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文檔簡(jiǎn)介
1、一、植物組織培養(yǎng)在農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)上的主要應(yīng)用。在現(xiàn)代農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)中植物組織培養(yǎng)主要應(yīng)用于以下幾個(gè)方面:植物組織培養(yǎng)在離體快速繁殖上的應(yīng)用。植物離體快繁也叫微型繁殖,是目前植物組 織培養(yǎng)中應(yīng)用最廣泛、最有成效的一種技術(shù)。植物組織培養(yǎng)不受地區(qū)、氣候變化的影響,培 養(yǎng)條件可以人為控制,其繁殖速度快,一般比常規(guī)繁殖方法快萬(wàn)倍到數(shù)十萬(wàn)倍,為快速獲得 農(nóng)作物和園林苗木提供了一種新的途徑。植物離體快繁主要應(yīng)用于新育成、新引進(jìn)、新發(fā)現(xiàn) 的良種的快繁;無(wú)病毒苗的大量快繁及一些特殊材料如育種材料、突變體、基因工程植株、 瀕危植物等的快繁。一些無(wú)性繁殖作物如果樹(shù)、球莖和鱗莖植物、馬鈴薯、甘薯、菊花、草 莓等,生產(chǎn)中所用的
2、品種一般為雜合型的植株,這類植物如采用種子繁殖,則后代會(huì)出現(xiàn)變 異,不能保持原品種的優(yōu)良特性;采用常規(guī)無(wú)性繁殖,不僅有些類型的植物繁殖率低,而且 長(zhǎng)期多代繁殖后,因病蟲(chóng)害等原因會(huì)使種性下降。因此對(duì)這些無(wú)性繁殖的作物來(lái)說(shuō),組織培 養(yǎng)的繁殖方法無(wú)論是對(duì)加快繁殖還是對(duì)提高種性來(lái)講都是十分適宜的。目前世界上 80 %85%是通過(guò)組織培養(yǎng)進(jìn)行脫毒和快繁的。目前我國(guó)為其他國(guó)家代加工生產(chǎn)或直接出口的組 培苗品種有甘蔗、香蕉、百合、玉簪、大花萱草、唐菖蒲、絲石竹等近30種。培育無(wú)病毒苗。許多植物都遭受到病毒病不同程度的危害。有的種類甚至同時(shí)受到數(shù) 種病毒病的危害,嚴(yán)重地影響了產(chǎn)品的商品價(jià)值。對(duì)于無(wú)性繁殖的作物
3、如絕大部分的果樹(shù)、 部分蔬菜(洋蔥、大蒜、石刁柏、菊芋、馬鈴薯)和花卉(菊花、唐菖蒲、風(fēng)信子、秋海棠、 月季)等,如遭受病毒侵染后,代代相傳,則體內(nèi)可以積累相當(dāng)高濃度的病毒,影響生長(zhǎng)和 成活,嚴(yán)重危害生產(chǎn)的發(fā)展。而病毒病又不同于真菌和細(xì)菌病害,采用殺菌劑和抗生素等化 學(xué)藥劑防止很難湊效。自從Morel (1952)發(fā)現(xiàn)采用莖尖培養(yǎng)的方法可以從嚴(yán)重感染病毒的 植株得到無(wú)病毒苗后,這方面的工作引起了人們的重視。在許多園藝植物上進(jìn)行培育試驗(yàn)也 相繼得到成功,從此莖尖培養(yǎng)就成為解決病毒病害的一個(gè)重要途徑。也可以采用莖尖培養(yǎng)與 熱處理相結(jié)合的方法來(lái)提高莖尖培養(yǎng)的脫毒效果。對(duì)于一些木本果樹(shù)植物,如果莖尖培
4、養(yǎng)得 到的植株難以發(fā)根生長(zhǎng),且結(jié)果晚,則可采用莖尖微體嫁接的方法來(lái)培養(yǎng)無(wú)病毒苗。利用組織培養(yǎng)生產(chǎn)無(wú)病毒苗的方法,已在許多果樹(shù)(柑橘、蘋(píng)果、草莓、葡萄)、蔬菜 (馬鈴薯、大蒜)、花卉(蘭花、菊花、康乃馨、水仙、唐菖蒲)等作物的常規(guī)生產(chǎn)上得到 應(yīng)用。目前中國(guó)已建成葡萄、蘋(píng)果、香蕉、馬鈴薯、甘蔗等作物脫毒快繁生產(chǎn)線11條。植物組織培養(yǎng)在育種上的應(yīng)用。1964年,印度的Guha和Maheshwari在毛葉曼陀羅 花藥培養(yǎng)中,成功地由花粉誘導(dǎo)得到了單倍體植株,從而促進(jìn)了花藥和花粉培養(yǎng)的研究,以 后在煙草、水稻、小麥、玉米、番茄、甜椒、草莓、蘋(píng)果等多種植物上獲得成功。利用花藥 和花粉培養(yǎng)誘導(dǎo)花粉發(fā)育成單倍
