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1、關(guān)于實(shí)驗(yàn)五土壤中微生物的分離計(jì)數(shù)第一張,PPT共十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩W(xué)習(xí)微生物稀釋平板計(jì)數(shù)及劃線分離技術(shù)二、實(shí)驗(yàn)原理:采用適宜(選擇)培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件,或加入某種抑制劑有利于目標(biāo)微生物的生長(zhǎng),從而分離獲得目標(biāo)微生物的純培養(yǎng):常用稀釋平板分離法和劃線分離法在固體培養(yǎng)基上形成單個(gè)菌落。依據(jù)一個(gè)單細(xì)胞在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)后可以長(zhǎng)成一菌落從而推算樣品中含有多少細(xì)菌的活菌數(shù)目。第二張,PPT共十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月取一瓶牛肉膏培養(yǎng)基(250ml瓶)熔化后每組倒4個(gè)平皿。(每個(gè)人倒1個(gè)平皿用于劃線分離)三、實(shí)驗(yàn)步驟:(一)土樣的采集 采集土樣,扒開表土層大約5cm厚,取土樣10g
2、左右,裝于滅菌后的牛皮袋中,封口帶回。 (二)土壤懸液制備準(zhǔn)備1瓶土壤懸液:稱10克土壤放入帶玻璃珠的90ml瓶裝無(wú)菌水中,振蕩(10min),使土樣分散。(三)倒固體瓊脂培養(yǎng)基平板第三張,PPT共十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 (四)懸液稀釋 無(wú)菌操作采用4,5,6 稀釋液涂布牛肉膏蛋白胨平板;每個(gè)稀釋度2個(gè)重復(fù)。每人用剩下的1個(gè)平板做劃線分離,從三角瓶中取土壤懸液作劃線分離。90毫升無(wú)菌水10克土樣10-310-210-410-510-1第四張,PPT共十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第五張,PPT共十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(五)平板涂布簡(jiǎn)單易行,但易造成機(jī)械損傷Liquid specime
3、n is spread on the surface of solid agar with a sterile bent glass rod. 第六張,PPT共十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(六)培養(yǎng):將平板用報(bào)紙包好(每個(gè)平板方向一致),寫上班級(jí)和姓名,皿底朝上,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)(溫度37) 。第七張,PPT共十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(七)細(xì)菌計(jì)數(shù)結(jié)果稀釋度 10-5 10-6 10-7平板 1 2 1 2 1 2菌落數(shù)各濃度平均菌落數(shù)土壤中含細(xì)菌數(shù)量第八張,PPT共十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月四、平皿劃線分離法第九張,PPT共十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月特點(diǎn):快速、方便。 分區(qū)劃線(適用于濃度較大的樣品) 連續(xù)劃線(適用于濃度較小的樣品)第十張,PPT共十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第十一張,PPT共十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月五、試管斜面接種1.兩支試管呈“V”字形 2.拔下試管塞3.火焰上微燒一周 4.接種環(huán)灼燒、冷卻5.接種、劃線 6.塞上塞子,灼燒接種環(huán)第十二張,PPT共十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月六、思考題(1) 要使平板菌落計(jì)數(shù)準(zhǔn)確,需要掌握哪幾個(gè)關(guān)鍵?為什么?(2)當(dāng)你的平板上長(zhǎng)出的菌落不是均勻分散的而是集中在一起時(shí),你認(rèn)為
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