光合細(xì)菌配合面包酵母與藻粉培養(yǎng)輪蟲(chóng)的實(shí)驗(yàn)

1、光合細(xì)菌配合面包酵母與藻粉培養(yǎng)轉(zhuǎn)曳的實(shí)臉摘要-以面包醉母與一定量螺旋藻粉培養(yǎng)褶皺臂尾輪蟲(chóng)的過(guò)程中，添加光合細(xì)菌液進(jìn)行實(shí) 驗(yàn)。結(jié)果表明:光合細(xì)菌作為輔助性餌料,對(duì)輪蟲(chóng)的生長(zhǎng)具有明顯特殊的促進(jìn)作用。4組實(shí)驗(yàn)顯示:投喂適宜量 光合細(xì)菌輪蟲(chóng)增殖明顯加快,但與光合細(xì)菌添加量的增加不完全呈正比關(guān)系;投喂光合細(xì)菌新鮮培養(yǎng)液與老培養(yǎng) 液輪蟲(chóng)增殖效果相近;投喂光合細(xì)菌只能作為輔助性餌料。當(dāng)配合酵母、藻粉培育輪蟲(chóng)時(shí)3者在餌料上起到了 良好的互補(bǔ)作用，培養(yǎng)效果最佳。關(guān)鍵詞輪蟲(chóng)培養(yǎng)光合細(xì)菌面包酵母藻粉輪蟲(chóng)是魚(yú)、蝦、蟹類(lèi)人工育苗幼體階段重要的活餌 料之一，培養(yǎng)輪蟲(chóng)無(wú)疑是育苗技術(shù)中的重要環(huán)節(jié)。輪蟲(chóng) 在工廠化培養(yǎng)中可利用高

2、密度單胞藻獲得高產(chǎn)，但目前 該技術(shù)仍有占地多、耗用人力多的問(wèn)題。近年來(lái)用面包 酵母單獨(dú)投喂輪蟲(chóng),也可獲得高產(chǎn)。因酵母來(lái)源廣，貯 運(yùn)方便，此法已廣為利用。但發(fā)現(xiàn)輪蟲(chóng)培養(yǎng)過(guò)程中易出 現(xiàn)延遲期，且培養(yǎng)出的輪蟲(chóng)個(gè)體小,餌料價(jià)值有待提高。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外開(kāi)展的光合細(xì)菌(PSB)在水產(chǎn)養(yǎng)殖的應(yīng)用研究，各方面效果很好。在PSB培養(yǎng)輪蟲(chóng)方面，就 PSB單獨(dú)投喂、PSB與藻液、PSB與面包酵母混合投喂輪 蟲(chóng)分別進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，取得很好的效果。本實(shí)驗(yàn)以PSB混合 面包酵母與螺旋藻粉投喂輪蟲(chóng)，并對(duì)其培養(yǎng)效果進(jìn)行比 較詳細(xì)的觀察，旨在為工廠化培養(yǎng)輪蟲(chóng)從餌料方面提供 一些數(shù)據(jù)和補(bǔ)充。1材料與方法1.!材料2.1.1 光合細(xì)菌(p

3、hotos 押 thetieBaetea,以下簡(jiǎn)稱(chēng) PSB) 由海南大學(xué)水產(chǎn)系微生物實(shí)驗(yàn)室從當(dāng)?shù)睾Ｄ嘀蟹蛛x、培 養(yǎng)，屬紅假單胞菌屬,密度為50億celllml0實(shí)驗(yàn)用接種7 14天的新鮮培養(yǎng)液，老培養(yǎng)液為接種4個(gè)月。1.12面包酵母(Saeeharo卿eeseerevisia)市售中法合資生 產(chǎn)。收稿日期:2003 01 一 201.13螺旋藻粉海南晨光生物有限公司生產(chǎn)，以下簡(jiǎn)稱(chēng) 藻粉。14輪蟲(chóng)(腸動(dòng)角us夕Iica石方習(xí)無(wú)病、健康、活力好的褶 皺臂尾輪蟲(chóng)。5海水鹽度26,砂濾海水，水溫28C。!.2方法12.1培養(yǎng)方法用漂白粉消毒砂濾海水，曝氣2天，用硫 代硫酸鈉中和余氯，裝人40L白桶中，