5、體植株,單倍體植株經(jīng)過(guò)秋水仙素等藥劑處理后,染色體加 倍可以獲得同源二倍體的純合系,其后代不會(huì)分離,可以直接用于選育雜種一代的親本或性 狀純合的常規(guī)品種。在遠(yuǎn)緣雜交中,雜種胚經(jīng)常停止發(fā)育,得不到雜種植株,而通過(guò)胚胎培 養(yǎng)則可以克服遠(yuǎn)緣雜交的這種困難。這種方法在育種實(shí)踐中早已被采用。如在普通栽培番茄 與野生番茄一秘魯番茄的遠(yuǎn)緣雜交中就常被采用。在組織培養(yǎng)中能夠產(chǎn)生突變,突變的產(chǎn)生 因部位而異。莖尖的遺傳性比較穩(wěn)定;細(xì)胞和組織在培養(yǎng)中變異率較大。采用紫外線等射線 照射培養(yǎng)物,或者在培養(yǎng)基中加入疊氮化合物,可以誘導(dǎo)和提高突變率。如我國(guó)已經(jīng)篩選出 耐鹽的水稻、煙草、甘蔗的再生植株或細(xì)胞系。20世紀(jì)70
6、年代初,日本科學(xué)家首次利用煙 草葉片分離出的原生質(zhì)體培養(yǎng)獲得再生植株成功。日本和中國(guó)在原生質(zhì)體培養(yǎng)領(lǐng)域做出了重 要貢獻(xiàn)。中國(guó)成功地培養(yǎng)了包括大豆、玉米、小麥、高粱等重要作物在內(nèi)的30個(gè)以上品種 的原生質(zhì)體再生植株。人工種子。人工種子的概念是1978年提出的,它是指最外面的一層有機(jī)的薄膜包裹 以及保護(hù)水分免于喪失及防止外部的物理力量沖擊,中間含有培養(yǎng)物(胚狀體、腋芽或不定 芽等)所需要的營(yíng)養(yǎng)成分和某些植物激素,是作為胚狀體等萌發(fā)時(shí)的能量和刺激因素,最內(nèi) 則是被包埋的胚狀體或芽。通過(guò)這幾部分的組合,以人為的方法制造出一種和天然種子類似 的結(jié)構(gòu)。1958年Reinert在胡蘿卜的組織培養(yǎng)中最先發(fā)現(xiàn)了
7、胚狀體(即體細(xì)胞胚胎),之 后,在至少100余種植物的組織培養(yǎng)中產(chǎn)生了胚狀體。從20世紀(jì)80年代起,人工種子的研 究在世界上受到廣泛的關(guān)注。美、日、法等國(guó)相繼開(kāi)展了人工種子的研究,并在胡蘿卜、苜 蓿、芹菜、花椰菜、萵苣和花旗松等植物上獲得了初步成功。中國(guó)也從“七五”開(kāi)始研究人 工種子。植物種質(zhì)資源的保存與交換。由于許多植物的組織和細(xì)胞培養(yǎng)物在液氮超低溫條件下 貯藏后,仍然能夠保持很高的存活率并能重新再生出植株,保持原來(lái)的遺傳特性,因此可以 利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)保存植物種質(zhì)資源,從而節(jié)省了大量的人力和土地資源。將植物材料 以組培形式保存在容器內(nèi)運(yùn)輸,開(kāi)展國(guó)家、地區(qū)間的種質(zhì)資源交換和植物商品交流,
