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1、課題1 菊花的組織培養(yǎng) 通過(guò)必修課的學(xué)習(xí),我們已經(jīng)了解到大多綠色開(kāi)花植物都是靠種子來(lái)繁殖的。那么,有沒(méi)有不用種子來(lái)培育植物的方法呢? 營(yíng)養(yǎng)繁殖扦插嫁接壓條 植物組織培養(yǎng)是在人工培養(yǎng)基上,離體培養(yǎng)植物的器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體,并使其生長(zhǎng)、增殖、分化以及再生植株的技術(shù)。 1.熟悉植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程;2.理解細(xì)胞分化的概念及離體植物細(xì)胞的脫分化和再分化;3.通過(guò)聯(lián)系農(nóng)業(yè)生產(chǎn)實(shí)際,培養(yǎng)學(xué)生活學(xué)活用,理論聯(lián)系實(shí)際的能力。植物組織培養(yǎng)概念:在無(wú)菌和人工控制條件下,將離體的植物器官、組織、細(xì)胞,培養(yǎng)在人工配置的培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽,最終形成完整的植株。 又稱(chēng):植物離
2、體培養(yǎng)(一)植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程: 植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程 外植體 愈傷組織 芽、根 植物體 脫分化 再分化 植物組織 愈傷組織 長(zhǎng)出叢芽 生根 移栽成活 將來(lái)自已分化組織的已停止分裂的細(xì)胞從植物體部分的抑制性影響下解脫出來(lái),恢復(fù)細(xì)胞的分裂活性。脫分化經(jīng)脫分化的組織或細(xì)胞在一定的培養(yǎng)條件下可有轉(zhuǎn)變?yōu)楦鞣N不同細(xì)胞類(lèi)型的能力。再分化植物細(xì)胞全能性的表達(dá)2.培養(yǎng)基的配制(MS培養(yǎng)基) 大量元素、微量元素、有機(jī)物、植物激素(生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素 )(二)影響植物組織培養(yǎng)的因素 1.外植體的選取 不同植物的組織培養(yǎng)難度 同一種植物的不同組織培養(yǎng)難度( 材料的年齡、保存時(shí)間)a、植物激素使用順序?qū)Ψ只挠?/p>
3、響使用順序結(jié)果先生長(zhǎng)素,后細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂但不分化先細(xì)胞分裂素,后生長(zhǎng)素 細(xì)胞既分裂也分化 同時(shí)使用分化頻率提高b、植物激素使用量對(duì)分化的影響生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素比值結(jié)果比值高時(shí)比值低時(shí)比值適中促根分化,抑芽形成 促芽分化,抑根形成 促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng) 4. 消毒在培養(yǎng)的整個(gè)過(guò)程中,都需要是一個(gè)無(wú)菌環(huán)境 菊花組織培養(yǎng)的條件: pH=5.8 溫度控制在1822 每日光照12h3. 環(huán)境條件 pH、溫度、光照等條件也很重要。(一)制備MS固體培養(yǎng)基 MS培養(yǎng)基包括20多種營(yíng)養(yǎng)成分,實(shí)驗(yàn)室一般使用4保存配制好的培養(yǎng)基母液來(lái)制備1、配制各種母液無(wú)機(jī)物中大量元素濃縮10倍,微量元素濃縮100倍,常溫
4、保存激素類(lèi)、維生素類(lèi)以及用量較小的有機(jī)物一般可按1mg/ml的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制成母液用母液配制培養(yǎng)基時(shí),需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù),計(jì)算用量2、配制培養(yǎng)基 配制培養(yǎng)液 調(diào)PH培養(yǎng)基的分裝 3、滅菌 分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進(jìn)行高壓蒸汽滅菌1、選材:菊花莖段,取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝(二)外植體消毒2、消毒流水沖洗 酒精處理消毒液處理(三)接種 污染的主要來(lái)源是空氣中的細(xì)菌和孢子,接種室消毒是至關(guān)重要的。用70的酒精噴霧使空氣消毒,酒精或新潔爾滅搽洗工作臺(tái)并用紫外線照射20分鐘1、接種室消毒2、無(wú)菌操作要求 操作要在酒精燈火焰旁完成,每次使用器械后,都需要用火焰灼燒滅菌,接種后立即蓋好瓶蓋。3、材
5、料的切取和接種(四)培養(yǎng)接種后的錐形瓶最好放在無(wú)菌箱中培養(yǎng),培養(yǎng)期間應(yīng)定期消毒培養(yǎng)溫度控制在18-22每日用日光燈光照12h(五)移栽 移栽生根的菊花試管苗之前,應(yīng)先打開(kāi)培養(yǎng)瓶的封口膜,讓試管苗在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾日1、打開(kāi)封口膜2、清洗轉(zhuǎn)移 用流水清洗根部的培養(yǎng)基,將幼苗移植到消過(guò)毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境下生活一段時(shí)間3、移栽幼苗長(zhǎng)壯后,移栽到土壤中(六)栽培 幼苗移栽后,每天觀察并記錄幼苗的生長(zhǎng)情況,適時(shí)澆水、施肥,直至開(kāi)花1、培養(yǎng)基的滅菌(高壓蒸汽滅菌)2、外植體的消毒(酒精、氯化汞)3、接種的無(wú)菌操作(酒精、酒精燈灼燒)4、無(wú)菌箱中的培養(yǎng);5、移栽到消過(guò)毒的環(huán)境中生存一段時(shí)間。在整個(gè)操作過(guò)程中
6、,是如何來(lái)實(shí)現(xiàn)無(wú)菌環(huán)境的?本課題內(nèi)容小結(jié)菊花組織培養(yǎng)基礎(chǔ)知識(shí)實(shí)驗(yàn)操作植物體的組織培養(yǎng)影響組織培養(yǎng)的因素細(xì)胞分化細(xì)胞全能性組織培養(yǎng)過(guò)程營(yíng)養(yǎng)激素環(huán)境條件MS固體培養(yǎng)基制備外植體消毒接種培養(yǎng)移栽栽培1.下列關(guān)于愈傷組織的說(shuō)法中不正確的是( )A.愈傷組織的細(xì)胞能夠進(jìn)行細(xì)胞分裂B.用葉培養(yǎng)形成的愈傷組織細(xì)胞能夠進(jìn)行光合作用C.培養(yǎng)愈傷組織的培養(yǎng)基中應(yīng)含有有機(jī)養(yǎng)料 D.人們可以從愈傷組織中提取所需物質(zhì)B2.植物組織培養(yǎng)過(guò)程中的脫分化是指( )A.植物體的分生組織通過(guò)細(xì)胞分裂產(chǎn)生新細(xì)胞B.未成熟的種子經(jīng)過(guò)處理培育出幼苗的過(guò)程C.植物的器官、組織或細(xì)胞,通過(guò)離體培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織的過(guò)程D.取植物的枝芽培育成一株新植物的過(guò)程CD3.胡蘿卜的韌皮部細(xì)胞通過(guò)組織培養(yǎng),能發(fā)育成新的植株。下列有關(guān)的敘述中,不正確的是( )A說(shuō)明高度分化的植物細(xì)胞具有全能性 B植物細(xì)胞的全能性得以表達(dá)要離開(kāi)母體C新植株的形成是細(xì)胞分裂和分化的結(jié)果 D高度分化的動(dòng)物細(xì)胞也具有全能4.植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是( )A.導(dǎo)入其他植物細(xì)胞的基因B
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