4、大量充氣，放入 輪蟲(chóng)初密度在30 一 100個(gè)/耐，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。每日早換水 90%,換水后加水至4oL,取樣進(jìn)行計(jì)數(shù)，鏡檢。根據(jù) 輪蟲(chóng)總數(shù)量，計(jì)算投餌量，每日投6次,每個(gè)實(shí)驗(yàn)組平 行2次。1.2.2日投喂量酵母按69/百萬(wàn)輪蟲(chóng)，藻粉按酵母量的 115(即129/百萬(wàn)輪蟲(chóng))，2者混合后用300目篩絹搓， 分6次投喂。光合細(xì)菌按酵母:PSB二19:1ml比例的 日添加量一次性投人水中。如果按100個(gè)輪蟲(chóng)/ml計(jì)算， 40L水體日投餌量為酵母249:藻粉4.89:PsB24ml。 1.2.3帶卵率計(jì)算和觀察用培養(yǎng)皿取10而左右的樣品， 滴加碘液殺死輪蟲(chóng)，放在顯微鏡下觀察輪蟲(chóng)的帶卵情況。 帶卵率計(jì)算公式

5、如下:帶卵率=視野中帶卵的輪蟲(chóng)個(gè)體 總數(shù)/視野中輪蟲(chóng)個(gè)體總數(shù)x100%;帶一卵率二視野中 帶一卵的輪蟲(chóng)個(gè)體總數(shù)/視野中帶卵的輪蟲(chóng)個(gè)體總數(shù)x 100% ;并依次計(jì)算出帶二卵率、帶三卵率等。1.2.4日增殖倍數(shù)和日增殖率計(jì)算日增殖倍數(shù)二末輪蟲(chóng)卉斗降業(yè)2003年第20卷第6期 ShandongFisheries2003,20(6)密度/初始輪蟲(chóng)密度(以24小時(shí)為單位計(jì)算)。日增殖率2.1投喂PsB(新鮮與老培養(yǎng)液)與不 投喂PsB組培養(yǎng)輪(r)二InN洲0Nt:1天后的輪蟲(chóng)密度,N0:初始密度。蟲(chóng)的情況 2結(jié)果見(jiàn)表1。衰1投喂Ps日與不投喂PsB組培養(yǎng)輪蟲(chóng)實(shí)驗(yàn)記錄 最初24小時(shí)后48小時(shí)后 組別輪蟲(chóng)

6、密度帶卵率一卵率二卵串 (個(gè)/nil)(%) 輪蟲(chóng)密度 (個(gè)/nil)OJ-月耳 b01J bQU,J 門(mén)月才產(chǎn)(.A) 一。55555(0A 一 9595 外外仍 95808080808080l, UR J 斑一 IJIJ4 飛 IJ 內(nèi)不投 PSB (對(duì)照組) 老PSB液組 新鮮PsB組 日增殖倍數(shù)帶卵率一卵率二卵率 (r)(%)(%)(%) 雨O麗 2 丫一 80964 1.91(0.647)82955 2.1(0.742)9360402.0(0.690)95564420 協(xié).69 偽 9858422.16(0.771)986347輪蟲(chóng)密度(個(gè)/血)109110187179166174日

7、增殖倍數(shù)帶卵率一卵率二卵率 (r)(%)(%)(%)麗 6 扣萬(wàn) 21)8190101.81 (0.593)859282.23(0.802)946535236(0.858)965842237(0.862)9853462,45(0.896)996()40由以上結(jié)果分析可知，無(wú)論是新鮮還是老PsB培養(yǎng)物添加到面包酵母和藻粉中培養(yǎng)輪蟲(chóng)，都能明顯提高輪 蟲(chóng)增殖速度，差異極顯著。但是這種增殖效果有個(gè)過(guò)程， 在24小時(shí)內(nèi)主要是輪蟲(chóng)抱卵積累的過(guò)程，從鏡檢看在第 12小時(shí)輪蟲(chóng)抱卵率已經(jīng)開(kāi)始增加,24小時(shí)后抱卵情況明 顯好轉(zhuǎn)，第48小時(shí)后，輪蟲(chóng)增殖效果差異變得極顯著， 意味著PsB的持續(xù)添加,將帶來(lái)持續(xù)穩(wěn)定的促

