蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能-生物化學(xué)與分子生物學(xué)課件

1、生物化學(xué)課件張丕顯蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能第 一 章Structure and Function of Protein一、什么是蛋白質(zhì)?蛋白質(zhì)(protein)是由許多氨基酸(amino acids)通過肽鍵(peptide bond)相連形成的高分子含氮化合物。概述二、蛋白質(zhì)的生物學(xué)重要性1. 蛋白質(zhì)是生物 體重要組成成分分布廣：所有器官、組織都含有蛋白質(zhì)；細(xì)胞的各個(gè)部分都含有蛋白質(zhì)。含量高：蛋白質(zhì)是細(xì)胞內(nèi)最豐富的有機(jī)分子，占人體干重的45，某些組織含量更高，例如脾、肺及橫紋肌等高達(dá)80。1）作為生物催化劑（酶）2）代謝調(diào)節(jié)作用3）免疫保護(hù)作用4）物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)和存儲(chǔ)5）運(yùn)動(dòng)與支持作用6）參與細(xì)胞間信

2、息傳遞2. 蛋白質(zhì)具有重要的生物學(xué)功能3. 氧化供能蛋 白 質(zhì) 的 分 子 組 成The Molecular Component of Protein第 一 節(jié)一、 組成蛋白質(zhì)的元素.主要有C、H、O、N和S。 有些蛋白質(zhì)含有少量磷或金屬元素鐵、銅、鋅、錳、鈷、鉬，個(gè)別蛋白質(zhì)還含有碘 。 各種蛋白質(zhì)的含氮量很接近，平均為16。 由于體內(nèi)的含氮物質(zhì)以蛋白質(zhì)為主，因此，只要測(cè)定生物樣品中的含氮量，就可以根據(jù)以下公式推算出蛋白質(zhì)的大致含量：100克樣品中蛋白質(zhì)的含量 ( g % )= 每克樣品含氮克數(shù) 6.251001/16% 蛋白質(zhì)元素組成的特點(diǎn)二、蛋白質(zhì)的基本單位-氨基酸(一)氨基酸的結(jié)構(gòu)(通式

3、) 存在自然界中的氨基酸有300余種，但組成人體蛋白質(zhì)的氨基酸僅有20種(20-22)，且均屬 L-氨基酸（甘氨酸除外）如圖示。H甘氨酸CH3丙氨酸L-氨基酸的通式R-氨基酸 C H COOH RR:H 甘AA; R:CH3 丙AAR:CH-OH 蘇AA CH3H2N非極性疏水性氨基酸極性氨基酸酸性氨基酸堿性氨基酸(二）氨基酸的分類* 20種氨基酸的英文名稱、縮寫符號(hào)及分類如下:甘氨酸 glycine Gly G 5.97丙氨酸 alanine Ala A 6.00纈氨酸 valine Val V 5.96亮氨酸 leucine Leu L 5.98 異亮氨酸 isoleucine Ile I

4、 6.02 苯丙氨酸 phenylalanine Phe F 5.48脯氨酸 proline Pro P 6.30非極性疏水性氨基酸目 錄色氨酸 tryptophan Try W 5.89絲氨酸 serine Ser S 5.68酪氨酸 tyrosine Try Y 5.66 半胱氨酸 cysteine Cys C 5.07 蛋氨酸 methionine Met M 5.74天冬酰胺 asparagine Asn N 5.41 谷氨酰胺 glutamine Gln Q 5.65 蘇氨酸 threonine Thr T 5.602. 極性中性氨基酸目 錄天冬氨酸 aspartic acid As

