2.2.2動物細(xì)胞融合和單克隆抗體

1、小鼠細(xì)胞熒光燃料標(biāo)記的膜蛋白綠色熒光燃料標(biāo)記的膜蛋白雜交細(xì)胞細(xì)胞融合動物細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)證明：細(xì)胞膜具有流動性1 若A、B為植物細(xì)胞，在細(xì)胞融合之前用 處理，除去了 ；由A、B到細(xì)胞C的過程中，常用的物理方法是 ，化學(xué)方法是 ，融合完成的標(biāo)志是 。還要應(yīng)用 . 技術(shù)把D培養(yǎng)成植株，此過程常添加的植物激素有 . 纖維素酶和果膠酶 細(xì)胞壁離心、電激、振動產(chǎn)生新的細(xì)胞壁植物組織培養(yǎng)用聚乙二醇誘導(dǎo)生長素、細(xì)胞分裂素21、概念：兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程。原理：結(jié)果：細(xì)胞膜的流動性獲得雜交細(xì)胞誘導(dǎo)方式物理法：化學(xué)法：生物法：滅活的病毒(與植物細(xì)胞雜交不同點(diǎn))離心、振動、電激；聚乙二醇；2、誘導(dǎo)

2、融合的方法：一、動物細(xì)胞融合3 為什么滅活的病毒能作誘導(dǎo)劑？滅活喪失感染性保留融合活性4【配對練習(xí)1】(2012年佛山聯(lián)考)動植物細(xì)胞融合過程的最重要的區(qū)別是()A細(xì)胞融合過程B人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法C植物細(xì)胞必須先用酶除去細(xì)胞壁D電融合技術(shù)【答案】C5、在動物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（）A結(jié)果是相同的B雜種細(xì)胞的形成過程基本相同C操作過程中酶的作用相同D誘導(dǎo)融合的手段相同6 動物細(xì)胞融合有什么意義和應(yīng)用？7總結(jié)：比較植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流動性、植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動性用纖維素酶、果膠酶去壁用胰蛋白酶使細(xì)胞分散物理、化學(xué)方法物理、化學(xué)、生物方法獲得部分或

3、完整植株主要用于制備單克隆抗體83如圖為人體體液免疫過程的示意圖，關(guān)于此圖的敘述正確的是A能產(chǎn)生抗體的是細(xì)胞B通過過程V產(chǎn)生的“某物質(zhì)”是淋巴因子C細(xì)胞分別為吞噬細(xì)胞和T細(xì)胞，均能特異性識別抗原D當(dāng)同一種抗原再次進(jìn)入機(jī)體時(shí)，細(xì)胞會迅速增殖、分化D吞噬細(xì)胞T細(xì)胞B細(xì)胞記憶細(xì)胞漿細(xì)胞抗體91.抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生？其化學(xué)本質(zhì)是什么？主要分布在哪里？抗體.一個淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)能分泌多種抗體嗎？.簡述獲得抗體的傳統(tǒng)途徑？.這種方法獲得的抗體有什么缺陷？10長期以來，為了獲得抗體，采用的是把某種抗原反復(fù)注射到動物體內(nèi)，然后從動物血清中分離出所需抗體的方法。用這種方法獲得的抗體，不僅產(chǎn)量低，而且抗體的特異

4、性差，反應(yīng)不夠靈敏，純度低。 人們發(fā)現(xiàn)，在動物發(fā)生免疫反應(yīng)的過程中，體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的特異性抗體，但是每個B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個B細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖，即克隆。提示1：僅用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可行嗎？提示2：我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無限增殖的？提示3：有什么方法能使B細(xì)胞產(chǎn)生抗體的能力和腫瘤細(xì)胞無限增殖能力同時(shí)具備呢？問題：如何大量生產(chǎn)同一種抗體？11一個B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖雜交瘤細(xì)胞既能分泌一種特異性抗體又能無限增殖1975年英國科學(xué)家米爾斯坦和柯勒設(shè)想：12二、單克隆抗體的制備 自學(xué)與思考：1

5、）在從小鼠體內(nèi)取B淋巴細(xì)胞前應(yīng)對小鼠作何種處理？為什么要這樣處理？2）從小鼠何處獲取B淋巴細(xì)胞？3）如只考慮兩兩融合，會出現(xiàn)哪些融合類型細(xì)胞？4）是否所有雜交瘤細(xì)胞都能產(chǎn)生某一特定抗體？5）由特定的B淋巴細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合成的雜交瘤細(xì)胞具有什么特點(diǎn)？6）最后可以通過哪些途徑大量獲取抗體？13注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基 篩選1單克隆抗體繼續(xù)培養(yǎng) 篩選2（篩選出雜交瘤細(xì)胞）足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞克隆化14注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合3種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基 篩選1單克隆抗體繼續(xù)培養(yǎng) 篩選2（篩選出雜交瘤細(xì)胞）足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤

6、細(xì)胞克隆化15 用單個B細(xì)胞進(jìn)行克隆，得到的細(xì)胞群能夠分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體，這種抗體就叫做單克隆抗體。單克隆抗體：161、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是（ ）A、經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞 B、不經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞C、經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 D、不經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞A172、 通過細(xì)胞工程生產(chǎn)單克隆抗體時(shí)，要涉及到以下三個篩選過程： 在特定培養(yǎng)基中篩選出雜交瘤細(xì)胞 選出能產(chǎn)生抗體的效應(yīng)B細(xì)胞 選出能產(chǎn)生特定抗體并能大量增殖的細(xì)胞群。這三個過程的先后次序是（ ）A. B. C. D.C183、【鞏固2】 197