8、長(zhǎng)效果。另 外新鮮和老PsB培養(yǎng)物對(duì)輪蟲(chóng)的增殖效果的方差分析結(jié) 果不顯著。2.2在酵毋和藻粉中添加不同比例PsB培養(yǎng)槍蟲(chóng)的實(shí)驗(yàn) 見(jiàn)表2。裹2添加不同比例pSB培養(yǎng)輪蟲(chóng)的實(shí)驗(yàn)。酵母：PSB(91111)l:01:0.11:03751:0.751:151:2輪蟲(chóng)初密度313540363838(個(gè)/ml) 士 07 士 1.4 士 26 土 1.8 土 2.1 士 2.124小時(shí)后輪蟲(chóng)607075788083密度(個(gè)/ml) 土 14 土 0.8 土 2.2 土 2.4 士 2.1 士 2248 小時(shí)后輪蟲(chóng) 110128158181199209密度(個(gè)/ml)10.7 士 4.8 士 6.2 土 5

9、.8 土 7 土 8.848 小時(shí)/24 小時(shí) l,8351832,112.322.489252輪蟲(chóng)的增殖倍數(shù)士 003 土 0.05 士 0,06 土 0.06 士 007 土 0.08 藻粉的添加量仍按醉母(幼:藻粉(幻二1:1。2.3以面包酵毋為主依次添加藻粉、光合細(xì)菌培養(yǎng)輪蟲(chóng) 實(shí)驗(yàn) 見(jiàn)表3。從表3可見(jiàn)，當(dāng)酵母中逐次添加藻粉和PSB時(shí),輪蟲(chóng)增殖結(jié)果三合一組 二合一組單獨(dú)投酵母組。2.4降低酵母與藻粉投喂量后投喂高濃度psB實(shí)驗(yàn)見(jiàn)表4 口表3以面包醉母為主添加旅粉、光合細(xì)菌培養(yǎng)輪蟲(chóng)實(shí)驗(yàn)記錄組別最初輪蟲(chóng)密度（個(gè)/ml）24小時(shí)后輪蟲(chóng)密度（個(gè)/ml）48小時(shí)后輪蟲(chóng)密度（個(gè)/ml）48小時(shí)/24

10、小時(shí)輪蟲(chóng)增殖倍數(shù)（r）Q 戶(hù)，41, 041486063898400 八 110nn 面包酵 73母組76面包酵母69+藻粉組73面包酵母十藻70粉+玲B組661681.521861.62內(nèi)j八書(shū)，氣一。八。八硯一 J件，.上1,工，白14473040,乙，月J門(mén)0以.了 .OJ, O 滬 111,乙 4 飛.且,月月五.L1.1.11.1 表4陽(yáng)氏酵母與旅粉投喂t后投喂高濃度pss實(shí)驗(yàn)結(jié)果*組最初輪帶卵率12小時(shí)后帶卵率24小時(shí)后帶卵率日增殖 別蟲(chóng)密度輪蟲(chóng)密度輪蟲(chóng)密度倍數(shù)（個(gè)/而）（%）（個(gè)/而）（%）（個(gè)/Inl）（%）（r）降低組 1139618060190151.05（0.054）士

11、1.42 士 35 士 52 士 2.8 士 7.2 士 0.8 士 0.05（0002）原量組 1109518090419902.322（0.778）土 1.96 士 4.3 士 6.3 士 3.2 士 8.6 士 4.6 士 004（0002），降低組為把酵母與藻粉量降低至原投喂最的30%,但每日照 常添加PSB;原量組仍按酵母與藻粉的原量投喂，添加PsB。從表4可見(jiàn)，當(dāng)面包酵母和藻粉的投喂量嚴(yán)重不足時(shí)，即使PSB仍按600 x10 一 添加，1天后輪蟲(chóng)的帶卵率 也會(huì)明顯下降，輪蟲(chóng)的增殖倍數(shù)比原量組小，輪蟲(chóng)的帶 卵率僅為巧%。3討論3.1光合細(xì)菌的適量添加可明顯提高使用面包酵母和藻 粉培養(yǎng)

