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1、PAGE PAGE 11非選擇題專項(xiàng)訓(xùn)練二1(2021河北張家口質(zhì)量監(jiān)測)配制培養(yǎng)基時(shí)可根據(jù)某一種或某一類微生物的特殊營養(yǎng)要求,加入某些物質(zhì)或除去某些物質(zhì)以抑制其他微生物的生長,也可以根據(jù)某些微生物對一些物理、化學(xué)因素的抗性,設(shè)置特殊培養(yǎng)條件或在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),從而篩選出特定的微生物,這種培養(yǎng)基叫作選擇培養(yǎng)基。根據(jù)有關(guān)內(nèi)容回答以下問題:(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟是:計(jì)算、稱量、溶化、_、_。(2)某同學(xué)在做微生物實(shí)驗(yàn)時(shí),不小心把大腸桿菌和酵母菌混合在了一起。請回答有關(guān)分離得到純度較高的大腸桿菌和酵母菌的實(shí)驗(yàn)的問題:主要步驟:制備兩種培養(yǎng)基:一種加伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基,一種
2、加青霉素的培養(yǎng)基。兩種培養(yǎng)基分別分成兩份,依次標(biāo)上A、A、B、B備用。培養(yǎng)基應(yīng)采用_法滅菌。分別向A、B培養(yǎng)基中接種_。接種后,放在恒溫箱中培養(yǎng)34天。試說明觀察到的培養(yǎng)結(jié)果:加伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基上有黑色的大腸桿菌群落,_。從A、B培養(yǎng)基的菌落中挑取生長良好的兩種目的菌種,分別接種到A、B培養(yǎng)基中。接種后,把A、B培養(yǎng)基放入恒溫箱中培養(yǎng)34天。第兩個(gè)步驟的目的是_?!敬鸢浮?1)滅菌倒平板(2)高壓蒸汽滅菌混合菌加青霉素的培養(yǎng)基上只有酵母菌菌落獲得純度較高的大腸桿菌和酵母菌【解析】(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟是:計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。(2)青霉素不影響酵母菌的生長繁殖,但
3、會抑制大腸桿菌的生長繁殖,大腸桿菌的代謝產(chǎn)物能與伊紅美藍(lán)發(fā)生特定的顏色反應(yīng),使菌落呈黑色,所以應(yīng)一種培養(yǎng)基中加入伊紅美藍(lán),一種培養(yǎng)基中加入青霉素。培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌法滅菌。分別向A、B培養(yǎng)基中接種混合菌,培養(yǎng)后加伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基上的黑色菌落是大腸桿菌菌落,加青霉素的培養(yǎng)基上生長的菌落是酵母菌菌落。從A、B培養(yǎng)基的菌落中挑取生長良好的兩種目的菌種,分別接種到A、B培養(yǎng)基中培養(yǎng),目的是獲得純度較高的大腸桿菌和酵母菌。2(2021江西南昌十中期末)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某研究小組測定了該河流水樣中的細(xì)菌含量,并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?;卮鹣铝袉栴}:(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中細(xì)菌含
4、量。在涂布接種前,隨機(jī)取若干空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間,這樣做的目的是_;然后,將1 mL水樣稀釋100倍,在4個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,4個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為29、39、38和37,據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_個(gè)。(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí),接種環(huán)通過_滅菌。(3)圖A和B中,_表示的是用平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。能夠得到單菌落的是圖示_。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng),另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中_的含量,