5、p D 2.97谷氨酸 glutamic acid Glu E 3.22賴氨酸 lysine Lys K 9.74精氨酸 arginine Arg R 10.76組氨酸 histidine His H 7.593. 酸性氨基酸4. 堿性氨基酸目 錄幾種特殊氨基酸 脯氨酸（亞氨基酸） 半胱氨酸 +胱氨酸二硫鍵-HH1. 兩性解離及等電點(diǎn)(三) 氨基酸的理化性質(zhì)+ OH+ H+ OH+ H+pHpIpH=pI等電點(diǎn)(pI)氨基酸酸性解離和堿性解離的程度相等，分子所帶的凈電荷為零，此時(shí)溶液的pH值就稱為該氨基酸的等電點(diǎn)除堿性氨基酸外，其余氨基酸等電點(diǎn)均小于7pI=1/2（pK1+pK2）若一個(gè)aa有

6、3個(gè)解離基因，則其pI為兼性離子兩邊pK的平均值2.紫外吸收性質(zhì) 色氨酸和酪氨酸在280nm波長(zhǎng)附近對(duì)紫外光有最大吸收峰 據(jù)此可以通過測(cè)定蛋白質(zhì)溶液280nm的吸光值快速測(cè)定其蛋白質(zhì)含量3.茚三酮反應(yīng)aa與水合茚三酮一起加熱，生成藍(lán)紫色的化合物，在570nm處有最大吸收。據(jù)此亦可用作aa含量分析* 以肽鍵相連接,肽鍵(peptide bond)是由一個(gè)氨基酸的-羧基上的羥基與另一個(gè)氨基酸的-氨基上的氫原子脫水縮合而形成的化學(xué)鍵,如圖示:三. 氨基酸在蛋白質(zhì)中的連接方式+-HOH甘氨酰甘氨酸肽鍵H2NCC OHR1H N HCCOOH R2CNOHOH* 肽是由氨基酸通過肽鍵縮合而形成的化合物。

7、* 兩分子氨基酸縮合形成二肽，三分子氨基酸縮合則形成三肽* 肽鏈中的氨基酸分子因?yàn)槊撍s合而基團(tuán)不全，被稱為氨基酸殘基(residue)。* 由十個(gè)以內(nèi)氨基酸相連而成的肽稱為寡肽(oligopeptide)，由更多的氨基酸相連形成的肽稱多肽(polypeptide)。N 末端：多肽鏈中有自由氨基的一端C 末端：多肽鏈中有自由羧基的一端多肽鏈有兩端* 多肽鏈(polypeptide chain)是指許多氨基酸之間以肽鍵連接而成的一種結(jié)構(gòu)。N末端C末端牛核糖核酸酶. 幾種生物活性肽 1. 谷胱甘肽(glutathione, GSH)GSH過氧化物酶H2O2 2GSH 2H2O GSSG GSH還原

8、酶NADPH+H+ NADP+ 體內(nèi)許多激素屬寡肽或多肽 神經(jīng)肽(neuropeptide)2. 多肽類激素及活性肽抗利尿素與催產(chǎn)素(9肽)、胰高血糖素（29肽）、腦啡肽（5肽）、降鈣素（32肽）、 ACTH（39肽）、胰島素（51肽）肌肽（2肽）、P物質(zhì)（10肽、屬神經(jīng)肽類）、內(nèi)啡肽（31肽）蛋 白 質(zhì) 的 分 子 結(jié) 構(gòu)The Molecular Structure of Protein 第 二 節(jié)蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)包括 一級(jí)結(jié)構(gòu)(primary structure)二級(jí)結(jié)構(gòu)(secondary structure)三級(jí)結(jié)構(gòu)(tertiary structure)四級(jí)結(jié)構(gòu)(quaternar

9、y structure)高級(jí)結(jié)構(gòu).概念：蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)指多肽鏈中氨基酸的排列順序。一、蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu).主要的化學(xué)鍵(主鍵)肽鍵，有些蛋白質(zhì)還包括二硫鍵。 方向: N C; 或 NH2末端 羧基末端.提示：一級(jí)結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)空間構(gòu)象和特異生物學(xué)功能的基礎(chǔ)。它由遺傳密碼決定,其上有酶切位點(diǎn),一級(jí)結(jié)構(gòu)可測(cè)定,并不同種屬間有同源性.目 錄二、蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)指蛋白質(zhì)分子空間的三維結(jié)構(gòu),即立體,空間的構(gòu)象，在蛋白質(zhì)分子中各元素圍繞某些化學(xué)鍵進(jìn)行旋轉(zhuǎn),從而形成各種空間排布及相互關(guān)系(一).蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)1.肽鍵平面(肽單元,肽平面,酰胺平面)是蛋白質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位.如圖:參與肽鍵的6個(gè)原子C1、C、O

