高中生物選修一-無菌操作技術(shù)實踐-第3節(jié)

1、第三節(jié)植物組織培養(yǎng)技術(shù)細(xì)胞分裂素有利于根的形成生長素 愈 再分化傷組織 根、芽一-植物體。（外植體）.影響植物組織培養(yǎng)的因素有：植物材 料、營養(yǎng)物質(zhì)、植物激素及pH、溫度、 光照等。.生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分 裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。.植物組織培養(yǎng)的實驗操作流程： 準(zhǔn)備一-配制MS培養(yǎng)基一-滅菌一- 取材與接種一一觀察與記錄一一轉(zhuǎn)接培 養(yǎng)一- 煉苗 移栽。.進(jìn)行組織培養(yǎng)時要配備三種培養(yǎng)基， 分別是誘導(dǎo)愈傷組織形成的培養(yǎng)基、誘 導(dǎo)生根的培養(yǎng)基和誘導(dǎo)分化芽培養(yǎng)基， 期間進(jìn)行兩次轉(zhuǎn)接。10學(xué)業(yè)分層測評（四）（建議用時：45分鐘）學(xué)業(yè)達(dá)標(biāo).下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)中無菌操作的敘述，錯誤的是

2、（）A.外植體可以用酒精消毒B,銀子等器械需酒精滅菌C.操作前手需酒精消毒D.培養(yǎng)基需高壓蒸汽滅菌【解析】 植物組織培養(yǎng)需要嚴(yán)格的無菌操作， 包括：培養(yǎng)基需要用高壓蒸 汽滅菌；操作前手需用酒精消毒，外植體應(yīng)浸泡在酒精中殺菌；整個操作過程應(yīng) 在酒精燈火焰旁進(jìn)行，同時對銀子等器械要進(jìn)行灼燒滅菌?！敬鸢浮?B. MS培養(yǎng)基與微生物培養(yǎng)基相比，需要提供大量的 （）A.無機(jī)營養(yǎng)B .有機(jī)營養(yǎng)C.甘氨酸和維生素D.激素【解析】 微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同，用于植物 組織培養(yǎng)的MS培養(yǎng)基需提供大量的無機(jī)營養(yǎng)?！敬鸢浮?A.下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)所需營養(yǎng)的敘述，錯誤的是 （）A. MS培養(yǎng)基

3、既含硝態(tài)氮又含錢態(tài)氮B.維生素以輔酶的形式參與生物催化劑酶的活動C.植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)包括生長素、細(xì)胞分裂素及赤霉素等D.植物組織培養(yǎng)過程中無需從外部供糖【解析】在植物組織培養(yǎng)進(jìn)行異養(yǎng)的狀況下，組織細(xì)胞不能進(jìn)行光合作用， 因此在培養(yǎng)基中必須添加糖，以作為細(xì)胞的碳素來源和能量來源?！敬鸢浮?D4.某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉，具技術(shù)路線為“取材-消 毒-愈傷組織培養(yǎng)-出芽-生根-移栽”。下列有關(guān)敘述，錯誤的是（）A.消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對細(xì)胞的傷害11B.在愈傷組織培養(yǎng)中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑，可獲得染色體加倍的細(xì)胞C.出芽是細(xì)胞再分化的結(jié)果，受基因選擇性表達(dá)的

4、調(diào)控D.生根時，培養(yǎng)基通常應(yīng)含 a蔡乙酸等生長素類調(diào)節(jié)劑【解析】植物組織培養(yǎng)中消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對培養(yǎng)材料的傷害；植物體細(xì)胞的雜交需先除去細(xì)胞壁得到原生質(zhì)體， 冉 在細(xì)胞融合誘導(dǎo)劑作用下獲得染色體加倍的細(xì)胞；細(xì)胞分化的實質(zhì)是基因的選擇 性表達(dá)；植物組織培養(yǎng)過程中，在生根階段培養(yǎng)基中通常應(yīng)含有生長素類調(diào)節(jié)劑。【答案】 B.在下列選項中，需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)的是 （）【導(dǎo)學(xué)號：67850016】利用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗，獲得多倍體植株獲取大量的脫 毒苗利用基因工程培育抗棉鈴蟲的植株 單倍體育種無子西瓜的快 速大量繁殖A.B.C.D.【解析】植物組織培養(yǎng)是指

5、從植物體分離出符合需要的組織、器官或細(xì)胞、 原生質(zhì)體等，通過無菌操作，在人工控制條件下進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株 或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價值的其他產(chǎn)品的技術(shù)， 主要用于獲取脫毒苗、培育轉(zhuǎn)基因的植 株、單倍體育種、快速大量繁殖植株等方面。利用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼 苗，獲得多倍體植株屬于多倍體育種，不需要植物組織培養(yǎng)技術(shù)?！敬鸢浮?B. （2016平頂山高二測試）關(guān)于植物組織培養(yǎng)的下列說法中，哪一項是錯誤 的（）A.在進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時，需要適宜的溫度、營養(yǎng)、氧氣和 pHB.由外植體形成胚狀體的過程中不需要光，但由胚狀體發(fā)育成植株的過程 中卻需要光C.不同植物進(jìn)行組織培養(yǎng)時，所需的溫度有所不同D.