5、同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。(5)得到圖B所示結(jié)果所用的接種工具是_。測定土壤中細(xì)菌的數(shù)量時(shí),一般稀釋倍數(shù)為_倍?!敬鸢浮?1)檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格3.8107(2)灼燒(3)AAB(4)溶解氧(5)涂布器104、105、106【解析】(1)在微生物培養(yǎng)過程中應(yīng)該進(jìn)行無菌操作,配制的培養(yǎng)基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,將未接種的空白平板進(jìn)行培養(yǎng)以檢測培養(yǎng)基滅菌是否徹底、合格;由題意知1 mL水樣中的活菌數(shù)是(393837)30.11003.8104(個(gè)),每升水樣中的活菌數(shù)是3.81041033.8107(個(gè))。(2)對接種環(huán)常用的滅菌方法是灼燒滅菌。(3)分析題圖可知,圖A表
6、示用平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果,圖B表示用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果,二者都能得到單菌落。(4)振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快,其原因是振蕩培養(yǎng)提高了培養(yǎng)液中溶解氧的含量,同時(shí)使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高了營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。(5)圖B表示用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果,接種工具是涂布器。測定土壤中細(xì)菌的數(shù)量時(shí),為了保證培養(yǎng)基平板上菌落的數(shù)目為30300,一般稀釋倍數(shù)為104、105、106倍。3(2021福建畢業(yè)班質(zhì)檢)硒是一種生命必需的微量元素。亞硒酸鈉對細(xì)菌的生長有明顯的毒害作用,土壤中的一些富硒細(xì)菌可將其還原為紅色單質(zhì)硒。如圖為土壤中富硒細(xì)菌的篩選和純化過程。
7、回答下列問題。(1)若中出現(xiàn)_的現(xiàn)象,則說明培養(yǎng)基中的亞硒酸鈉被細(xì)菌還原。(2)梯度稀釋的目的是_。將細(xì)菌從接種至應(yīng)采用_法。(3)研究人員篩選出一種富硒菌株,現(xiàn)欲通過觀察菌落來判斷菌株對亞硒酸鈉的耐受值,請將下列實(shí)驗(yàn)補(bǔ)充完整:配制系列濃度梯度的亞硒酸鈉_(填“液體”或“固體”)培養(yǎng)基;向培養(yǎng)基中分別接種_的該菌株菌液,在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間;觀察菌落的生長情況,_的培養(yǎng)基對應(yīng)的最高亞硒酸鈉濃度即為該菌株對亞硒酸鈉的最高耐受值?!敬鸢浮?1)培養(yǎng)基變紅(2)使聚集在一起的細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落平板劃線(3)固體等量有菌落生長【解析】(1)由題意可知,土壤中的一些
8、富硒細(xì)菌可將亞硒酸鈉還原為紅色單質(zhì)硒,因此若中培養(yǎng)基變紅,則說明培養(yǎng)基中的亞硒酸鈉被細(xì)菌還原。(2)梯度稀釋的目的是使聚集在一起的細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落;從中挑取菌種接種至應(yīng)采用平板劃線法。(3)由題意可知,研究人員篩選出了一種富硒菌株,若要通過觀察菌落來判斷菌株對亞硒酸鈉的耐受值,步驟如下:配制系列濃度梯度的亞硒酸鈉固體培養(yǎng)基;向培養(yǎng)基中分別接種等量的該菌株菌液,在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間;觀察菌落生長情況,有菌落生長的培養(yǎng)基對應(yīng)的最高亞硒酸鈉濃度即為該菌株對亞硒酸鈉的最高耐受值。4(2021云南昆明三中測試)某些細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3。欲從土壤中分離能
9、分解尿素的細(xì)菌,某研究小組利用成分為KH2PO4、Na2HPO4、葡萄糖、瓊脂、尿素的培養(yǎng)基進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。請回答:(1)在土壤微生物的培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)基中的KH2PO4與Na2HPO4除了可以作為_被細(xì)菌利用外,它們還具有的功能為_。(2)該培養(yǎng)基對土壤中的微生物具有選擇作用,理由是_。微生物能分解尿素的原因是其能合成_。(3)為獲得目的菌的單菌落,常對土壤樣液做_處理。為便于確認(rèn)目的菌,可在培養(yǎng)基中加入_指示劑,接種并培養(yǎng)菌種后,可根據(jù)菌落周圍_判斷出該菌能分解尿素?!敬鸢浮?1)無機(jī)鹽維持培養(yǎng)基的pH相對穩(wěn)定(2)尿素為該培養(yǎng)基中的唯一氮源,只有能以尿素為氮源的微生物才能在此培養(yǎng)基上生長
