揮發(fā)性鹽基氮的測(cè)定(共4頁)

1、揮發(fā)性鹽基氮的測(cè)定(cdng) GB/T5009.44-2003一、適用范圍 本檢測(cè)(jin c)方法適用于動(dòng)物性食品(shpn)，肉、水產(chǎn)品等二、原理 揮發(fā)性鹽基氮(VBN)是指動(dòng)物性食品在腐敗過程中，由于細(xì)菌的作用，使蛋白質(zhì)分解后產(chǎn)生的氨、伯胺、仲胺及叔胺等堿性含氮物質(zhì)，且均有揮發(fā)性。揮發(fā)性鹽基氮在弱堿性條件下分解與水蒸氣一起蒸餾出來形成NH3，便可使以上揮發(fā)性的堿性含氮物溢出，然后用硼酸吸收，用標(biāo)準(zhǔn)鹽酸滴定便可計(jì)算出揮發(fā)性鹽基氮的含量。1、NH4+OHNH3+H2O2、4H3BO3+ NH 3NH4HB4O7+5H2O3、NH4HB4O7+HCl+5H2ONH4C1+4H3BO1 實(shí)驗(yàn)用

2、試劑試劑名稱規(guī)格/濃度配制方法備注硼酸溶液AR2%稱取2g硼酸于100ml水中，加熱溶解。無氮氧化鎂溶液AR1%稱取1g氧化鎂于100ml水中，攪拌均勻.無氮混合指示劑稱取0.1g甲基紅溶于95%乙醇，配成100ml溶液；稱取0.5g溴甲酚綠溶于95%乙醇，配成100ml溶液；兩溶液等體積混合陰涼處保存有效期三個(gè)月鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液AR具體見附錄22 實(shí)驗(yàn)用設(shè)備儀器設(shè)備名稱規(guī)格參考廠家實(shí)驗(yàn)室用樣品粉碎機(jī)10000r/min天津泰斯特分析篩孔徑0.45mm(40目)消煮爐可控溫420凱式燒瓶250ml凱氏蒸餾裝置常量直接蒸餾式分析天平感量0.0001g滴定管酸式，25錐形瓶250m1試驗(yàn)(shyn)內(nèi)

3、容序號(hào)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目操作內(nèi)容注意事項(xiàng)1樣品制備選取有代表性的樣品用四分法縮減至200g，粉碎后全部通過40目篩，置于密閉樣品袋中，陰涼處保存，備用。取樣要有代表性、真實(shí)性2試樣液準(zhǔn)備稱取5g10g試樣于150ml錐形瓶中（準(zhǔn)確至0.0002g），準(zhǔn)確加水100ml在磁力攪拌器上攪拌30分鐘（4000r/min），靜置10分鐘。吸取上層清液25ml于消化管中。記錄對(duì)應(yīng)編號(hào)錐形瓶?jī)?nèi)樣品的名稱及質(zhì)量5洗滌機(jī)器用約50ml蒸餾水，在不加堿和硼酸、指示劑的情況下蒸餾，洗滌2-3次6蒸餾用量筒量取25ml硼酸吸收液于250ml錐形瓶，滴加2滴混合指示劑，搖勻，裝上定氮儀。往裝有試樣液的消化管中加入20ml氧化鎂

4、，搖勻，立刻裝上定氮儀,餾出液用硼酸吸收。打開蒸汽開關(guān)，讓儀器蒸餾5分鐘。餾出液近200ml時(shí)，蒸餾停止,取下錐形瓶,拆下消化管，用水沖洗餾出口下端。8滴定將蒸餾后的吸收液立即用0.1mol/L標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液滴定，溶液由藍(lán)綠色變成灰紅色為終點(diǎn)。9計(jì)算VBN(mg/100g)=(V2-V1)C14100/MV分取/V總v2試樣滴定時(shí)所需鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（m1）；v1空白滴定時(shí)所需鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積(m1)；c鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(mol/L)；m一試樣的質(zhì)量（g）；14每ml HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)于N的毫克數(shù)；V分取25（m1）；V總100（m1）10測(cè)定步驟檢驗(yàn)精確稱取0.14g硫酸銨，按試樣測(cè)定

5、步驟操作，以下公式計(jì)算N%=(V2-V1)C0.01401100/M測(cè)得硫酸銨含氮量應(yīng)為21.190.2，否則應(yīng)檢查加堿，蒸餾和滴定各步驟是否正確。精密度 在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)(judu)差值不得超過算術(shù)平均值的10% 附錄2：鹽酸(yn sun)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)定參考(cnko)標(biāo)準(zhǔn)：GB/T601-20021.鹽酸(yn sun)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制按下表的規(guī)定量取鹽酸，注人1000m L水中，搖勻。鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度c(HCI)/(mol/I)鹽酸的體積Vm/L1900.5450.192.鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)定按下表的規(guī)定稱取于270-300高溫爐中灼燒至恒重的工作基準(zhǔn)

6、試劑無水碳酸鈉，溶于50ml水中，加10滴溴甲酚綠-甲基紅指示液，用配制好的鹽酸溶液滴定至溶液由綠色變?yōu)榘导t色，煮沸2 min，冷卻后繼續(xù)滴定至溶液再呈暗紅色。同時(shí)做空白試驗(yàn)。鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度C(HCl)/(mol/L)工作基準(zhǔn)試劑無水碳酸鈉的質(zhì)量。m/g11.90.50.950.10.23.計(jì)算鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度c(HCI).數(shù)值以摩爾每升(mol/L表示，按式(2)計(jì)算：m- 無水碳酸鈉的質(zhì)量的準(zhǔn)確數(shù)值，單位為克(g);V1 -鹽酸溶液的體積的數(shù)值，單位為毫升(ml);V: -空白試驗(yàn)鹽酸(yn sun)溶液的體積的數(shù)值，單位為毫升(mL)M- 無水碳酸鈉的摩爾質(zhì)量的數(shù)值(shz)，單位為克每摩爾(g/mol)注意事項(xiàng)：1.灼燒溫度不能超過300度，當(dāng)溫度超過300度時(shí)無水碳酸鈉分解，可將馬福爐的溫度調(diào)至250，等升溫穩(wěn)定后再調(diào)至280，或者(huzh)將馬福爐事先升溫至280度，待穩(wěn)定后再放入無水碳酸鈉2.無水碳酸鈉的稱量質(zhì)量小于0.2g時(shí)要用十萬分子之一天平稱量。3.滴定一定要滴到暗紅色再煮沸，可事先根據(jù)大體濃度計(jì)算大約的滴定體積。內(nèi)容總結(jié)（1）揮發(fā)性鹽基氮的測(cè)定 GB/T5009.44-2003一、適用范圍 本檢測(cè)方法適用于動(dòng)物性食品，肉、水產(chǎn)品等二、