6、由外植體形成幼苗的過程中，培養(yǎng)基中有機(jī)物的總量會減少【解析】 植物組織培養(yǎng)需要一定的條件，如營養(yǎng)物質(zhì)，適宜的溫度、 pH、 滲透壓、光照等，由外植體形成愈傷組織的過程中不需要光， 但再分化形成胚狀12體以及由胚狀體發(fā)育成植株的過程中都需要光。【答案】 B.植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理、培養(yǎng)過程的順序及起誘導(dǎo)作用的植物激素分 別是（）細(xì)胞的全能性離體的植物器官、組織或細(xì)胞根、芽生長素和 細(xì)胞分裂素生長素和乙烯愈傷組織再分化脫分化植物體A.，.，C.，D.，【解析】植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是細(xì)胞的全能性。培養(yǎng)過程是離體的植 物器官、組織或細(xì)胞經(jīng)脫分化形成愈傷組織，然后經(jīng)再分化形成根、芽，最終形 成植物體。

7、影響植物細(xì)胞脫分化產(chǎn)生愈傷組織的一個重要因素是植物激素，當(dāng)細(xì)胞分裂素與生長素比例適中時，能促進(jìn)愈傷組織的形成。【答案】 A.植物組織培養(yǎng)的過程如圖所示。下列相關(guān)敘述中正確的是 （）培養(yǎng)域2急傷組黑a商體培養(yǎng)基】上,組織A.過程中都會發(fā)生細(xì)胞的增殖和分化.培養(yǎng)基1和2的成分在比例上沒有明顯差異C.利用此過程獲得的試管苗可能為雜合體D.此過程依據(jù)的生物學(xué)原理是生物膜的流動性【解析】 過程發(fā)生的是細(xì)胞的增殖，沒有發(fā)生細(xì)胞分化，過程中會發(fā) 生細(xì)胞的增殖和分化。培養(yǎng)基1和2的成分在比例上有明顯差異，主要是細(xì)胞分 裂素和生長素用量的比例不同。如果離體組織為雜合體，利用此過程獲得的試管 苗也為雜合體。題圖所

8、示過程依據(jù)的生物學(xué)原理是細(xì)胞的全能性?！敬鸢浮?C在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過程中，需要下 列哪些條件（）13 TOC o 1-5 h z 消毒滅菌一定濃度的植物激素適宜的溫度充足的光照 充足的養(yǎng)料A.B.C.D.【解析】在形成愈傷組織的過程中，需要暗處理的條件，不需要光照【答案】D.下圖表示菊花嫩枝的離體培養(yǎng)過程，請據(jù)圖回答下面的問題：（1）對菊花來說，要選取生長旺盛的嫩枝來進(jìn)行組織培養(yǎng)，其原因是（2）菊花組織培養(yǎng)過程中，啟動細(xì)胞分裂、A（填名稱）、再分化的關(guān)鍵激素是 通過A過程產(chǎn)生的愈傷組織細(xì)胞與枝條韌皮部細(xì) 胞形態(tài)結(jié)構(gòu)（填“相同”或“不同”），其根本原因是（3）菊花

9、組織培養(yǎng)需要接種，在進(jìn)行接種時應(yīng)注意 （）溶液消毒，并用無菌水沖洗干凈 畢應(yīng)立即蓋好瓶蓋A.C.（4）圖中的B過程需要 進(jìn)行光合作用。接種室要消毒 只要戴口罩，操作時便可說話 外植體可預(yù)先用體積 分?jǐn)?shù)為70%的酒精浸泡，取出用無菌水沖洗后，再用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞接種操作要在酒精燈火焰旁進(jìn)行接種完B.,因為愈傷組織形成幼小植株后，植物需要D.【解析】（1）菊花的嫩枝組織培養(yǎng)，一般選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝，主要因為其分裂、分化能力強(qiáng)。（2）在菊花組織培養(yǎng)過程中，形成愈傷組織的過程是脫分化（A過程），啟動脫分化和再分化過程的激素主要是生長素和 細(xì)胞分裂素。愈傷組織和外植體的細(xì)胞形態(tài)