8、不僅能 夠節(jié)省時(shí)間和空間,降低運(yùn)輸成本,而且能夠減少種子和非試管植株材料所攜帶的有害生物 的危險(xiǎn)。設(shè)在秘魯首都利馬的國(guó)際馬鈴薯中心已對(duì)14個(gè)國(guó)家以組培形式運(yùn)輸,以后,甘蔗、 姜、甘薯及多種花卉在國(guó)家間也采用了組培形式進(jìn)行商品交流。二、植物組織培養(yǎng)中常見(jiàn)的問(wèn)題及其對(duì)策。在植物初代培養(yǎng)和繼代培養(yǎng)過(guò)程中經(jīng)常會(huì)遇到一些問(wèn)題,如污染、畸形胚、玻璃苗、褐 變、黃化等,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,甚至導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗,給科研和生產(chǎn)造成損失。對(duì)這幾個(gè)問(wèn)題產(chǎn)生 的原因及解決措施進(jìn)行了論述。污染。污染是在組織培養(yǎng)過(guò)程中培養(yǎng)基和培養(yǎng)材料滋生雜菌,導(dǎo)致培養(yǎng)失敗。造成污 染的原因有多種,培養(yǎng)環(huán)境不清潔,母株預(yù)處理不當(dāng),外植體滅菌不凈,培
9、養(yǎng)基受菌污染,實(shí)驗(yàn) 所用儀器消毒不徹底,操作程序不當(dāng)?shù)榷紩?huì)造成污染。細(xì)菌污染的主要特征是培養(yǎng)材料周圍 出現(xiàn)粘液菌斑或培養(yǎng)基中出現(xiàn)混濁霧狀痕跡,主要由外植體、操作器具、培養(yǎng)基滅菌不嚴(yán)引 起。真菌污染的特征是菌斑呈絨毛狀、絮狀,有不同顏色的孢子,多由如操作不慎真菌孢子從 瓶口落入造成污染。另外還有內(nèi)生菌造成的潛伏性污染。解決辦法:嚴(yán)格消毒,規(guī)范操作程序。接種室、超凈工作臺(tái)、培養(yǎng)室要定期消毒,培養(yǎng) 室相對(duì)濕度控制在70%左右。室內(nèi)污染源主要是空氣中的真菌和細(xì)菌,可用75%的酒精室內(nèi)噴 霧,也可用高錳酸鉀和甲醛混合熏蒸。接種前用70%的酒精擦洗超凈工作臺(tái),并且打開(kāi)紫外線 燈照射30分鐘,保證超凈工作臺(tái)
10、處于無(wú)菌狀態(tài)。嚴(yán)格無(wú)菌操作,接種工具全部消毒,接種人員 自身要全面消毒等。每次操作都要用酒精燈燒烤接種針,在操作過(guò)程中,盡量不說(shuō)話,頭部不 要伸入操作臺(tái)內(nèi),快速完成接種過(guò)程。外植體和培養(yǎng)基的滅菌。在組織培養(yǎng)過(guò)程中,選擇不 易污染且易表達(dá)全能性的外植體是成功建立組織培養(yǎng)體系的決定因素之一,所取外植體材料 為較幼嫩的莖、葉時(shí),可先將材料用清水沖洗干凈,用吸水紙吸干,再以70%的酒精浸泡,無(wú)菌 水沖洗后,用2%10%的次氯酸鈉浸泡。褐變。影響褐變因素有很多,因植物品種、基因型、外植體的取材部位及生理狀態(tài)、 材料的年齡和大小、光照、溫度等環(huán)境條件的影響,褐變程度差異較大。單寧、色素含量高 的木本植物易
11、發(fā)生褐變,像板栗、核桃因單寧含量高,在初代、繼代培養(yǎng)中極易發(fā)生褐變而死 亡。像塊莖、鱗莖類、天南星科、松柏科、木蘭科、茶科植物很易褐化。薔薇科、金縷科, 木犀科植物等不易褐化。幼齡材料褐變率較低,冬春季節(jié)褐變較輕,而夏季褐變較重。溫度過(guò) 高或光照較強(qiáng)會(huì)促進(jìn)酚類物質(zhì)的氧化,加速褐變。有些植物如菊的莖段雖然易褐化,但并不影 響愈傷組織或叢生芽的誘導(dǎo),可不考慮褐化因素。當(dāng)褐化嚴(yán)重影響了愈傷組織和芽的誘導(dǎo)時(shí), 就要采取措施抑制褐變。解決辦法:選用適宜的外植體、控制培養(yǎng)條件以及選擇幼齡材料作為外植體,褐變較輕。 外植體受傷害程度直接影響褐變,切割時(shí)盡可能減小傷口面積,并縮短切口暴露在空氣中的 時(shí)間。筆者
