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實(shí)驗(yàn)7 細(xì)胞內(nèi)過氧化物酶的顯示聯(lián)苯胺反應(yīng)1【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹空莆章?lián)苯胺反應(yīng)法顯示細(xì)胞內(nèi)過氧化物酶的原理和方法。 2過氧化物酶 - 定義 利用過氧化氫作為電子受體來催化底物氧化作用的酶。 3【實(shí)驗(yàn)原理】細(xì)胞內(nèi)的過氧化物酶可以催化過氧化氫氧化聯(lián)苯胺成藍(lán)色或者棕色產(chǎn)物,藍(lán)色為中間產(chǎn)物聯(lián)苯胺藍(lán),很不穩(wěn)定,可自然轉(zhuǎn)變?yōu)樽厣穆?lián)苯胺腙,通過產(chǎn)物顏色間接顯示出細(xì)胞內(nèi)過氧化物酶的分布。4【實(shí)驗(yàn)儀器、材料和試劑】光學(xué)顯微鏡;小白鼠、剪刀、鑷子、載玻片、牙簽、吸管。0.5% CuSO4(0.5克CuSO4溶于100ml蒸餾水中)、聯(lián)苯胺混合液(0.1克聯(lián)苯胺在研缽中加少許蒸餾水研成細(xì)漿,加入100ml蒸餾水,過濾后加入2滴3%雙氧水,放棕色瓶中備用)、1%番紅1克番紅O(Safranine O)染料溶于100ml蒸餾水中。5【實(shí)驗(yàn)步驟】用頸椎脫臼法處死小鼠,剪開大腿上的皮膚和肌肉,取出股骨;剪斷或者折斷股骨,用牙簽挑取骨髓,放置于載玻片上制成涂片,晾干;將涂片上滴加幾滴0.5% CuSO4,固定1分鐘;傾去CuSO4溶液,滴加0.1%聯(lián)苯胺混合液,染色6分鐘;用自來水或蒸餾水沖洗,滴加1%番紅染液(染色細(xì)胞輪廓),染色1分鐘;用自來水或者蒸餾水沖洗,空氣中晾干,顯微鏡下觀察。6頸椎脫臼法處死小鼠7【觀察與結(jié)果】骨髓細(xì)胞

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