12、輪蟲(chóng)的效果,其原因可能是3者在餌料營(yíng)養(yǎng)上的 互補(bǔ)作用。表1 一 3三組實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在一定的輪蟲(chóng)密度下， 無(wú)論是新、老PSB培養(yǎng)液均在適宜濃度下能明顯提高使 用面包酵母和藻粉的培養(yǎng)效果。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn),PSB投 32 卉斗違業(yè) 2003 年第 20 卷第 6 期 ShandongFisheries2003,20(6) 喂24小時(shí)后，輪蟲(chóng)的帶卵情況明顯變化，不僅帶卵率增 至95% 100%,而且?guī)?卵的較多，帶2卵率能達(dá)到 40% 60%,帶3卵、4卵、5卵的均有。這是沒(méi)投喂PsB 組所沒(méi)有的。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)，投PSB組比不投PSB組所繁 殖的后代個(gè)體肥大,胃腸攝食飽滿，卵巢色澤濃。另外， 每8小時(shí)就有

13、一批輪蟲(chóng)卵生成;不投喂PSB組每12小時(shí) 才少量生成一批新輪蟲(chóng)卵。其原因，筆者認(rèn)為可能是光合細(xì)菌中含有的特殊活 性物質(zhì)與酵母、藻粉的餌料價(jià)值的互補(bǔ)作用，這與坂本 久川、王鑒【21觀點(diǎn)一致。光合細(xì)菌富含蛋白質(zhì)，尤其 富含對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育起促進(jìn)作用的特殊生理活性物質(zhì) (如輔酶Q和相當(dāng)完全的B族維生素)，特別是酵母中所 缺乏的維生素B.2、葉酸、生物素含量豐富。如光合細(xì)菌 中富含的維生素B,2,對(duì)面包酵母培養(yǎng)輪蟲(chóng)就有獨(dú)特的互 補(bǔ)作用。據(jù)報(bào)告，面包酵母由于添加維生素B12,其餌料 價(jià)值得以改善，輪蟲(chóng)卵由很多不孵化轉(zhuǎn)為全部孵化。但 光合細(xì)菌所含的其它重要活性物質(zhì)對(duì)輪蟲(chóng)的獨(dú)特的促長(zhǎng) 作用，其機(jī)制未作進(jìn)一步的

14、研究?？赏茰y(cè),PSB的某些 營(yíng)養(yǎng)成份可提高輪蟲(chóng)對(duì)酵母的利用率，促進(jìn)卵生成的速 度和數(shù)量，而高的帶卵率和數(shù)量往往帶來(lái)下一代輪蟲(chóng)的 增殖高峰。3、2投喂新鮮PSB比老PsB培養(yǎng)液培養(yǎng)輪蟲(chóng)效果略好，但 差別不大。從表1的結(jié)果我們看到2種PsB培養(yǎng)液的增 殖效果接近，由此可推測(cè),PSB對(duì)輪蟲(chóng)的增殖促進(jìn)主要 是營(yíng)養(yǎng)方面，而改善水質(zhì)方面可能屬于次要作用。3.3隨著PSB液添加量的不斷增加，輪蟲(chóng)增殖速度在增 加，但不完全成正比。首先PSB添加量要達(dá)到適宜量， 促進(jìn)輪蟲(chóng)增殖的效果才明顯。從表2中可見(jiàn)，按酵母： PsB二19:0.lml時(shí)，促長(zhǎng)效果并不明顯，當(dāng)2者比例 達(dá)到1:0.375時(shí),添加組輪蟲(chóng)比對(duì)照組增

15、長(zhǎng)明顯加快 但2者并不成正比，當(dāng)2者比例達(dá)到1:2后,增殖率基 本穩(wěn)定，輪蟲(chóng)帶2卵率也不超過(guò)60%,也不再出現(xiàn)更多 的3卵、4卵，說(shuō)明PsB對(duì)輪蟲(chóng)的增殖效果是一定的，有 限的。3.4光合細(xì)菌促長(zhǎng)輪蟲(chóng)的效果可靠，但同時(shí)如果水中有 原生動(dòng)物時(shí)，同樣也可促進(jìn)原生動(dòng)物的繁殖，所以務(wù)必 使水中輪蟲(chóng)為優(yōu)勢(shì)種。35光合細(xì)菌雖能促長(zhǎng)輪蟲(chóng)，但其單獨(dú)作為餌料，價(jià)值甚小，從表4可看到，當(dāng)酵母量減少時(shí),即使有PSB的添加，仍不能滿足輪蟲(chóng)正常繁殖的需要。這點(diǎn)和坂本久的觀點(diǎn)一致。所以在用酵母培養(yǎng)輪蟲(chóng)的過(guò)程中，酵母的量一定要給足，否則即使添加光合細(xì)菌也達(dá)不到預(yù)期的很明顯效果。36雖光合細(xì)菌能有效促進(jìn)酵母培養(yǎng)輪蟲(chóng)的效果，但酵