10、、增殖脲酶(3)稀釋酚紅出現(xiàn)紅色【解析】(1)培養(yǎng)基中的KH2PO4與Na2HPO4除可作為無機(jī)鹽被細(xì)菌利用外,還可構(gòu)成緩沖液,維持培養(yǎng)基的pH相對穩(wěn)定,利于微生物的生長與增殖。(2)該培養(yǎng)基中的尿素為唯一氮源,只有能以尿素為氮源的微生物才能在此培養(yǎng)基上生長、增殖,所以該培養(yǎng)基對土壤中的微生物具有選擇作用。微生物能分解尿素的原因是其能合成脲酶,脲酶可將尿素分解為氨。(3)為獲得目的菌的單一菌落,常用無菌水對土壤樣液做稀釋處理。尿素分解菌合成的脲酶可將尿素分解成氨,氨可使培養(yǎng)基的pH升高,進(jìn)而使酚紅指示劑變紅,所以為便于確認(rèn)目的菌,可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,接種并培養(yǎng)菌種后,可根據(jù)菌落周圍出現(xiàn)
11、紅色判斷出該菌能分解尿素。5(2021山東淄博模擬)乳腺炎和口蹄疫分別是由細(xì)菌和病毒引起的危害奶牛養(yǎng)殖業(yè)的兩種嚴(yán)重疾病。研究者利用生物技術(shù)培育出轉(zhuǎn)乳鐵蛋白肽(抗細(xì)菌)和人干擾素(抗病毒)的雙轉(zhuǎn)基因奶牛新品種。下圖1為基因表達(dá)載體,圖2為培育流程。(1)培育雙轉(zhuǎn)基因奶牛涉及的生物技術(shù)有_(至少寫出2項(xiàng))。(2)牛乳鐵蛋白肽基因必須與_等調(diào)控組件重組在一起,才能在轉(zhuǎn)基因奶牛的乳腺細(xì)胞表達(dá),人干擾素基因則可在全身細(xì)胞表達(dá)。據(jù)圖可知,干擾素基因與_基因可同時(shí)轉(zhuǎn)錄,但在翻譯時(shí),核糖體可識別mRNA上IRES序列的對應(yīng)部分,啟動(dòng)另一種肽鏈的合成,因此用含有新霉素的培養(yǎng)基可篩選出_ _。(3)將基因?qū)肱L?/p>
12、兒成纖維細(xì)胞的方法是_,在導(dǎo)入前,需用_將其處理成單個(gè)細(xì)胞。成纖維細(xì)胞無法直接發(fā)育成個(gè)體,需要去核卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)誘導(dǎo),以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞核的全能性。(4)研究者利用抗原抗體雜交技術(shù)篩選出_(填“牛乳鐵蛋白基因”或“干擾素基因”)成功表達(dá)的胚胎進(jìn)行移植?!敬鸢浮?1)基因工程、早期胚胎培養(yǎng)、核移植、胚胎移植(寫出2項(xiàng)即可)(2)牛乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子新霉素抗性干擾素基因成功表達(dá)的細(xì)胞(3)顯微注射法胰蛋白酶(4)干擾素基因【解析】(1)培育雙轉(zhuǎn)基因奶牛需要通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)將目的基因轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞,據(jù)圖可知,除轉(zhuǎn)基因技術(shù)(基因工程)外,獲得雙轉(zhuǎn)基因奶牛還借助于核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)。(2)構(gòu)
13、建表達(dá)載體時(shí)啟動(dòng)子的位置可決定目的基因在何種細(xì)胞中表達(dá)。牛乳鐵蛋白肽基因必須與牛乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起,才能在轉(zhuǎn)基因奶牛的乳腺細(xì)胞表達(dá)。據(jù)圖可知,干擾素基因與新霉素抗性基因均位于相同的啟動(dòng)子和終止子之間,可同時(shí)轉(zhuǎn)錄,在翻譯時(shí),核糖體可識別mRNA上IRES序列的對應(yīng)部分,啟動(dòng)另一種肽鏈的合成,使新霉素抗性基因得到表達(dá),因此在含有新霉素的培養(yǎng)基可生存的細(xì)胞干擾素基因也已成功表達(dá),因此用含有新霉素的培養(yǎng)基可篩選出干擾素基因成功表達(dá)的細(xì)胞。(3)目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的方法是顯微注射法。導(dǎo)入前對牛胎兒成纖維細(xì)胞用胰蛋白酶處理,可水解細(xì)胞間的膠原纖維,使細(xì)胞分散。將成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核移
