油莎豆成分測定ppt

1、不同油莎豆品種塊莖營養(yǎng)成分的比較分析 1 1 研究背景 2 研究內(nèi)容 3 實驗結(jié)果 4 結(jié)論21 研究背景 油莎豆又名油莎草、油莎果，地下結(jié)有大量塊莖，塊莖富含油脂、蛋白質(zhì)、糖和淀粉，素有“地下核桃”之稱。主要用于油糧、飼料、食品、醫(yī)藥、生物柴油、生物潤滑油、沼氣等行業(yè)產(chǎn)品的原料。油莎豆是目前油料作物中地下塊莖產(chǎn)量最高的品種，故研究油莎豆的淀粉、脂肪和蛋白質(zhì)等的含量對工業(yè)化提取具有現(xiàn)實意義。342 實驗內(nèi)容1、不同品種油莎豆塊莖中粗脂肪的含量測定2、不同品種油莎豆塊莖中粗蛋白的含量測定3、不同品種油莎豆塊莖中可溶性糖的含量測定4、 不同品種油莎豆塊莖中淀粉的含量測定5、不同品種油莎豆塊莖中水分

2、的含量測定51、提取工藝流程 油莎豆（磨成粉） 正己烷溶解 過濾 正己烷提取液 濾渣（粗蛋白） 多次蒸餾 出正己烷 粗脂肪 苯酚硫酸法 考馬斯亮藍比色法 旋光法 可溶性糖 蛋白質(zhì) 淀粉 圖1 油莎豆營養(yǎng)成分測定工藝流程圖 62.1 用浸提法測定油莎豆塊莖中粗脂肪的含量 操作方法： 挑取干凈飽滿的油莎豆在75的干燥箱中烘干后粉碎 粒度控制在95%通過80目篩 稱取2.00 g豆粉 正己烷浸泡溶解 磁力攪拌器上攪拌2 h后 轉(zhuǎn)入80恒溫水浴鍋中加熱1 h 過濾掉殘渣 合并濾液于燒杯中 在100的恒溫水浴鍋中加熱蒸發(fā)掉正己烷 再于干燥箱中干燥直至恒量 所得到的黃色液體就是粗脂肪72.2 用考馬斯亮藍

3、法測定油莎豆塊莖中粗蛋白的 含量 原理： 用考馬斯亮藍G250法測定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種?？捡R斯亮藍G250在游離狀態(tài)下呈紅色，最大光吸收在488nm；當它與蛋白質(zhì)結(jié)合后變?yōu)榍嗌鞍踪|(zhì)-色素結(jié)合物在595nm波長下有最大光吸收。其光吸收值與蛋白質(zhì)含量成正比，因此可用于蛋白質(zhì)的定量測定。 8 2.2.1 試劑的配制 100 gmL牛血清白蛋白標準溶液、考馬斯亮藍G-250 2.2.2 蛋白質(zhì)標準曲線制作 以吸光度為縱坐標，蛋白質(zhì)濃度作為橫坐標作圖得標準曲和回歸方程： y=0.0048x+0.0004 R2=0.999892.2.3 樣品處理 取油莎豆粉1.00 g 轉(zhuǎn)移到離心管中 加

4、入用10mL正己烷 攪拌后靜置0.5 h然后在4 000 r/min離心10 min 棄去上清液 得到粗蛋白 重復三次后 加入蒸餾水于離心管中攪拌溶解 然后在4 000 r/min離心10 min 收集上清液重復三次 再合并上清液 定容于100 ml的容量瓶中。10 再取待測樣品提取液各0.1 mL, 再加入0.9 mL蒸餾水，5.0 mL考馬斯亮藍G250試劑，充分混合，放置2 min后，在595 nm波長下比色記錄吸光度。在標準曲線上查得相應(yīng)的蛋白質(zhì)含量（g），按下式計算蛋白質(zhì)含量。油莎豆蛋白質(zhì)含量% V為提取液總體積(ml) C為提取液的蛋白質(zhì)含量(g/ml) W為油莎豆塊莖(g)11

5、2.3 用苯酚硫酸法測定油莎豆塊莖中可溶性糖 的含量 原理： 糖在濃硫酸作用下，脫水生成的糠醛或羥甲基糠醛能與苯酚縮合成一種橙紅色化合物，在10100 mg范圍內(nèi)其顏色深淺與糖的含量成正比，且在490nm波長下有最大吸收峰，故可用比色法在此波長下測定。苯酚法方法簡單，靈敏度高，實驗時基本不受蛋白質(zhì)存在的影響，并且產(chǎn)生的顏色穩(wěn)定160 min以上。 12 2.3.1試劑的配制 70乙醇，葡萄糖標準溶液（100 g/mL）：5%苯酚溶液（需要當天配制） 2.3.2 葡萄糖標準曲線制作 以吸光度為縱坐標，葡萄糖濃度作為橫坐標作圖得標準曲和回歸方程： y=0.0083x+0.0154 R2=0.999