10、、N、H、C2位于同一平面，此同一平面上的6個(gè)原子構(gòu)成了所謂的肽單元 (peptide unit) 。肽鍵平面形成二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ) 2.二級(jí)結(jié)構(gòu)的概念與基本形式A.概念:一條多肽鏈中局部原子的空間排佈B.二級(jí)結(jié)構(gòu)的基本形式（1） -螺旋 ( -helix ) （2） -折疊 ( -pleated sheet )（3） -轉(zhuǎn)角 ( -turn )（4）不規(guī)則卷曲 ( random coil ) -螺旋目 錄主鏈原子構(gòu)成螺旋的主體,側(cè)鏈在其外部折疊 肽鍵平面呈伸展的鋸齒狀排列,形成的結(jié)構(gòu)稱折疊。常為兩條或兩條以上伸展的多肽鏈側(cè)向聚集在一起形成扇面狀，故又稱折疊片或片層轉(zhuǎn)角(turn)肽鏈出現(xiàn)1800

11、回折的轉(zhuǎn)角處結(jié)構(gòu)稱為轉(zhuǎn)角結(jié)構(gòu)特征*第一個(gè)殘基的C=O與第四個(gè)殘基的N-H形成氫鍵*常見于球狀蛋白質(zhì)分子表面不規(guī)則卷曲環(huán)或卷曲結(jié)構(gòu) ：無規(guī)卷曲是用來闡述沒有確定規(guī)律性的那部分肽鏈結(jié)構(gòu)。 相對(duì)沒有規(guī)律性的排布，但是其同樣表現(xiàn)重要生物學(xué)功用。 C.二級(jí)結(jié)構(gòu)的維系力:氫鍵.模體在許多蛋白質(zhì)分子中，可發(fā)現(xiàn)二個(gè)或三個(gè)具有二級(jí)結(jié)構(gòu)的肽段，在空間上相互接近，形成一個(gè)特殊的空間構(gòu)象，被稱為模體(motif)。鈣結(jié)合蛋白中結(jié)合鈣離子的模體 鋅指結(jié)構(gòu) (二)、蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)氫鍵、離子鍵、疏水鍵等。 2.主要的化學(xué)鍵（維系力）一條多肽鏈中全部氨基酸殘基(全部元素)的相對(duì)空間位置。即肽鏈中所有原子在三維空間的排布位置

12、。包括主鏈，側(cè)鏈的全部?jī)?nèi)容1. 概念 為非共價(jià)鍵，次級(jí)鍵（鹽鍵）目 錄 肌紅蛋白 (Mb) 肌紅蛋白為單肽鏈蛋白質(zhì)，含153個(gè)氨基酸殘基，它含有8個(gè)螺旋區(qū)，依次稱為A到H螺旋，并含有轉(zhuǎn)角及環(huán)-卷曲等二級(jí)結(jié)構(gòu)。 2.維系力 亞基之間的結(jié)合力有疏水作用， 以及氫鍵和離子鍵。（三）蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)(或蛋白質(zhì)分子中各亞基的空間排布及亞基接觸部位的布局和相互作用，稱為蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)。)1.概念 有些蛋白質(zhì)分子含有二條或多條多肽鏈，每一條多肽鏈都有完整的三級(jí)結(jié)構(gòu)，稱為蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu).而每條多肽鏈被稱為亞基 (subunit)。血紅蛋白第三節(jié) 蛋白質(zhì)的分類1根據(jù)蛋白質(zhì)的形狀分為： 纖維蛋白質(zhì)。 如絲蛋白