16、母在水中的存活時(shí)間及污染水質(zhì)仍是不容忽視的問(wèn)題如果有高濃度的藻液同時(shí)添加PSB應(yīng)為培養(yǎng)輪蟲(chóng)最好的辦法。據(jù)王鑒2報(bào)道此時(shí)添加350 x1倉(cāng)較合適。參考文獻(xiàn)坂本久等.光合成細(xì)菌、桃紅英硫菌對(duì)臂尾輪蟲(chóng)的餌料價(jià)值.國(guó)外水產(chǎn)，1984,(4):44 一心 s王鑒,祝國(guó)芹.不同濃度的光合細(xì)菌對(duì)輪蟲(chóng)繁殖的影響水產(chǎn)科學(xué)，1994,13(5):23 25許兵等.光合成細(xì)菌對(duì)褶皺臂尾輪蟲(chóng)的餌料價(jià)值.海洋湖沼通報(bào)，1992,(2):17 一 22王金秋等.面包醉母添加PSB和Vc后培養(yǎng)輪蟲(chóng)的效果.水產(chǎn)科技情報(bào)，1999,(l):25 31王育鋒等.用光合細(xì)菌液池塘培育淡水魚(yú)種的試驗(yàn)，水產(chǎn)學(xué)報(bào)，1990,14(4):

17、347 一 350齊魯漁業(yè)2002年精裝合訂本開(kāi)始發(fā)售應(yīng)廣大讀者要求,2002年(齊奢漁業(yè)推出精裝合仃本,并于即日起向廣大讀者發(fā)售。合仃本 裝幀考究，古樸典推,不但閱讀方便，且有收藏價(jià)值。合仃本數(shù)童有限，每本定價(jià)了。元(含郵寄費(fèi))，有意者請(qǐng)與山東煙臺(tái)四馬路63號(hào)齊魯漁業(yè)雜志 社李雪梅、王治宇聯(lián)系.郵編：264001.電話：0535 62170796217078。SHANDONGFISHERIESVol20NO,62003ABSTRACTSANDKEYWORDSExPerimentonthePondCultureofPenaeuschinen 壓眾 intheSalinizationArea.S

18、unyu 比 ongetal(l)AbstraetInordertochangetheactUalitythatfishwasthemaineulturesPeeiesandmadelowProfit,aswellasseekoutthenewwaysofPreventiondiseaseinthePrawnculture,noneoftheexPerimentwasearriedout.Duringthe130daysofeulture,noneofthePrawnbeingrearedinthesaliniZationPondwasinfectedwiththeWSSVvi 邙 5andt

19、heProfitwas230()yuanPermuKeywordsPenaeuschinensis 獷 Pondinthesalinizationarea;cultureexPeriment;Preventionofthedise 韶 etemPerature 一 controlledseedng;larvaergStu 勿 ontheTemPerature eont 拍 lledHighYield CulturelechniqueofPectenyessoens 紐 Jay QiJingtaoetal(12)AbstraetMeasuressuehasPurifyingandeontroll

20、ingthePhysiealandchemiealfactorsofthe seawater,clloosingthebestbroodscalloP,eonirolling thetemPerature,changingandaeratingthewater,PreventingthediseaseandusingthePhotosyntlleticl aeteriawereapPlied.Theaverageyield was7600thousalldPereubiemeterofthewaterbodyKeywordsPectenyessoensisJay,.indueed matura

21、tionoftheParentscalloP;incubation; TheExPerimentsonCultureBrachionusPli 亡 a 雄公初 thPSBAddedto 飛乞 astandAlgaePOwdery 妞。Xuemeietal(32)AbstractIntheProeessofeulturerotiferBrachionusPlicatiliswithBaker,5yeastandaeertain a 們 nouniofsPiralingalgaePowder,weaddPhotosyllth- etieBacteria(PSB)inourexpenments.Theresultshow thatasakindofsubsidiarydiet,PSBhasallextraord- inaryandobviouslyeffecttoaccelelatePoPulationof therotifer.ThefourgrouPsofexPerimentsshowresPeetively:(1)TherotiferfedwithaPPr0Priatedosage ofPSB,Profiferatefaster.(2)Theefl七 ctwithfresh