6、1132.2.3 樣品處理稱取油莎豆粉1.00 g 放入離心管中 再加入10mL正己烷充分攪拌 在4 000 r/min離心10 min 棄去上清液 重復脫脂數(shù)次后 再加入15 mL 70乙醇 攪拌使可溶性糖充分溶解 然后在4 000 r/min離心10 min 收集上清液 重復以上操作數(shù)次 合并上清液于100 mL容量瓶中 14 取待測樣品提取液 1.0 mL稀釋于50 ml的容量瓶，再取稀釋液1.0 ml于試管中，按標準曲線的測定方法依次加入試劑，在490 nm波長下測吸光度。 根據(jù)所測樣品提取液的吸光度，在標準曲線上查得相應(yīng)的可溶性糖含量。按下式計算： 可溶性糖%= V為提取液總體積(m

7、l) C為提取液的含糖量(g/ml) W為油莎豆塊莖(g)15 2.4用旋光法測定油莎豆塊莖中淀粉的含量 2.4.1 原理： 酸性氯化鈣溶液與淀粉共煮時可使淀粉發(fā)生輕度水解，同時鈣離子與淀粉分子上的烴基絡(luò)合，這就使得淀粉分子充分地分散到溶液中，成為淀粉溶液。淀粉分子由于具有不對稱碳原子，因而有旋光性。所以利用旋光儀測定淀粉溶液的旋光度。162.4.2 溶液的配制： 氯化鈣-乙酸溶液：溶液密度為 1.30.02，pH值為2.30.02，30硫酸鋅溶液，15亞鐵氰化鉀溶液2.4.3 樣品的處理：脫脂：稱取油莎豆粉1.0 g，放入離心管中，再加 入10mL正己烷，用玻璃棒充分攪拌后，在4 000 r

8、/min離心10 min，棄去上清液，重復脫脂數(shù)次。脫糖：加入15 mL 70乙醇，攪拌使可溶性糖充分溶解，然后在4 000 r/min離心10 min，傾去上清液，重復以上操作數(shù)次。 172.4.4 溶提淀粉： 加醋酸氯化鈣： 先加入醋酸氯化鈣溶液約10 ml到離心管中 攪拌后全部傾入到三角瓶內(nèi) 再用醋酸氯化鈣溶液50 ml分數(shù)次洗滌離心管 合并洗滌液到三角瓶內(nèi) 煮沸溶解： 先用標簽標記液面高度 置于加有石棉網(wǎng)的電爐上 在3 min4 min內(nèi)迅速煮沸 保持沸騰15 min 立即將三角瓶取下 置冷水中冷卻（煮沸過程中要不斷攪拌，并加水保持液面高度）18加沉淀劑： 將三角瓶內(nèi)的水解液轉(zhuǎn)入100

9、 ml容量瓶 加 30ZnSO41 ml搖勻混合后 再加15 K4Fe（CN）61 ml （如果有泡沫可加無水乙醇數(shù)滴以破壞泡沫） 用蒸餾水定容到刻度 混合靜置以使蛋白充分沉淀 過濾：先傾入上清溶液約10 ml于濾紙上，使濾紙完全濕潤，等溶液流干棄去濾液，再將剩余溶液進行過濾。用干燥的容器接受此濾液，收集約50 ml，即可供測定之用。192.4.5 樣品測定： 將旋光儀打開預熱2 min左右，用旋光測定管裝滿濾液，按照旋光儀使用說明，進行旋光度的測定。 結(jié)果按下式計算： 淀粉（）100/20DLW100 式中：a：用鈉光時觀測到的旋光度；20D：淀粉的比旋度，在這種方法條件下為203；L：旋光

10、管長度（dm）；W：樣品質(zhì)量（g）。202.5 用直接干燥法測定水分的含量 水分的測定直接參照GB/ T 5009.3-2003食品中水分的測定方法即直接干燥法. 各稱1.5 g油莎豆粉末, 105下烘干至恒重,用分析天平稱量。21 3 結(jié)果與分析3.1 油莎豆塊莖中粗脂肪含量 表1 不同品種油莎豆塊莖中油脂的含量(%) 223.2 油莎豆塊莖中粗蛋白含量 表2 不同品種油莎豆塊莖中粗蛋白的含量(%)233.3 油莎豆塊莖中可溶性糖含量 表3 不同品種油莎豆塊莖中可溶性糖的含量(%)243.4 油莎豆塊莖中淀粉含量 表4 不同品種油莎豆塊莖中淀粉的含量(%)253.5 油莎豆塊莖中水分含量 表5 不同品種油莎豆塊莖中水分的含量26 經(jīng)過測定，三種油莎豆主要營養(yǎng)成分列于表,并與國家農(nóng)場種植油莎豆和花生的營養(yǎng)成分進行比較。 表6 油莎豆和花生的主要營養(yǎng)成分對比(%)27 從表6中我們可以看出粗脂肪的含量是最多的是莆院5號油莎豆，蛋白質(zhì)、可溶性糖、淀粉、水分含量最多的是莆院6號油莎豆。從表中我們也可以看出由我校課題組提供的油莎豆所含的脂肪、蛋白質(zhì)、糖含量明顯低于國家農(nóng)場種植的油莎豆，而淀粉含量要高于國家種植。說明油莎豆營養(yǎng)成分含量不僅與種植的地