10、、結(jié)構(gòu)差別很大，根本原因在于不同14細(xì)胞內(nèi)基因的選擇性表達(dá)。（3）組織培養(yǎng)中要求進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作，因為一旦 出現(xiàn)細(xì)菌或真菌污染，就會導(dǎo)致實驗失敗，其要求除題目中提到的 項外， 還有工作人員即使戴上口罩，也不許說話、咳嗽等。（4）B過程表示愈傷組織經(jīng)再 分化形成試管苗，幼苗進(jìn)行光合作用需要一定的光照?！敬鸢浮浚?）生長旺盛的嫩枝生理狀況好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化（2）脫分化 細(xì)胞分裂素、生長素 不同 基因選擇性表達(dá)（3）C （4）光照能力提升.某組織培養(yǎng)實驗室的愈傷組織被真菌嚴(yán)重污染， 為查找污染原因設(shè)計了 四個實驗，實驗條件除圖示外其他均相同。下列各圖表示實驗結(jié)果，據(jù)圖不能得 出的初步結(jié)論是

11、（ ）【導(dǎo)學(xué)號：67850017污染率篆)15 25 35 45 55 650 5 10 15 20 25培養(yǎng)基滅菌時間(min)外植體消毒時間(min)AR8014.5 5.5 6.5 7.5 8.5培養(yǎng)地pHC20 22 24 262S30 32 34 36培養(yǎng)溫度 DA.污染主要不是培養(yǎng)基滅國時間短造成的B.污染不可能來源于組織培養(yǎng)所用的離體組織C.調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH不能解決污染問題D.調(diào)節(jié)培養(yǎng)溫度不能解決污染問題【解析】本題主要考查圖文轉(zhuǎn)換能力，A、C、D圖解所示的信息是隨培養(yǎng)基滅菌時間、培養(yǎng)基pH和培養(yǎng)溫度的增加，污染率在 90%上下波動，說明污 染源不是這三方面的原因；而 B圖解中隨離

12、體組織消毒時間的延長，污染率急 居U下降，因而，該曲線表明組織培養(yǎng)所用的離體組織是污染的主要原因。【答案】B.花粉植株是體細(xì)胞遺傳研究和突變育種的理想材料。下面是培育四季柑桔（2N= 18）花粉植株的過程示意圖，有關(guān)敘述錯誤的是 （）15取花蕾 并消毒一取花粉粒，接 種到培養(yǎng)基A 一愈傷組織接到培養(yǎng)基B從芽轉(zhuǎn)接到 培育基C轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)基DA.花粉植珠培育的原理是花粉粒細(xì)胞具有全能性，具技術(shù)是植物組織培養(yǎng)B.過程是細(xì)胞再分化，其根本原因是基因的選擇性表達(dá)C.四種培養(yǎng)基均屬于固體培養(yǎng)基，其中所含植物激素的種類和比例有差異D.觀察處于分裂中期的四季柑桔花粉植株根尖細(xì)胞，可觀察到18條染色體【解析】本題

13、考查花粉的組織培養(yǎng)。花粉細(xì)胞培育成單倍體植株，培育的 原理是花粉粒細(xì)胞具有全能性，具技術(shù)是植物組織培養(yǎng)，A正確；由愈傷組織到 從芽的過程是再分化，其根本原因是基因選擇性表達(dá)，B正確；圖中四種培養(yǎng)基的差異主要表現(xiàn)在植物激素的種類和含量， C正確；觀察處于分裂中期的國季柑 桔花粉植株根尖細(xì)胞，其染色體數(shù)和具體細(xì)胞相同，為 9條，D錯誤?！敬鸢浮?D.下面為植物組織培養(yǎng)過程流程圖解，以下相關(guān)敘述不正確的是（）植物A.上述過程中脫分化發(fā)生在b步驟，形成愈傷組織，在此過程中植物激素發(fā)揮了重要作用B.再分化發(fā)生在d步驟，是愈傷組織重新分化成根或芽等器官的過程C.從葉組織塊到種苗形成的過程說明植物葉片細(xì)胞具

14、有全能性D.人工種子可以解決有些作物品種繁殖能力差、結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問 題【解析】 從流程圖可知植物組織培養(yǎng)包括脫分化和再分化兩個階段，即 b 和c步驟，再分化發(fā)生在c步驟。【答案】B.閱讀下列材料，并回答相關(guān)問題。16材料1微型繁殖技術(shù)又稱快速繁殖技術(shù)，就是將植物體的一部分組織小塊 進(jìn)行離體培養(yǎng)，并誘導(dǎo)分化成大量的小植株，從而達(dá)到快速無性繁殖的目的。20 m2的培養(yǎng)室內(nèi)最多可容納100萬株試管苗。這一技術(shù)已有幾十年的歷史，現(xiàn)已 基本成熟，并形成諸如工廠化生產(chǎn)蘭花這樣產(chǎn)值巨大的工業(yè)生產(chǎn)體系。材料2植物的脫毒技術(shù)是微型繁殖技術(shù)的一個分支。植物病毒嚴(yán)重地影響著農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。對于無性繁殖的植株來說，