12、在試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)切口長(zhǎng)度以814 mm褐變較輕,成活率達(dá)85%。選擇合適的消毒劑 和消毒方法,增加瓊脂的用量使培養(yǎng)基的硬度增大,降低了酚類物質(zhì)的擴(kuò)散速度,褐變減少。初期培養(yǎng)要在黑暗和弱光下進(jìn)行。降低溫度,暗處理母株,連續(xù)轉(zhuǎn)移幾次,可減少外植體發(fā)生 褐變。黃化。培養(yǎng)基中礦物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)不均衡、鐵含量不足、激素配比不當(dāng)、糖不足、長(zhǎng)期不轉(zhuǎn) 移、培養(yǎng)環(huán)境通氣不良、pH值大、光照不足、培養(yǎng)溫度不適等是整株失綠、全部或部分葉 片黃化的主要原因。解決辦法:)配制母液和培養(yǎng)基的制作過(guò)程中,要檢查儀器設(shè)備是否準(zhǔn)確,還要認(rèn)真細(xì) 致地核對(duì)每項(xiàng)稱量的每一個(gè)環(huán)節(jié);配制培養(yǎng)基時(shí)切記不要忘記加糖;及時(shí)轉(zhuǎn)接培養(yǎng)物; 使用透氣的封口膜以
13、改善瓶?jī)?nèi)通氣狀況;適當(dāng)調(diào)節(jié)pH值、激素配比和無(wú)機(jī)鹽濃度; 控制培養(yǎng)室內(nèi)的溫度;適當(dāng)增加光照;在培養(yǎng)基中添加抗生素類物質(zhì)如青霉素、鏈霉素、 頭孢霉素等,有時(shí)也會(huì)出現(xiàn)幼苗黃化現(xiàn)象,應(yīng)適當(dāng)減少用量或停止使用?;闻?。體細(xì)胞胚胎在早期發(fā)育時(shí)出現(xiàn)畸形,形態(tài)和生理功能都出現(xiàn)異常,不能育成苗, 或移栽不能成活的現(xiàn)象叫畸形胚,如聯(lián)體胚、子葉畸形胚、單極胚、多極胚、無(wú)極胚、胚軸 畸形胚、重新愈傷化胚、玻璃化胚、白化胚等。越靠近子葉片畸形胚分化率越高,子葉片上 的不定胚幾乎都是畸形胚。解決辦法:在體胚發(fā)育早期,培養(yǎng)基中加入適當(dāng)濃度的ABA、NAA、KT,子葉畸形胚、多 極胚和其他畸形較輕的胚狀體可在畸形胚的基礎(chǔ)上
14、長(zhǎng)出正常芽,逐漸發(fā)育成正常苗。當(dāng)KT 使用濃度為0.5mg/L時(shí),最有利于畸形胚萌發(fā)轉(zhuǎn)化為正常苗,轉(zhuǎn)化率可達(dá)37.5%。增加蔗糖濃 度或直接干燥減少水分,縮短胚性愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)時(shí)間,減少種植密度,選擇通風(fēng)透光條件 好的培養(yǎng)器,都可減少畸形胚的發(fā)生。玻璃苗。植物組織培養(yǎng)中,出現(xiàn)試管苗含水量高,嫩梢呈半透明狀,葉片皺縮卷曲,植株 矮小失綠,葉表無(wú)角質(zhì)層臘質(zhì),組織結(jié)構(gòu)發(fā)育畸形的現(xiàn)象,這時(shí)的試管苗稱為玻璃苗。玻璃苗 生根困難,移栽后不易成活,不能繼續(xù)培養(yǎng)。玻璃苗多為組培過(guò)程中措施不當(dāng)造成的非遺傳生 理性失調(diào)癥狀,進(jìn)行適當(dāng)?shù)幕謴?fù)培養(yǎng),多數(shù)可恢復(fù)正常生長(zhǎng)。培養(yǎng)基中離子種類,比例不適, 瓊脂濃度低,培養(yǎng)環(huán)
