qū)分診斷提供根據(jù)。1質(zhì)料與要領(lǐng)1.1質(zhì)料和裝備標本全部經(jīng)he染色確定為星形細胞

4、瘤、間變性星形細胞瘤的奇怪構(gòu)造細胞，泉源于武警總病院。各30例；2甲醛溶液、蘇木素伊紅染液、巴氏染液、酒精、二甲苯。重要裝備：原子力顯微鏡(型號為nanspea(digitalinstruentsin.,santabarbara,a)，接納ns11型針尖；lypusbx50光學(xué)顯微鏡；顯微圖像闡發(fā)體系；超凈事情臺；離心機、漩渦混淆器。1.2要領(lǐng)2效果2.1細胞形態(tài)不雅察效果星形細胞瘤細胞外貌出現(xiàn)層狀擺列的皺褶布局，胞體間見大量粗細不一的胞突，偶然難以區(qū)分它們的所屬細胞。間變性星形細胞瘤細胞密度大，胞膜表達不但滑皺褶布局更為顯著，瘤細胞胞突少，是非不一，但重要為較短小突起。2.2細胞膜af下納米

5、程度表示使用af的圖像闡發(fā)軟件體系對星形細胞瘤細胞、間變性星形細胞瘤細胞細胞膜外貌緊張指標即均勻粗糙度eanrughness、峰值peakunt和外貌積差值surfaeareadifferene舉行丈量與闡發(fā)如表1。與星形細胞瘤細胞比力，間變性星形細胞瘤細胞的均勻粗糙度升高，峰值增長，外貌積差值變大，具有明顯性差異(p0.05)如圖1、2。因此可通過這三者的差異對星形細胞瘤和間變性星形細胞瘤舉行區(qū)分診斷。3討論如今，國表里文獻報道中，對付星形細胞瘤、間變性星形細胞瘤的區(qū)分診斷方面的研究，重要會合在影像學(xué)和分子生物學(xué)技能。如t和ri可使用灌注成像來對腫瘤的性子舉行預(yù)計7，8。再如，應(yīng)用分子生物學(xué)

6、技能檢測星形膠質(zhì)細胞瘤細胞中端粒酶、pna、ki-67、kit、gt等相干分子9-13的表達。但是都無法從細胞的納米級別的形態(tài)學(xué)上不雅察細胞的形貌差異。原子力顯微鏡是近十幾年來生長起來的超微外貌闡發(fā)成像技能。它可以對經(jīng)典透射電鏡和掃描電鏡技能無法不雅測到的非導(dǎo)電質(zhì)料外貌納米標準布局舉行原子程度成像和調(diào)控14，15。其橫向區(qū)分率到達0.10.2n，縱向區(qū)分率到達0.01n，比年來漸漸被應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)范疇研究。它可以在靠近生理狀態(tài)下在納米標準對構(gòu)造、細胞、微生物、dna、卵白質(zhì)16，17等種種生物樣品舉行成像和把持。因此af不但在底子醫(yī)學(xué)研究范疇越來越受到人們的存眷!而且已漸漸向臨床應(yīng)用過渡。使用

7、原子力顯微鏡通過對細胞舉行掃描，從細胞形態(tài)學(xué)方面舉行腫瘤細胞良惡性的區(qū)分診斷，此要領(lǐng)越發(fā)輕便快捷，診斷正確率進一步進步，對腫瘤細胞的進一步研究也有著緊張意義。在本實行中應(yīng)用af對星形細胞瘤細胞、間變性星形細胞瘤細胞的細胞形態(tài)舉行不雅測，創(chuàng)造無論分化程度怎樣，瘤細胞外貌均有差異程度的皺褶，巨細不等、粗細不一的胞突，且分化越好，突起越多，細而長。使用af圖像闡發(fā)軟件丈量細胞膜外貌微細布局，星形細胞瘤細胞膜外貌的均勻粗糙度、峰值、外貌積差值3種數(shù)據(jù)都顯著低于間變性星形細胞瘤。3種數(shù)據(jù)反響了細胞膜外貌卵白的漫衍環(huán)境，數(shù)值越大代表膜外貌的卵白越多。這與其成效是相對應(yīng)的，從星形細胞瘤細胞到間變性星形細胞瘤

8、細胞，細胞的活潑程度是漸漸升高的，因此可以判斷細胞的活潑程度的增長即可表示在細胞膜外貌卵白的變革上，卵白的數(shù)目隨之增多。該實行可清楚的不雅察到細胞膜外貌卵白的變革環(huán)境，證實白細胞膜外貌卵白的數(shù)目又代表著其成效狀態(tài)的活潑程度。因此，本實行從形態(tài)學(xué)動身，借助af可以或許清楚出現(xiàn)細胞膜外貌納米級布局的絕對上風，以星形細胞瘤、間變性星形細胞瘤的細胞為研究工具，不雅察并闡發(fā)細胞膜外貌特異性的形態(tài)學(xué)變革和差異，為臨床的星形細胞瘤、間變性星形細胞瘤的區(qū)分診斷提供指導(dǎo)。本研究表白af可以在納米標準對細胞膜外貌卵白舉行直不雅的三維成像，并通過af圖像闡發(fā)軟件體系對細胞膜外貌緊張指標舉行丈量和闡發(fā)，比年來隨著原子

9、力顯微鏡新的操縱形式的相繼出現(xiàn)18，使得af測得的環(huán)境更靠近真實環(huán)境，將會為臨床診斷提供更多的幫助。此文圖1-2見第96頁【參考文獻】1binningg,quatef,gerberh.atifreirspej.physrevlett,1986,56:930-933.2ertenpj,reigyh,grtbl,etal.prgressintheanalysisfebraneprteinstrutureandfuntinj.jfebslett,2002,529:65-72.3dankert,azzanti,tninir,etal.usingatifreirspytinvestigatepathla

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