微生物和微生物學檢驗

1、微生物和微生物學檢驗1微生物和微生物學檢驗 緒論2一、微生物（microorganisms）：概念：一群肉眼看不見的微小生物，包括：細菌、螺旋體、立克次體、衣原體、支原體、放線菌（原核）、病毒（非細胞）、真菌（真核）。原核與真核細胞的區(qū)別：細胞核的區(qū)別3 古細菌： (Archaeobacteria) 嵌合進化或共生進化 真細菌： 真核生物：微生物的分類：4微生物與人類的關系：（1）大多數不致病，甚至是對人、動、植物有益和必需的，如：固氮菌；釀酒、制醋、抗生素、腸道正常菌群。（2）病原微生物 : pathogenic microorganisms5二、微生物學(microbiology)：微生物

2、的進化分類、生命活動規(guī)律及與動植物、人類、自然相互關系。按研究對象分：細菌、病毒、真菌學按應用領域分：工業(yè)、農業(yè)、醫(yī)學、獸醫(yī)按研究方向分：基礎微生物、分子微生物學、 微生態(tài)學 等 6醫(yī)學微生物學(medical microbiology)：與醫(yī)學有關病原微生物的生物性狀、致病機理、免疫性及有關技術和理論的應用。臨床微生物學(clinical microbiology)：測重研究感染性疾病診斷方法，提供診斷依據和指導用藥。7三、醫(yī)學微生物學發(fā)展簡史1、微生物學的經驗時期：（）釀酒、制醋、腌臘等食品生產、保存；（）師道南天愚集：清乾隆年間，“東死鼠，西死鼠，人見死鼠如見虎。鼠死未幾日，人死如圻堵”

3、； “三人行未十步路，忽死兩人橫截路” （）人痘接種法：免疫最早概念。82實驗微生物學時期（17世紀始）： 顯微鏡培養(yǎng)基（） 微生物的發(fā)現：列文虎克、巴斯德（發(fā)現微生物的作用，創(chuàng)立巴氏消毒法）、李斯特、郭霍氏（固體培養(yǎng)、染色技術） 郭霍氏法則：、。逐漸被淘汰。 新的病原確定方法：核酸確定法 （） 免疫學的興起、分離：牛痘、巴斯德（霍亂、炭疽、狂犬疫苗）、白喉抗毒素動物血清治愈白喉。（） 抗生素的發(fā)現：目前遇到的問題：濫用導致耐藥性增高 93 現代微生物學時期：近二、三十年（1）新病原微生物的發(fā)現a傳統(tǒng)病原卷土重來；b新型病原。（2）致病機理的深入研究a采用新技術；b. 各種致病因素的分子機理及

4、調控。10（3）診斷技術的發(fā)展：三大標記技術各種分子生物學技術：核酸雜交，PCR，微量化，自動化。（4）各種新型疫苗的研制傳統(tǒng)疫苗、亞單位疫苗、基因工程疫苗、DNA疫苗。（5）免疫學獨立遠遠超越感染免疫的范疇。11思考：（）預測微生物學發(fā)展下一階段；（）目前科學界研究熱點？124基因組微生物學（）微生物在基因組前時代在生物學研究中的地位； （）結構簡單，可做為模型，模式生物；（）在基因組時代，作為急先鋒；（）微生物基因組的研究成功，必然極大地改變微生物學科現狀。因此，微生物學研究正面臨前所未有地機遇和挑戰(zhàn)。從上看出，醫(yī)學微生物學的發(fā)展，也是各種技術方法的發(fā)展，也是臨床微生物學的發(fā)展歷史。13四

5、、 臨床微生物學的任務研究感染性疾病的病原體特征： 傳統(tǒng)的病原微生物 條件致病菌提供快速、準確的病原學診斷；指導合理使用抗生素；目前檢驗科的主要任務。對醫(yī)院感染進行監(jiān)控。14五、臨微學習方法：重要性：與畢業(yè)后工作緊密相關。（）平時注意預習、復習；（）對內容上，緊緊圍繞診斷，診斷又是由各種典型特性建立的方法來進行的 抓特性、去共性（）注意新動向。 15第一篇微生物學細菌學總論16一、細菌(bacterium)的形態(tài)與結構（一）形態(tài)：個體微小、形態(tài)各異球菌（coccus）桿菌 (Bacillus) 弧菌與彎曲菌螺旋菌及螺旋體不規(guī)則形。17（二）結構： 18基本結構：包括胞壁、胞膜、胞漿及核質細胞壁

6、： 主要成分肽聚糖。19 乙酰胞壁酸 聚糖骨架 .4糖苷鍵 乙酰葡糖胺 四肽側鏈 五肽橋（苷氨酸）菌肽聚糖厚、層數多、立體狀堅固。 20圖 金黃色葡萄球糖細胞細胞壁的肽聚糖結構圖 大腸桿菌細胞壁的肽聚糖結構21 膜磷壁酸菌細胞壁 壁磷壁酸 特殊結構 表面蛋白：SPA、M蛋白菌細胞壁 磷脂特殊結構 脂蛋白 類脂：毒性部分(外膜) 脂多糖（LPS，內毒素）： 核心多糖：屬和組特異 特異多糖：種和型特異22和菌細胞壁差異：特 征革蘭氏陽性菌 革蘭氏陰性菌 強度較堅韌較疏松 厚度厚，2080nm薄，510nm 肽聚糖層數多，可達50層少，13層 肽聚糖含量多，可占胞壁干重5080%少，占胞壁干重102

