葉綠素測定儀使用原理

1、葉綠素測定儀使用原理簡介概述：葉綠素測定儀是托普儀器研發(fā)的用來測量葉綠素含量的專用儀器，通常市面上面 主要是TYS-A型。TYS-A葉綠素測定儀測量時間快速，LCD直接顯示葉綠素值， 30個數(shù)據(jù)，自動計算并顯示平均值。儀器原理：根據(jù)葉綠體色素提取液對可見光譜的吸收，利用分光光度計在某一特定波長測定 其吸光度，即可用公式計算出提取液中各色素的含量。根據(jù)朗伯一比爾定律，某 有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比，即A二a CL式中： a比例常數(shù)。當溶液濃度以百分濃度為單位，液層厚度為1cm時，a為該物質(zhì)的 吸光系數(shù)。各種有色物質(zhì)溶液在不同波長下的吸光系數(shù)可通過測定已知濃度的純 物質(zhì)在

2、不同波長下的吸光度而求得。如果溶液中有數(shù)種吸光物質(zhì)，則此混合液在 某一波長下的總吸光度等于各組分在相應波長下吸光度的總和。這就是吸光度的 加和性。今欲測定葉綠體色素混合提取液中葉綠素a、b和類胡蘿卜素的含量， 只需測定該提取液在三個特定波長下的吸光度A，并根據(jù)葉綠素a、b及類胡蘿 卜素在該波長下的吸光系數(shù)即可求出其濃度。在測定葉綠素a、b時為了排除類 胡蘿卜素的干擾，所用單色光的波長選擇葉綠素在紅光區(qū)的最大吸收峰。實驗準備：（一）材料：新鮮（或烘干）的植物葉片。（二）儀器設備：1.分光光度計；2.電子頂載天平（感量0.01g）； 3.研缽; 4.棕色容量瓶；5.小漏斗；6.定量濾紙；7.吸水紙

3、；8.擦境紙；9.滴管。（三）試劑：96%乙醇（或80%丙酮）；石英砂；碳酸鈣粉。實驗步驟：1.取新鮮植物葉片（或其它綠色組織）或干材料，擦凈組織表面污物，剪碎（去 掉中脈），混勻。2.稱取剪碎的新鮮樣品0.2g，共3份，分別放入研缽中，加 少量石英砂和碳酸鈣粉及23ml95%乙醇，研成均漿，再加乙醇10ml，繼續(xù)研磨 至組織變白。靜置35min。3.取濾紙1張，置漏斗中，用乙醇濕潤，沿玻棒 把提取液倒入漏斗中，過濾到25ml棕色容量瓶中，用少量乙醇沖洗研缽、研棒 及殘渣數(shù)次，最后連同殘渣一起倒入漏斗中。4.用滴管吸取乙醇，將濾紙上的 葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘渣中無綠色為止。最

4、后用乙醇定容 至25ml，搖勻。5.把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內(nèi)。以95%乙醇 為空白，在波長665nm、649nm下測定吸光度。四、實驗結果計算：將測定得到的吸光值代入下面的式子：Ca=13.95A665 -6.88A649； Cb=24.96A649-7.32A665。據(jù)此即可得到葉綠素a和葉綠素b的濃度 （Ca、Cb： mg/L），二者之和為總葉綠素的濃度。最后根據(jù)下式可進一步求出植 物組織中葉綠素的含量：葉綠素的含量（mg/g）=葉綠素的濃度X提取液體積X稀釋倍數(shù)/樣品鮮重（或 十重）。功能特點阿星時間快速一匚口直接顯示葉綠素值仗器小巧便攜,可隨身攜帶到野外測量刪星樣品各

5、種植物葉片刪量面積cPlOmnn刪量方式2波長光學濃度差方K感應器硅半導體光電二極管顯_擊.力式四量值；3位數(shù)僧晶顯示廁量次數(shù)；2位數(shù)激晶顯示刪量的是小間隔小于2秒刪星范圍j.o-gg.g spad精度1.0 SPAD （室溫下,SP凸口值介乎Cl-況）重復性0.3SPAD單位以內(nèi)（SPAD值介乎CI-況）重現(xiàn)性0.5SPAD單位以內(nèi)(SPADd5Y0-5O)躁作溫度。5其睹存溫度-2055T；記憶容星及按鍵功能扣個數(shù)據(jù),自動計莒并顯示平均值電源開美：卻為開，OFF為美；AVGC平均值）?。河嬎銉?nèi)存中數(shù)據(jù)的平均值：DEL （活除所有數(shù)據(jù)）健:活除映熟內(nèi)存中的所有數(shù)據(jù)；3ISP【顯示）例：顯示做

6、器內(nèi)存存儲的數(shù)據(jù)：VIEAS （沏星）疆:按MEAS進行iHUfio電源2節(jié)5號朝性橘電池或碳等電池電池壽命每鮑兩節(jié)電池田以維持超過2 WW次操作體積長X寬X高）155m m *7 Cinm *42 mm重是篆口克t不包括電池）技術參數(shù)測量樣品：各種植物葉片測量面積：中10mm測量方式：2波長光學濃度差方式感應器：硅半導體光電二極管顯示方式：測量值：3位數(shù)液晶顯示測量次數(shù)：2位數(shù)液晶顯示測量的最小間隔：小于2秒測量范圍：0.0-99.9 SPAD精度：1.0 SPAD （室溫下，SPAD值介乎0-50）重復性：0.3 SPAD單位以內(nèi)（SPAD值介乎0-50）重現(xiàn)性：0.5 SPAD單位以內(nèi)（SPAD值介乎0-50）操作溫度：050C儲存溫度：-2055C電源：2節(jié)5號AA堿性錳電池