14、入去核的卵母細(xì)胞中,卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可誘導(dǎo)已分化的細(xì)胞核恢復(fù)分裂、分化,并最終發(fā)育為新個(gè)體,實(shí)現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞細(xì)胞核的全能性。(4)牛乳鐵蛋白基因在成年牛的乳腺中才能表達(dá),人干擾素基因可在牛全身細(xì)胞表達(dá),因此篩選胚胎時(shí)可利用抗原抗體雜交技術(shù)篩選干擾素基因成功表達(dá)的胚胎進(jìn)行移植。6(2021黑龍江哈爾濱六中期末)將蘇云金桿菌Bt抗蟲蛋白基因?qū)朊藁?xì)胞中,可獲得轉(zhuǎn)基因抗蟲棉,其過程如圖所示:注:質(zhì)粒中“Bt”代表“Bt抗蟲蛋白基因”,“KmR”代表“卡那霉素抗性基因”。(1)過程所需要的酶是_,卡那霉素抗性基因的作用是_ _。(2)過程將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng),旨在讓重組Ti質(zhì)粒上的_轉(zhuǎn)移進(jìn)入
15、棉花細(xì)胞,并整合到棉花細(xì)胞的_上。(3)若要檢測轉(zhuǎn)基因棉花細(xì)胞中Bt抗蟲蛋白基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,可采用_技術(shù);若要鑒定轉(zhuǎn)基因棉花是否被賦予抗蟲特性,需要做_實(shí)驗(yàn)。(4)種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉可以大大減少_的使用,以減輕環(huán)境污染?!敬鸢浮?1)限制酶和DNA連接酶作為標(biāo)記基因,檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞(或供重組DNA的鑒定和選擇)(2)TDNA染色體DNA(3)PCR抗蟲接種(4)農(nóng)藥(或殺蟲劑)【解析】(1)過程為基因表達(dá)載體的構(gòu)建,需要對含有Bt毒蛋白基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切和連接,故需要的工具酶有限制酶和DNA連接酶??敲顾乜剐曰蜃鳛闃?biāo)記基因,其作用是檢測目的基因是否導(dǎo)入受體
16、細(xì)胞,供重組DNA的鑒定和選擇。(2)過程中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)的目的是讓TDNA進(jìn)入棉花細(xì)胞,并整合到棉花細(xì)胞的染色體DNA上。(3)若要檢測轉(zhuǎn)基因棉花細(xì)胞中Bt抗蟲蛋白基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,應(yīng)采用PCR技術(shù);檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因棉花的抗蟲性狀,常用方法是投放棉鈴蟲,做抗蟲接種實(shí)驗(yàn),若棉鈴蟲大量死亡,說明轉(zhuǎn)基因成功。(4)種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉能減少農(nóng)藥的使用,以減輕環(huán)境污染。7(2020云南昆明一模)2020年3月16日,中國科學(xué)家陳薇院士團(tuán)隊(duì)研制的重組新冠疫苗通過臨床研究注冊審評,獲批進(jìn)入臨床試驗(yàn)。重組新冠疫苗的制備流程如圖。回答下列問題。(1)步驟需要_作為原料。步驟需要的工具酶主要是
17、_。(2)被用作載體的Ad5應(yīng)具有的特點(diǎn)是_(答出1點(diǎn)即可)。(3)步驟是_。(4)重組疫苗注入志愿者體內(nèi)后,S蛋白基因指導(dǎo)合成的S蛋白作為_,刺激機(jī)體產(chǎn)生能與之相結(jié)合的抗體,抗體的分泌量可作為檢測疫苗對志愿者免疫效果的指標(biāo)。參加臨床試驗(yàn)的志愿者需要滿足的條件之一是_(填“有”或“無”)新型冠狀病毒感染史,理由是_。(5)為探究疫苗的注射劑量對志愿者產(chǎn)生的免疫效果,需進(jìn)一步試驗(yàn),請寫出試驗(yàn)思路:_?!敬鸢浮?1)脫氧核苷酸Taq DNA聚合酶(2)能自我復(fù)制(或有一個(gè)或多個(gè)切割位點(diǎn)、有標(biāo)記基因位點(diǎn)、對受體細(xì)胞無害)(3)基因表達(dá)載體的構(gòu)建(4)抗原無有新型冠狀病毒感染史的志愿者血清中存在一定量