7、0%磷壁酸 +-外膜 - + 結構三維空間（立體結構）二維空間（平面結構）23型細菌：細胞壁缺陷型細菌。 高滲培養(yǎng)基中：油煎蛋樣菌落。 在臨床上注意型帶來的漏診。242. 特殊結構莢膜(capsule)：（）保護作用；（）致病作用：侵襲力；（）免疫原性；（）鑒別與分型。 25鞭毛(flagellum)：運動器官，抗原。26菌毛(Pilus)：（）普通菌毛：粘附素；（）性菌毛：根，長而粗，菌轉移質粒，耐藥及毒力質粒。 27芽胞(Spore)：不利環(huán)境中的一種抵抗形式，是休眠體而非繁殖體。28二、細菌的繁殖與新陳代謝：掌握幾個概念：自養(yǎng)菌、異養(yǎng)菌；需氧菌、專性厭氧菌、兼性厭氧菌、微需氧菌。29專性

8、厭氧菌有氧不生長，原因有二：厭氧菌缺乏細胞色素與細胞色素氧化酶，因此不能氧化那些氧化還原電勢較高的氧化型物質。厭氧菌缺乏過氧化氫酶、過氧化物酶和超氧化物歧化酶,不能清除有氧環(huán)境下所產生的超氧離子（O2-）和過氧化氫（H2O2），因而難以存活。30 群體細菌的生長繁殖曲線： 遲緩期、對數期、穩(wěn)定期、衰退期31四、消毒與滅菌掌握幾個概念： 消毒（Disinfection）：殺滅病原微生物的方法。 滅菌（Sterilization）：殺滅物體上所有的微生物（包括病原體和非病原體的繁殖體和芽胞）的方法。 無菌（Asepsis）：物體上或容器內無活菌存在的意思。 防腐（Antisepsis）：防止或抑制

9、微生物生長繁殖的方法。32 五、微生物的遺傳變異（一）遺傳變異的物質基礎 染色體 質粒（plasmid）：細菌存在于染色體外的少部分（約12%）DNA，可決定細菌的一些生物學特性。 轉位因子：插入順序、轉座子 、轉座噬菌體 33 質粒的生物學性質：1質粒并非細菌生存所必不可少的遺傳物質。 2質粒的傳遞（轉移）是細菌遺傳物質轉移的一個重要方式。 3質?？勺孕惺セ蚪浫斯ぬ幚矶?。 4質?？梢元毩椭?。 5可有幾種質粒同時共存在于一個細菌內。34（二）細菌的變異現象 形態(tài)與結構變異 培養(yǎng)特性變異 毒力變異 耐藥性變異35（三）細菌變異的機制 突 變 基因的轉移和重組轉化（transformati

10、on）是受體菌直接攝取供體菌游離的DNA片段，通過與染色體重組，獲得了供體菌的部分遺傳特性。轉導(transduction)是噬菌體為媒介，把供細菌的基因轉移到受體菌內，導致后者基因改變的過程。接合(conjugation)是兩個通過直接接觸，在暫時的溝通中進行基因轉移的過程。3637(四)遺傳變異研究的實際意義在細菌分類上的應用在診斷中的應用在預防中的應用在治療中的應用檢查致癌物質的作用在遺傳工程方面的應用38六、微生物的致病性與感染（一）微生物與宿主的關系 常居菌 正常菌群 過路菌 （）抵抗力下降； （）長期化療、放 療、 條件致病菌： 免疫抑制劑患者； （）外傷； （）菌群失調：菌群失調

11、癥。39正常菌群的生理意義：（）生物拮抗；（）促進機體免疫；（）與衰老有關：雙歧桿菌；（）合成維生素和細菌素。40（二）細菌的致病物質及作用：細菌的表面成分：參與粘附、定植和侵入；毒素及毒性蛋白和酶：外毒素：內毒素：41細菌外毒素舉例 細菌種類 革蘭氏染色 引起疾病 毒素名稱 毒素作用方式 白喉桿菌 + 白喉 白喉毒素壞死性 霍亂弧菌 - 霍亂 腸毒素引起小腸過度分泌液體 鼠疫桿菌 - 鼠疫 鼠疫毒素可能壞死性 破傷風桿菌 + 破傷風破傷風溶血毒素 溶血性心臟毒素 破傷風痙攣毒素引起骨骼肌痙攣 產生莢膜桿菌 + 氣性壞疽 -毒素溶血性卵磷脂酶，壞死性 -毒素溶血性心臟毒素 -毒素溶蛋白性42 外毒素與內毒素的主要區(qū)別區(qū)別要點 外毒素 內毒素存在部位 由活的細菌釋放至細菌體外為細菌細胞壁結構成份，菌體崩解后釋出細菌種類 以革蘭氏陽性菌多見革蘭氏陰性菌多見化學組成 蛋白質（分子量27，000900，000）磷脂一多糖一蛋白質復合物（毒性主要為類脂A）穩(wěn)定性不穩(wěn)定，60以上能迅速破壞耐熱，60耐受數小時毒性作用 強，微量對實驗動物有致死作用（以ug計量）。各種外毒素有選擇作用，引起特殊病變，不引起宿主發(fā)熱反應。抑制蛋白質合成，有細胞毒性、神經毒性、紊亂水鹽代謝等稍弱，對實驗動物致死作用的量