高脂血癥對小鼠睪丸超微結(jié)構(gòu)的影響_第1頁
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文檔簡介

1、高脂血癥對小鼠睪丸超微結(jié)構(gòu)的影響前 言隨著環(huán)境及生活習(xí)慣的改變,男性不育癥的發(fā)病率正逐年上升,而且病因復(fù)雜。迄今,60%75%的患者原因不明。高膽固醇血癥會影響睪丸功能,睪丸內(nèi)精子細(xì)胞數(shù)量減少;高脂血癥很可能是男性不育癥的病因之一 。用高脂高膽固醇喂養(yǎng)的雄性小鼠,使雌性小鼠受孕的能力下降,胚胎植入和生育率也有降低。本實驗通過高脂飼料喂養(yǎng)apolipoprotein E(Apo E) 基因敲除小鼠,觀察其睪丸超微結(jié)構(gòu)的變化特點,為探討高脂血癥對男性生殖功能的影響提供形態(tài)學(xué)依據(jù)。 目 的材料與方法1.動物分組(12只C57BL/6J雄性小鼠 )對照組:6只野生型小鼠實驗組:6只Apo E基因敲除小

2、鼠2.高脂血癥模型的建立實驗組小鼠喂飼高膽固醇飼料(膽固醇0.5%,豬油10%,蛋黃粉10%,維持料59.5%,蔗糖20%),共12周;對照組小鼠喂飼普通飼料,喂養(yǎng)12周。3.透射電鏡標(biāo)本制備 飼養(yǎng)12周后,將小鼠腹腔打開,取出睪丸組織,用雙面刀片把樣品切割成1mm3小塊,置于4的2.5%戊二醛溶液中固定過夜,常規(guī)沖洗后以l%鋨酸后固定。在沖洗后用50%、70%、90%和100%乙醇依次脫水,環(huán)氧樹脂包埋,超薄切片,最后用醋酸鈾及檸檬酸鉛雙重染色,在日產(chǎn)JEM-1230型透射電鏡下,觀察小鼠睪丸組織的超微結(jié)構(gòu)變化特點,并攝片。 1.血脂: 與正常組比較,高脂血癥組血脂明顯升高。結(jié) 果組 別CH

3、OLDD-C對照組實驗組2.390.1534.861.30*0.540.0312.283.59*表1 57BL/6J小鼠血清中膽固醇和低密度脂蛋白濃度 (s, mmol/L)與正常組比較:*p0.052.1生精細(xì)胞 圖1 對照組生精細(xì)胞核()、線粒體()及粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)()結(jié)構(gòu)正常 15 000 圖2 實驗組生精細(xì)胞線粒體空泡變性()、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕度擴(kuò)張()及異常結(jié)構(gòu)()15 000 2.電鏡:實驗組小鼠睪丸內(nèi)生精細(xì)胞、支持細(xì)胞、睪丸間質(zhì)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等超微結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)一系列病理變化。2.2支持細(xì)胞 圖3 對照組支持細(xì)胞核()、線粒體()及粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)()結(jié)構(gòu)正常 15 000 圖4 實驗組支持細(xì)胞核()、線粒體空泡變性()、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張()、核膜外側(cè)致密沉淀物()及大空泡() 15 000 2.3生精小管基膜 圖5 對照組生精小管基膜() 20 000 圖6 實驗組生精小管基膜厚薄不均,致密層明顯增厚() 20 000 2.4睪丸間質(zhì)細(xì)胞 圖7 對照組睪丸間質(zhì)細(xì)胞核()、線粒體()、滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)()及脂滴() 15 000 圖8 實驗組小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞核()、線粒體減少,空泡狀()及粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張()15 000 2.5毛細(xì)血管 圖9 對照組睪

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