13、、角蛋白等。 球蛋白。如蛋清蛋白、酪蛋白等。2根據(jù)蛋白質(zhì)的化學(xué)組成分為： 單純蛋白質(zhì)（其水解最終產(chǎn)物是- 氨基酸）。 結(jié)合蛋白質(zhì)（- 氨基酸 + 非蛋白質(zhì)（輔基）。 輔基為糖時(shí)稱為糖蛋白； 輔基為核酸時(shí)稱為核蛋白； 輔基為血紅素時(shí)稱為血紅素蛋白等。第四節(jié) 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系一、蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系 二、蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系.一級(jí)結(jié)構(gòu)是空間構(gòu)象的基礎(chǔ) 一、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系 牛核糖核酸酶的一級(jí)結(jié)構(gòu)二硫鍵牛胰核糖核酸酶的變性與復(fù)性-巰基乙醇尿素或鹽酸胍透析有活性無活性ACTH 促腎上腺素皮質(zhì)激素MSH 促黑激素一級(jí)結(jié)構(gòu)不同的蛋白質(zhì)功能不同例：鐮刀形紅細(xì)胞貧血N-val

14、his leu thr pro glu glu C(146) HbS 肽鏈HbA 肽 鏈N-val his leu thr pro val glu C(146) 這種由蛋白質(zhì)分子發(fā)生變異所導(dǎo)致的疾病，稱為“分子病”。（谷AA）（頡AA）HbS與HbA的區(qū)別-亞基第6位氨基酸正常人：Glu患者：Val.肌紅蛋白與血紅蛋白的結(jié)構(gòu) 二、蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系 目 錄Hb與Mb一樣能可逆地與O2結(jié)合， Hb與O2結(jié)合后稱為氧合Hb。氧合Hb占總Hb的百分?jǐn)?shù)（稱百分飽和度）隨O2濃度變化而改變。.血紅蛋白的構(gòu)象變化與結(jié)合氧 肌紅蛋白(Mb)和血紅蛋白(Hb)的氧解離曲線* 協(xié)同效應(yīng)(cooperat

15、ivity) 一個(gè)寡聚體蛋白質(zhì)的一個(gè)亞基與其配體結(jié)合后，能影響此寡聚體中另一個(gè)亞基與配體結(jié)合能力的現(xiàn)象，稱為協(xié)同效應(yīng)。 如果是促進(jìn)作用則稱為正協(xié)同效應(yīng) (positive cooperativity)如果是抑制作用則稱為負(fù)協(xié)同效應(yīng) (negative cooperativity)O2血紅素與氧結(jié)合后，鐵原子半徑變小，就能進(jìn)入卟啉環(huán)的小孔中，繼而引起肽鏈位置的變動(dòng)。變構(gòu)效應(yīng)(allosteric effect)蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的改變伴隨其功能的變化，稱為變構(gòu)效應(yīng)。 天然狀態(tài)，有催化活性 尿素、 -巰基乙醇 去除尿素、-巰基乙醇非折疊狀態(tài)，無活性.蛋白質(zhì)構(gòu)象改變與疾病 蛋白質(zhì)構(gòu)象疾?。喝舻鞍踪|(zhì)的折疊

16、發(fā)生錯(cuò)誤，盡管其一級(jí)結(jié)構(gòu)不變，但蛋白質(zhì)的構(gòu)象發(fā)生改變，仍可影響其功能，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致疾病發(fā)生。蛋白質(zhì)構(gòu)象改變導(dǎo)致疾病的機(jī)理：有些蛋白質(zhì)錯(cuò)誤折疊后相互聚集，常形成抗蛋白水解酶的淀粉樣纖維沉淀，產(chǎn)生毒性而致病，表現(xiàn)為蛋白質(zhì)淀粉樣纖維沉淀的病理改變。這類疾病包括：人紋狀體脊髓變性病、老年癡呆癥、亨停頓舞蹈病、瘋牛病等。瘋牛病中的蛋白質(zhì)構(gòu)象改變瘋牛病是由朊病毒蛋白(prion protein, PrP)引起的一組人和動(dòng)物神經(jīng)退行性病變。正常的PrP富含-螺旋，稱為PrPc。PrPc在某種未知蛋白質(zhì)的作用下可轉(zhuǎn)變成全為-折疊的PrPsc，從而致病。PrPc-螺旋PrPsc-折疊正常瘋牛病第五節(jié)蛋白質(zhì)的理化