18、的相應(yīng)抗體,會對試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾(5)給不同組志愿者分別注射不同劑量的疫苗,一段時(shí)間后采集血樣并檢測相應(yīng)抗體的水平【解析】(1)步驟為逆轉(zhuǎn)錄過程,合成的產(chǎn)物是c DNA,因此需要脫氧核苷酸作為原料。步驟為利用PCR技術(shù)擴(kuò)增獲得S蛋白基因的過程,該過程需要的酶是Taq DNA聚合酶(耐高溫的DNA聚合酶)。(2)Ad5作為載體應(yīng)具有的特點(diǎn)是能自我復(fù)制、有一個(gè)或多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)、有標(biāo)記基因、在宿主細(xì)胞中可以存活并表達(dá)、對宿主細(xì)胞無害等。(3)步驟為構(gòu)建目的基因表達(dá)載體的過程,即重組新冠疫苗的過程。(4)重組疫苗注入志愿者體內(nèi)后,S蛋白基因指導(dǎo)合成的S蛋白可作為抗原,刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫過程,使
19、機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生能與之相結(jié)合的抗體,抗體的分泌量可作為檢測疫苗對志愿者免疫效果的指標(biāo)。參加臨床試驗(yàn)的志愿者需要滿足無新型冠狀病毒感染史的條件,即未感染過新冠病毒的志愿者,因?yàn)楦腥具^新冠病毒的人體內(nèi)含有相應(yīng)的記憶細(xì)胞,若注射疫苗,則會出現(xiàn)二次免疫的特征,即體內(nèi)的記憶細(xì)胞會迅速增殖分化,產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞,漿細(xì)胞合成并分泌大量的抗體,從而導(dǎo)致無法檢測出該疫苗的真正效果。(5)實(shí)驗(yàn)?zāi)康臑樘骄恳呙绲淖⑸鋭┝繉χ驹刚弋a(chǎn)生的免疫效果,根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康目芍?,該?shí)驗(yàn)的自變量為疫苗的注射劑量,因變量為抗體產(chǎn)生量,因此設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)如下:將同性別且年齡相當(dāng)?shù)闹驹刚唠S機(jī)分成若干組,然后給不同組別的志愿者注射不同劑量的疫苗,一段
20、時(shí)間之后,檢測志愿者體內(nèi)的抗體產(chǎn)生量,做好記錄并進(jìn)行比較、分析,從而得出結(jié)論。8(2021黑龍江哈爾濱調(diào)研)回答下列問題:(1)干擾素是動(dòng)物體內(nèi)合成的一種糖蛋白,可以用于治療病毒感染和癌癥。建立乳腺生物反應(yīng)器可大量生產(chǎn)干擾素,此生產(chǎn)過程需借助基因工程,常以哺乳動(dòng)物的_為受體細(xì)胞。為了保證干擾素基因只在乳腺細(xì)胞內(nèi)表達(dá),構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)必須在目的基因的前端加入_?;蚬こ讨型灰栽思?xì)胞為受體細(xì)胞生產(chǎn)干擾素,是由于有活性的干擾素需要_(填細(xì)胞器)等的加工。(2)干擾素體外保存相當(dāng)困難,如果將其分子上的一個(gè)半胱氨酸變成絲氨酸,就可在70 條件下保存半年,給廣大患者帶來福音。對蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,應(yīng)該直接
21、對蛋白質(zhì)分子進(jìn)行操作,還是通過對基因的操作來實(shí)現(xiàn)呢?_。原因:_。(3)動(dòng)物基因工程技術(shù)有可能使建立移植器官工廠的設(shè)想成為現(xiàn)實(shí)。實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)的最大難題是免疫排斥??茖W(xué)家利用基因工程的方法對豬的器官進(jìn)行改造以便獲得對人無免疫排斥的可供移植的器官,所使用的方法是_。(4)試管嬰兒技術(shù)解決了部分夫妻不育的難題,它和母親正常懷孕生產(chǎn)過程的相同之處是都以_為發(fā)育起點(diǎn),不同之處在于試管嬰兒是在體外進(jìn)行受精后,在試管中進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng);如果需要“設(shè)計(jì)試管嬰兒”,還可以對胚胎進(jìn)行_,最后選取健康的胚胎進(jìn)行移植,保證生出健康的孩子?!敬鸢浮?1)受精卵乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體(2)通過對基因的操作來