15、一旦感染上病毒就會代代相傳，日益嚴(yán) 重。但在莖尖分生組織中，細(xì)胞增殖十分迅速，病毒來不及侵入，因此其就成為 植物體相對無病毒的特殊區(qū)域。(1)材料中用到的技術(shù)稱為(2)材料中技術(shù)操作過程可以用下圖簡略表示：脫分化再分化離體植物組織、器官或細(xì)胞| |愈傷組織| |生芽、生根卜一叵在上述過程中，尤其是脫分化、再分化過程中，植物生長素和細(xì)胞分裂素的 使用量非常關(guān)鍵。為分析兩種激素的用量比例對實驗結(jié)果的影響， 幾位同學(xué)做了 實驗，其結(jié)果如下，試根據(jù)結(jié)果回答：(6-BA:細(xì)胞分裂素類，舊A:生長素類)、丁 組別 項目、1234激素種類及濃度關(guān)系6-BA6-BAIBA6-BA= IBA6-BAIBA組織塊

16、愈傷組愈傷組愈傷組結(jié)果產(chǎn)生愈織分化織不斷織有長傷組織出芽生長根趨勢在植物組織培養(yǎng)中，脫分化可用的激素組合是實驗和實驗中的激素濃度關(guān)系，再分化可用的激素組合是實驗 和實驗中的激素濃度關(guān)系。整個實驗表明，植物的生根、發(fā)芽等生命活動是 的結(jié)果。(3)要培養(yǎng)脫毒苗，應(yīng)選用 部分作為培養(yǎng)材料。(4)利用微型繁殖技術(shù)繁殖植物的優(yōu)點是 o【解析】(1)組織培養(yǎng)盡管材料千變?nèi)f化，但其基本原理及技術(shù)相同。從材料1中“一部分組織小塊進(jìn)行離體培養(yǎng)，并誘導(dǎo)分化成大量的小植株”，可知17是植物組織培養(yǎng)技術(shù)。（2）在進(jìn)行植物組織培養(yǎng)過程中，生長素和細(xì)胞分裂素在 脫分化、再分化中起十分關(guān)鍵的作用，由表可知：實驗組 1中只有

17、6-BA時可進(jìn) 行脫分化，實驗組3中，當(dāng)6-BA的濃度與 舊A濃度相同時促進(jìn)愈傷組織生長， 可見脫分化產(chǎn)生愈傷組織可用1組，進(jìn)一步促進(jìn)愈傷組織不斷生長用 3組；而實 驗組2、4中，當(dāng)兩種激素濃度不同時愈傷組織出現(xiàn)了再分化，故再分化應(yīng)用2、4組。從表中數(shù)據(jù)可以看出，只有靠細(xì)胞分裂素和生長素的共同作用及適當(dāng)?shù)谋?例，才能使組織培養(yǎng)過程順利進(jìn)行。（3）對于無性繁殖的植物來說，其莖尖分生 組織部分分裂旺盛，病毒來不及侵入，故以此部分作為培養(yǎng)材料，可得到脫毒苗。 （4）組織培養(yǎng)本質(zhì)上為無性繁殖，故可以保持親本的優(yōu)良性狀，且在實驗室中操 作，可以不受自然季節(jié)、氣候等條件限制，可以實現(xiàn)工廠化生產(chǎn)。【答案】（

18、1）植物組織培養(yǎng) （2）1 3 2 4多種激素共同作用 （3）莖尖 分生組織 （4）得到的植株可保持親本的優(yōu)良性狀，不受自然季節(jié)、氣候等條件 的限制，可以實現(xiàn)工廠化生產(chǎn).請回答下列問題：（1）植物微型繁殖技術(shù)屬于植物組織培養(yǎng)的范疇。該技術(shù)可以保持品種的繁殖種苗的速度 。離體的葉肉細(xì)胞在適宜的條件下 培養(yǎng)，最終能夠形成完整的植株，說明該葉肉細(xì)胞具有該植物的全部（2）把試管苗轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基上時，需要在超凈工作臺上進(jìn)行，其原因是 避免的污染。（3）微型繁殖過程中,適宜濃度的生長素單獨使用可誘導(dǎo)試管苗 , 而與配比適宜時可促進(jìn)芽的增殖。若要抑制試管苗的生長，促使愈傷組織產(chǎn)生和生長，需要使用的生長調(diào)節(jié)劑是 （脫落酸、2,4-D）。（4）將某植物試管苗培養(yǎng)在含不同濃度蔗糖的培養(yǎng)基上一段時間后，單株鮮 重和光合作用強(qiáng)度的變化如圖所示。據(jù)圖分析，隨著培養(yǎng)基中蔗糖濃度的增加，