15、境如溫度、光照、濕度、pH值、通氣不良等間接影響玻璃苗的發(fā)生。解決辦法:選擇不易玻璃化的基因型材料及部位作為外植體。選擇適當(dāng)培養(yǎng)基、糖 源及外源激素的種類和濃度,提高培養(yǎng)基中Ca2+、Zn2+等離子濃度,適當(dāng)提高瓊脂用量。降 低培養(yǎng)基的襯質(zhì)勢(shì),減少培養(yǎng)基中植物材料可獲得的水分。適當(dāng)提高培養(yǎng)基中蔗糖含量, 降低培養(yǎng)器內(nèi)部環(huán)境的相對(duì)溫度。改善培養(yǎng)容器的通風(fēng)換氣條件,使用透氣性好的容器或 封口材料如用棉塞封口等都可減少玻璃苗的發(fā)生。三、植物微體快速繁殖主要技術(shù)環(huán)節(jié)。植物快繁與脫毒生產(chǎn)的技術(shù)環(huán)節(jié)包括培養(yǎng)基制備、器具消毒、外植體選擇、接種和初級(jí) 培養(yǎng)、繼代增殖培養(yǎng)、壯苗、生根、馴化和移栽、種苗生產(chǎn)計(jì)劃與
16、成本預(yù)算等。培養(yǎng)基選配、 外植體選取、試管苗馴化與移栽、種苗生產(chǎn)計(jì)劃與成本預(yù)算是4項(xiàng)主要技術(shù)。培養(yǎng)基的選配。種植物能否通過(guò)組織培養(yǎng)進(jìn)行大量、快速的繁殖,關(guān)鍵在于設(shè)計(jì)和選 用合適的培養(yǎng)基,使每個(gè)分生組織細(xì)胞或脫分化的體細(xì)胞能夠持續(xù)生長(zhǎng)并適時(shí)分化。MS培 養(yǎng)基是快繁與脫毒培養(yǎng)中應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基,它的特點(diǎn)是無(wú)機(jī)鹽的濃度高,具有高含量的 氮、鉀,尤其硝酸鹽的用量很大。同時(shí)還含有一定數(shù)量的銨鹽,這使得它營(yíng)養(yǎng)豐富,不需要 添加更多的有機(jī)附加物,就能滿足植物組織對(duì)礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)的要求,有加速愈傷組織和培養(yǎng)物生 長(zhǎng)的作用,即使培養(yǎng)物久不轉(zhuǎn)移,仍可維持其生存,所以它是大多數(shù)植物的培養(yǎng)基。與MS 比較類似的有LS、B
17、L、ER培養(yǎng)基。B5、N6和SH等為硝酸鹽含量較高的培養(yǎng)基,H、Nitsch、 Miller和Blaydes培養(yǎng)基為中等無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基。植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)、器官分化及植株再生具有重要的作用,常常是培養(yǎng) 基中不可缺少的的關(guān)鍵物質(zhì)。植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)包括生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。生長(zhǎng)素的主要作 用是誘導(dǎo)愈傷組織的產(chǎn)生促進(jìn)細(xì)胞脫分化,促進(jìn)細(xì)胞的伸長(zhǎng)生長(zhǎng),誘導(dǎo)受傷的組織表面形成 愈傷組織,促進(jìn)生根。常用的生長(zhǎng)素有吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)、萘乙酸(NAA)、 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和ABT生根粉等。外植體的選取。快速繁殖要選擇種質(zhì)優(yōu)良、植株健壯、時(shí)期合適、大小適宜的外植體。