17、性質(zhì)The Physical and Chemical Characters of Protein蛋白質(zhì)分子除兩端的氨基和羧基可解離外，氨基酸殘基側(cè)鏈中某些基團(tuán)，在一定的溶液pH條件下都可解離成帶負(fù)電荷或正電荷的基團(tuán)。 * 蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)( isoelectric point, pI) 當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液處于某一pH時(shí)，蛋白質(zhì)解離成正、負(fù)離子的趨勢(shì)相等，即成為兼性離子，凈電荷為零，此時(shí)溶液的pH稱為蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)。一、蛋白質(zhì)兩性解離和等電點(diǎn) PrCOOHNH3+OH-H+PrNH3+COO_ OH-Pr H+NH2 COO -正離子pH pI兩性離子pHpI負(fù)離子pH pI蛋白質(zhì)等電點(diǎn)Protein

18、 pIPepsin 1.0Serum albumin 4.9Urease 5.0Hemoglobin 6.8Myoglobin 7.0Chymotrypsinogen 9.5Lysozyme 11.0二.蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì) 蛋白質(zhì)屬于生物大分子之一，分子量可自1萬(wàn)至100萬(wàn)之巨，其分子的直徑可達(dá)1100nm，為膠粒范圍之內(nèi)。 * 蛋白質(zhì)膠體穩(wěn)定的因素顆粒表面電荷水化膜+帶正電荷的蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)的蛋白質(zhì)水化膜+帶正電荷的蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)顆粒酸堿酸堿酸堿脫水作用脫水作用脫水作用溶液中蛋白質(zhì)的聚合沉淀三.蛋白質(zhì)的變性、沉淀和凝固 * 蛋白質(zhì)的變性(denaturat

19、ion)在某些物理和化學(xué)因素作用下，其特定的空間構(gòu)象被破壞，也即有序的空間結(jié)構(gòu)變成無序的空間結(jié)構(gòu)，從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)改變和生物活性的喪失。 引起變性的因素:物理、化學(xué)與生物學(xué)因素如如加熱、乙醇等有機(jī)溶劑、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、重金屬離子及生物堿試劑等 。 變性的本質(zhì) 破壞非共價(jià)鍵（次級(jí)鍵）和二硫鍵，不改變蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)。變性蛋白質(zhì)的特點(diǎn): 粘度增加，溶解度降低，易沉淀,易被蛋白酶降解,喪失生物學(xué)活性. 應(yīng)用舉例臨床醫(yī)學(xué)上，變性因素常被應(yīng)用來消毒及滅菌。此外, 防止蛋白質(zhì)變性也是有效保存蛋白質(zhì)制劑（如疫苗等）的必要條件。 若蛋白質(zhì)變性程度較輕，去除變性因素后，蛋白質(zhì)仍可恢復(fù)或部分恢復(fù)其原有的構(gòu)象和功能，

20、稱為復(fù)性(renaturation) 。 天然狀態(tài)，有催化活性 尿素、 -巰基乙醇 去除尿素、-巰基乙醇非折疊狀態(tài)，無活性* 蛋白質(zhì)沉淀在一定條件下，蛋白疏水側(cè)鏈暴露在外，肽鏈融會(huì)相互纏繞繼而聚集，因而從溶液中析出。變性的蛋白質(zhì)易于沉淀，有時(shí)蛋白質(zhì)發(fā)生沉淀，但并不變性。 * 蛋白質(zhì)的凝固作用(protein coagulation) 蛋白質(zhì)變性后的絮狀物加熱可變成比較堅(jiān)固的凝塊，此凝塊不易再溶于強(qiáng)酸和強(qiáng)堿中。 四、蛋白質(zhì)的紫外吸收由于蛋白質(zhì)分子中含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸，因此在280nm波長(zhǎng)處有特征性吸收峰。蛋白質(zhì)的OD280與其濃度呈正比關(guān)系，因此可作蛋白質(zhì)定量測(cè)定。（與Trp Tyr有