22、實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)都是由基因編碼的,改造了基因也就間接對蛋白質(zhì)進(jìn)行了改造,改造過的基因可以指導(dǎo)新的蛋白質(zhì)的合成;對基因進(jìn)行改造比對蛋白質(zhì)直接進(jìn)行改造要容易操作,難度要小得多(3)向豬基因組導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子,以抑制抗原決定基因的表達(dá)(或設(shè)法除去豬基因組中有關(guān)抗原決定基因),再結(jié)合克隆技術(shù),培育出沒有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官(4)受精卵基因檢測【解析】(1)受精卵可發(fā)育為個(gè)體,培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物時(shí),通常使用受精卵作為受體細(xì)胞。為保證干擾素基因只在乳腺細(xì)胞內(nèi)表達(dá),在構(gòu)建表達(dá)載體時(shí),需在干擾素基因前端加上在乳腺中特異性表達(dá)的乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子。有活性的干擾素需要在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等處加工,原核細(xì)胞中沒有內(nèi)
23、質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,所以一般不選擇原核細(xì)胞作為受體細(xì)胞來生產(chǎn)干擾素。(2)對干擾素進(jìn)行改造,應(yīng)該對干擾素基因進(jìn)行操作來實(shí)現(xiàn),原因:蛋白質(zhì)由基因編碼,蛋白質(zhì)不能復(fù)制,但基因可以遺傳;對基因的改造比對蛋白質(zhì)的改造要容易操作。(3)科學(xué)家利用基因工程方法對豬的器官進(jìn)行改造,常用的方法是在器官供體基因組中導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子,其目的是抑制抗原決定基因的表達(dá)(或設(shè)法去除抗原決定基因),再結(jié)合克隆技術(shù),培育出沒有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官。(4)試管嬰兒技術(shù)指人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精,體外發(fā)育至早期胚胎后,再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。這種技術(shù)和母親正常懷孕生產(chǎn)過程的相同之處是都以受精卵為發(fā)育起點(diǎn)
24、,不同之處在于試管嬰兒是在體外進(jìn)行受精后在試管中進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)的。如果需要“設(shè)計(jì)試管嬰兒”,還可以對胚胎進(jìn)行基因檢測,最后選取健康的胚胎進(jìn)行移植,保證生出健康的孩子。9(2021新疆適應(yīng)檢測)天山雪蓮具有消炎鎮(zhèn)痛、清除自由基等作用,其中具有藥理活性的主要物質(zhì)是黃酮類物質(zhì)。多年來盲目采挖天山雪蓮導(dǎo)致天山雪蓮瀕臨滅絕,研究人員運(yùn)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行雪蓮有效成分的提取,如圖為相關(guān)過程。請回答下列有關(guān)問題:幼苗的葉或莖eq o(,sup7()愈傷組織eq o(,sup7()提取黃酮類物質(zhì)(1)進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí),將雪蓮幼苗的葉或莖切成0.5 cm長的小段作為_,用酒精溶液和次氯酸鈉溶液進(jìn)行_,然后立即
25、用無菌水清洗并用_吸取材料表面的水分。(2)圖中過程表示植物組織培養(yǎng)的_過程。在植物組織培養(yǎng)的過程中,通常需要用植物生長調(diào)節(jié)劑對植物組織的_進(jìn)行誘導(dǎo),使用時(shí)應(yīng)嚴(yán)格控制用量,才能準(zhǔn)確地發(fā)揮“激素杠桿”的作用。(3)利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)也可以實(shí)現(xiàn)雪蓮有效成分的工廠化生產(chǎn)。若選擇大腸桿菌作為工程菌,需用_處理大腸桿菌細(xì)胞,使其處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的狀態(tài),這種細(xì)胞稱為_細(xì)胞。通常選擇大腸桿菌作為基因工程受體細(xì)胞的原因是_?!敬鸢浮?1)外植體消毒無菌濾紙(2)脫分化分裂和分化(3)Ca2感受態(tài)大腸桿菌是原核生物,具有繁殖快、遺傳物質(zhì)相對較少等特點(diǎn)【解析】(1)進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí),離體的組織(雪蓮幼