7、5年科學(xué)家首次利用B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備出單克隆抗體。請根據(jù)圖回答問題。(1)病原體注入小鼠體內(nèi)后，通常需要經(jīng)過_細(xì)胞的處理后，才能被免疫細(xì)胞識別。(2)制備單克隆抗體所用的B淋巴細(xì)胞一般從脾中采集，然后以_作介導(dǎo)，使B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，通過篩選和克隆培養(yǎng)，獲得的雜交瘤細(xì)胞具有_特點(diǎn)。(3)單克隆抗體的特點(diǎn)是_。根據(jù)上圖寫出應(yīng)用雜交瘤技術(shù)獲得單克隆抗體的兩種主要方法_。吞噬滅活的病毒或聚乙二醇既能產(chǎn)生特異性抗體，又能無限增殖的體外培養(yǎng)法和動物體內(nèi)培養(yǎng)法194、【例2】 下圖表示單克隆抗體制備過程的各階段圖解，請根據(jù)圖回答下列問題。(1)請用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過程的

8、順序連接起來。20(2)在單克隆抗體制備過程中之所以選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有_、_的特性。(3)由圖中可以看出，單克隆抗體制備過程運(yùn)用了_和_等動物細(xì)胞工程技術(shù)。在體外大量繁殖產(chǎn)生特異性抗體動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞培養(yǎng)21單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):_、_.單克隆抗體的應(yīng)用：.可用于作為診斷試劑：.可用于疾病治療. “生物導(dǎo)彈”生物導(dǎo)彈單克隆抗體藥物單克隆抗體的應(yīng)用 特異性強(qiáng)靈敏度高225、單克隆抗體和血清抗體相比，其優(yōu)越性在于：A、單克隆抗體能夠制成“生物導(dǎo)彈” B、單克隆抗體能夠在體外制備C、單克隆抗體比血清抗體的特異性強(qiáng)、免疫活性高D、單克隆抗體制備過程簡單6、“生

9、物導(dǎo)彈”是指：A.單克隆抗體 B.帶有特定藥物的單克隆抗體C.雜交細(xì)胞 D.淋巴細(xì)胞CB237.用動物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯誤的是：A將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞B用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞C用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合D篩選雜交瘤細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體B24（2005廣東）關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不正確的是A、可以制成診斷盒用于疾病的診斷 B、可以與藥物結(jié)合，用于病變細(xì)胞的定向治療C、可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn) D、可以在生物體內(nèi)生產(chǎn)，不能體外生產(chǎn)2006年廣東

10、卷單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述，錯誤的是A特異性強(qiáng)、靈敏度高 B與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈”C體外培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞可大量分泌單克隆抗體D由效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞分泌25下圖為某同學(xué)設(shè)計(jì)的生產(chǎn)抗破傷風(fēng)桿菌單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)方案。1、該實(shí)驗(yàn)方案的目的是_ _2、A是從小鼠的脾臟中取得_ ,該細(xì)胞能夠產(chǎn)生_ 。在獲得此細(xì)胞之前，小鼠已被注射了 .制備單克隆抗體B淋巴細(xì)胞特異性抗體B體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到小鼠腹腔AC破傷風(fēng)桿菌26下圖為某同學(xué)設(shè)計(jì)的生產(chǎn)抗破傷風(fēng)桿菌單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)方案。B體外培養(yǎng)

11、骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群AC3、圖中B為_ 過程，常用_ 作為誘導(dǎo)因素，該細(xì)胞繼承_的遺傳特性，既能_ ,又能_。4、C過程指細(xì)胞培養(yǎng)，該過程包括_ 和_ 兩個階段，其中_代以內(nèi)的的細(xì)胞屬于細(xì)胞株。動物細(xì)胞融合滅活的病毒雙親細(xì)胞分泌特異性抗體無限增殖原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)50注射到小鼠腹腔27（1）若A、B是植物細(xì)胞，在細(xì)胞融合之前已用 處理，除去了 ；由A、B到細(xì)胞C的過程中，常用的物理方法是 。融合完成的標(biāo)志是 。還要應(yīng)用 _ _ 技術(shù)把D培養(yǎng)成植株。（2）若A、B是動物細(xì)胞，一般取自 _ ，然后用 使其分散開來；由A、B到C的過程中，常用的不同于植物細(xì)胞融合的手段是 _ ，所形成的D稱為 _ ，A、B融合為C的過程說明了細(xì)胞膜具有 。纖維素酶和果膠酶 細(xì)胞壁離心、電激、振動產(chǎn)生新的細(xì)胞壁植物組織培養(yǎng)胚胎或幼齡動物的器官、組織胰蛋白酶滅活病毒誘導(dǎo)雜交細(xì)胞流動性28（4）若該過程是制備單克隆抗體，A為小鼠效應(yīng)B細(xì)胞，那么，在獲得此細(xì)胞之前，小鼠已經(jīng)被注射了 。注射后小鼠身體發(fā)生了相應(yīng)的免疫反應(yīng)，生成了 _ _，圖中B為