18、性狀優(yōu)良的種質(zhì),有利于提高成功的機(jī)率,增加其實(shí)用價(jià)值。生長(zhǎng)健壯無(wú)病蟲(chóng)的植株,其器 官或組織代謝旺盛,再生能力強(qiáng),比較容易培養(yǎng)成功。在植株生長(zhǎng)的最適時(shí)期取材不僅成活 率高,而且生長(zhǎng)速度快,增殖率高。植物的莖尖、莖段、根、葉、花、胚等器官都可以快繁 與脫毒,其中莖尖是活躍的生長(zhǎng)區(qū),容易培養(yǎng)成功。取材的大小根據(jù)不同植物材料而異,材 料太大易污染,也不需要;材料太小,多形成愈傷組織,甚至難于成活??焖俜敝骋话氵x0.5- 1.0cm的培養(yǎng)材料;脫毒培養(yǎng),多用0.廣0.5mm的生長(zhǎng)點(diǎn)作材料,如果采用0.1mm以下的 生長(zhǎng)點(diǎn),則培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng),成活率低。試管苗的馴化與移栽。由于試管苗長(zhǎng)期與外界環(huán)境隔離,形成了一
19、個(gè)高溫、高濕、弱 光和無(wú)菌的獨(dú)特生態(tài)系統(tǒng)。馴化的目的在于提高試管苗對(duì)外界環(huán)境條件的適應(yīng)性,提高其光 合作用的能力,最終提高移栽成活率。馴化一般是在試管苗移栽前進(jìn)行煉苗,方法是將長(zhǎng)有 完整試管苗的試管或三角瓶由培養(yǎng)室轉(zhuǎn)移到半遮蔭的自然光下進(jìn)行鍛煉,在自然光下恢復(fù)植 物體內(nèi)葉綠體的光合作用能力和健壯度,并打開(kāi)瓶蓋注入少量自來(lái)水使幼苗逐漸降低溫度, 轉(zhuǎn)向有菌,這樣幼苗周圍的環(huán)境就會(huì)逐步與自然環(huán)境相似。移栽的方法有常規(guī)移栽法、直接移栽法和嫁接移栽法。常規(guī)移栽法是指將試管苗在生長(zhǎng) 素濃度高的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根,當(dāng)獲得大量的不定根后,打開(kāi)培養(yǎng)瓶注入少量自來(lái)水,在半 遮光下馴化3-5d,然后取出洗去培養(yǎng)基,移
20、栽到無(wú)菌的混合土中,保持一定的溫度和水分, 當(dāng)長(zhǎng)出2-3片新葉時(shí)就可將其移栽到田間或盆缽的方法。馴化時(shí)間視作物與具體情況而定, 一般為 2-10d。種苗生產(chǎn)計(jì)劃與成本預(yù)算。任何一項(xiàng)產(chǎn)業(yè)都必須面向市場(chǎng),以市場(chǎng)的需求為導(dǎo)向。良 好的經(jīng)濟(jì)效益來(lái)源于適度的生產(chǎn)規(guī)模、合理的預(yù)算、良好的產(chǎn)品質(zhì)量、科學(xué)的經(jīng)營(yíng)管理、合 理的生產(chǎn)規(guī)模應(yīng)取決于市場(chǎng)的供需狀況和產(chǎn)品的價(jià)值。這就涉及到試管苗的增殖率和生產(chǎn)一 定數(shù)量苗木所需的時(shí)間,也就是如何確定生產(chǎn)規(guī)模和培養(yǎng)計(jì)劃。四、植物基因轉(zhuǎn)化受體系統(tǒng)的條件。高效穩(wěn)定的再生能力。從理論上講,植物的任何體細(xì)胞都具有再生完整植株的潛能, 即具有全能性但在組織培養(yǎng)的實(shí)踐中,并不是所有的體細(xì)胞都能再生出完整植株。一般營(yíng)養(yǎng) 生長(zhǎng)中心(分生組織)和薄壁細(xì)胞易再生出植株。再生頻率必須具有好的穩(wěn)定性和重復(fù)性。 植物轉(zhuǎn)化頻率一般情況下只有0.1%?;蜣D(zhuǎn)化操作,如農(nóng)桿菌侵染,使用抗菌素篩選及繼 代培養(yǎng),都會(huì)使轉(zhuǎn)化外植體再生頻率降低,有的甚至不能分化,或只能分化形成芽,而難以 形成植株。較高的遺傳穩(wěn)定性。植物受體接受外源DNA后不影響其分裂和分化,并能穩(wěn)定地將外 源基因遺傳給后代,保持遺傳的穩(wěn)定性,盡量減少變異。不因?qū)雰?yōu)良性狀的目的基因,使 原有的目的性狀(優(yōu)良性狀)在后代發(fā)生了變
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