26、苗的葉或莖切成0.5 cm長的小段)稱為外植體。為了防止感染雜菌,需用酒精溶液和次氯酸鈉溶液進(jìn)行消毒,然后立即用無菌水清洗并用無菌濾紙吸取材料表面的水分。(2)外植體愈傷組織需要經(jīng)過脫分化過程,如圖中所示。在植物組織培養(yǎng)的過程中,植物組織的分裂和分化需要用植物生長調(diào)節(jié)劑進(jìn)行誘導(dǎo)。(3)若選擇大腸桿菌作為工程菌,需用Ca2處理大腸桿菌細(xì)胞,使其處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的狀態(tài),這種細(xì)胞稱為感受態(tài)細(xì)胞。大腸桿菌(原核生物)具有繁殖快、遺傳物質(zhì)相對較少等特點(diǎn),因此通常選擇大腸桿菌作為基因工程受體細(xì)胞。10(2021河南百校聯(lián)盟聯(lián)考)如圖是單克隆抗體制備過程示意圖。請回答下列有關(guān)問題:(1)動(dòng)
27、物細(xì)胞融合是依據(jù)_原理將兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞融合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。(2)單克隆抗體制備需要利用動(dòng)物細(xì)胞融合與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。在體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí),培養(yǎng)液中除了要加入促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素、糖、氨基酸等必需的營養(yǎng)成分,往往還需要加入_等一些天然成分,同時(shí)在含_混合氣體的無菌、恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。(3)圖中操作的目的是_。過程常在化學(xué)誘導(dǎo)劑_的誘導(dǎo)下完成,假設(shè)僅考慮細(xì)胞的兩兩融合,則可形成_種類型的融合細(xì)胞。過程中至少涉及兩次篩選:第一次是利用_進(jìn)行初步篩選,第二次是利用_的方法,最終篩選出既能無限增殖,又能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞?!敬鸢浮?1)細(xì)胞膜的流動(dòng)性(2)(動(dòng)物)血清、血漿9
28、5%空氣和5% CO2(3)刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性B淋巴細(xì)胞聚乙二醇(PEG)3選擇性培養(yǎng)基專一抗體檢測【解析】(1)動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性。(2)用于動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)的培養(yǎng)液除無機(jī)鹽、促生長因子、糖、氨基酸等必需的營養(yǎng)成分外,還需要加入動(dòng)物血清、血漿等天然成分;同時(shí)在含95%空氣和5%CO2混合氣體的無菌、恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。(3)圖中操作是注射特定的抗原,目的是刺激小鼠產(chǎn)生特異性B淋巴細(xì)胞。促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞融合過程常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是聚乙二醇,僅考慮兩個(gè)細(xì)胞的融合,則可形成2種自融細(xì)胞和1種互融細(xì)胞,共3種。過程至少涉及兩次篩選,第一次篩選利用的是選擇性培養(yǎng)基,篩選出的是雜交瘤細(xì)胞,第
29、二次篩選是利用專一抗體檢測的方法,做專一性抗體陽性檢測實(shí)驗(yàn),最終篩選出既能無限增殖又能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。11(2021四川成都診斷)利用細(xì)胞工程技術(shù)可以生產(chǎn)單克隆抗體和“人鼠嵌合抗體”,在人類征服疾病方面展現(xiàn)出誘人的前景?;卮鹣铝袉栴}:(1)將小鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)抗原免疫的B細(xì)胞融合,形成雜交瘤細(xì)胞,動(dòng)物細(xì)胞融合的誘導(dǎo)因素有_、_、電激等。對融合的細(xì)胞需要進(jìn)行篩選、克隆化培養(yǎng)和_,進(jìn)而獲得可以產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞群體。(2)臨床發(fā)現(xiàn),利用上述方法產(chǎn)生的抗體具有外源性,會被人體免疫系統(tǒng)清除。科學(xué)家通過分析抗體的結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn),抗體由“C區(qū)”和“V區(qū)”構(gòu)成,引起人體免疫反應(yīng)的主要是“C區(qū)”??茖W(xué)家通過“
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