21、關(guān)）五、 蛋白質(zhì)的呈色反應(yīng)茚三酮反應(yīng)(ninhydrin reaction) 蛋白質(zhì)經(jīng)水解后產(chǎn)生的氨基酸也可發(fā)生茚三酮反應(yīng)。 雙縮脲反應(yīng)(biuret reaction)蛋白質(zhì)和多肽分子中肽鍵在稀堿溶液中與硫酸銅共熱，呈現(xiàn)紫色或紅色，此反應(yīng)稱為雙縮脲反應(yīng)，雙縮脲反應(yīng)可用來檢測(cè)蛋白質(zhì)水解程度。A、蛋白質(zhì)的分離和純化（一）透析及超濾法* 透析(dialysis)利用透析袋把大分子蛋白質(zhì)與小分子化合物分開的方法。* 超濾法 應(yīng)用正壓或離心力使蛋白質(zhì)溶液透過有一定截留分子量的超濾膜，達(dá)到濃縮蛋白質(zhì)溶液的目的。生物化學(xué)技術(shù)：&.透析（二）丙酮沉淀、鹽析及免疫沉淀 *使用丙酮沉淀時(shí)，必須在04低溫下進(jìn)行，

22、丙酮用量一般10倍于蛋白質(zhì)溶液體積。蛋白質(zhì)被丙酮沉淀后，應(yīng)立即分離。除了丙酮以外，也可用乙醇沉淀。 *鹽析(salt precipitation)是將硫酸銨、硫酸鈉或氯化鈉等加入蛋白質(zhì)溶液，使蛋白質(zhì)表面電荷被中和以及水化膜被破壞，導(dǎo)致蛋白質(zhì)沉淀。 * 免疫沉淀法：將某一純化蛋白質(zhì)免疫動(dòng)物可獲得抗該蛋白的特異抗體。利用特異抗體識(shí)別相應(yīng)的抗原蛋白，并形成抗原抗體復(fù)合物的性質(zhì)，可從蛋白質(zhì)混合溶液中分離獲得抗原蛋白。 bindingwashelution免疫沉淀抗體Protein A-agarose（三）電泳蛋白質(zhì)在高于或低于其pI的溶液中為帶電的顆粒，在電場(chǎng)中能向正極或負(fù)極移動(dòng)。這種通過蛋白質(zhì)在電場(chǎng)

23、中泳動(dòng)而達(dá)到分離各種蛋白質(zhì)的技術(shù), 稱為電泳(elctrophoresis) 。根據(jù)支撐物的不同，可分為薄膜電泳、凝膠電泳等。 幾種重要的蛋白質(zhì)電泳*SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，常用于蛋白質(zhì)分子量的測(cè)定。*等電聚焦電泳，通過蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的差異而分離蛋白質(zhì)的電泳方法。*雙向凝膠電泳是蛋白質(zhì)組學(xué)研究的重要技術(shù)。SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（四）層析層析(chromatography)分離蛋白質(zhì)的原理待分離蛋白質(zhì)溶液（流動(dòng)相）經(jīng)過一個(gè)固態(tài)物質(zhì)（固定相）時(shí)，根據(jù)溶液中待分離的蛋白質(zhì)顆粒大小、電荷多少及親和力等，使待分離的蛋白質(zhì)組分在兩相中反復(fù)分配，并以不同速度流經(jīng)固定相而達(dá)到分離蛋白質(zhì)的目的 。蛋白質(zhì)分離常用的層析方法* 離子交換層析：利用各蛋白質(zhì)的電荷量及性質(zhì)不同進(jìn)行分離。* 凝膠過濾(gel filtration)又稱分子篩層析，利用各蛋白質(zhì)分子大小