專題2微生物的培養(yǎng)和應用(52張)課件

1、第1頁，共52頁。 一、微生物的實驗室培養(yǎng)1.培養(yǎng)基(1)種類:按培養(yǎng)基的物理性質分為:液體培養(yǎng)基:配制成的液體狀態(tài)的基質,一般用于生產。固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑(如瓊脂),配制成的固體狀態(tài)的基質,瓊脂固體培養(yǎng)基是實驗室中最常用的培養(yǎng)基之一。第2頁，共52頁。(2)培養(yǎng)基配方及營養(yǎng)要素基本營養(yǎng)要素:各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽。此外還要滿足不同微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的需求。固體培養(yǎng)基適合于分離、鑒定微生物,并且對微生物的計數(shù)也適合用固體培養(yǎng)基。但液體培養(yǎng)基適合利用微生物進行發(fā)酵,因為液體狀態(tài)下微生物與營養(yǎng)物質的接觸面積大,微生物代謝活動較強。2.無菌技

2、術(1)消毒和滅菌的區(qū)別第3頁，共52頁。 條件結果常用的方法消毒較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學藥物消毒法滅菌強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物,包括芽孢和孢子灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌第4頁，共52頁。酒精消毒時,70%的酒精殺菌效果最好,原因是:濃度過高,使菌體表面蛋白質凝固成一層保護膜,乙醇分子不能滲入其中;濃度過低,殺菌力減弱。(2)無菌技術具體操作對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進行清潔和消毒。將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌。為避免周圍環(huán)境中微生物的污染,實驗

3、操作應在酒精燈火焰附近進第5頁，共52頁。行。實驗操作時應避免已經滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸.3.純化大腸桿菌以及菌種的保藏(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基:計算、稱量、熔化、滅菌、倒平板。(2)純化大腸桿菌原理:在培養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成單個細胞,使其長成單個的菌落,這個菌落就是一個純化的細菌菌落。第6頁，共52頁。方法:平板劃線法、稀釋涂布平板法。(3)菌種的保藏短期保存:固體斜面培養(yǎng)基上4 保存,菌種易被污染或產生變異。長期保存:-20 甘油管在冷凍箱中保藏。平板劃線法和稀釋涂布平板法對大腸桿菌的純化的比較(1)平板劃線法中由于劃線時,每次從上一次劃線的末端開始,線條末端細菌

4、的數(shù)目比線條起始處要少,能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。第7頁，共52頁。(2)稀釋涂布平板法中,由于將菌液進行了一系列的梯度稀釋和涂布培養(yǎng),聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,形成單個菌落。 下面是對大腸桿菌進行數(shù)量測定的實驗,請回答有關問題。(1)制備稀釋倍數(shù)為102、103、104、105、106的系列稀釋液。(2)為了得到更加準確的結果,選用適宜的方法接種樣品:下圖是利用法進行微生物接種,把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面,為達到這一目的,操作上應注意。第8頁，共52頁。 (3)適宜溫度下培養(yǎng)。結果分析:第9頁，共52頁。一同學在稀

5、釋倍數(shù)為105的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為32.4個,那么每毫升樣品中的細菌數(shù)是(接種時所用稀釋液的體積為0.1 mL)個。用這種方法所得的數(shù)量比實際活菌數(shù)量要,因為。(4)在微生物培養(yǎng)操作過程中,為防止雜菌污染,操作者的雙手需要進行清洗和;已滅菌的材料用具應避免。(5)培養(yǎng)大腸桿菌時,在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是。第10頁，共52頁。解析:(2)題圖為平板劃線法分散培養(yǎng)基表面的菌種,操作時應注意保持無菌,第二次及以后每次劃線前接種環(huán)要灼燒,冷卻后從上一區(qū)劃線末端開始劃,首尾區(qū)不重疊以便于分散菌種。(3)根據(jù)公式菌株數(shù)=M=105=324105=3

6、.24107個。由于每個菌落可能是由兩個或多個細胞一起形成的,所以此法所得的活菌數(shù)比實際活菌數(shù)要少。(4)操作者雙手用酒精消毒;已滅菌的材料應避免與周圍物品接觸,防止再次被污染。第11頁，共52頁。(5)接種前檢測培養(yǎng)基是否被污染可將未接種的培養(yǎng)基倒置在適宜溫度下培養(yǎng),觀察培養(yǎng)基是否有菌落出現(xiàn),若無則未被污染,若有則已被污染。答案:(2)平板劃線第二次及以后每次劃線前接種環(huán)要灼燒,冷卻后從上一區(qū)劃線末端開始劃,首尾區(qū)不重疊(3)3.24107少當兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的是一個菌落(4)消毒與周圍的物品接觸(5)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下倒置培養(yǎng)適宜的時間,觀察培養(yǎng)基上是否有

7、菌落產生第12頁，共52頁。二、土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)1.選擇合適的培養(yǎng)基(1)根據(jù)培養(yǎng)基的用途可分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。培養(yǎng)基種類特點用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學物質,以抑制不需要的微生物的生長,促進所需要的微生物的生長培養(yǎng)、分離出特定微生物(如培養(yǎng)酵母菌和霉菌,可在培養(yǎng)基中加入青霉素;以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基用于分離分解尿素的細菌)第13頁，共52頁。鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點,在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品鑒別不同種類的微生物(如可用伊紅美藍培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌,若有,菌落呈深紫色,并帶有金屬光澤)第14頁，共52頁。(2)分離分解尿素的細

8、菌的培養(yǎng)基即為選擇培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中的氮源只有尿素,理論上只有能合成脲酶的微生物才能在上面生長。2.統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法(1)顯微鏡直接計數(shù)法原理:利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板,在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數(shù)量。方法:用計數(shù)板計數(shù)。缺點:不能區(qū)分死菌與活菌。(2)間接計數(shù)法(活菌計數(shù)法)第15頁，共52頁。原理:當樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的一個活菌,通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含有多少活菌。操作a.設置重復組,增強實驗的說服力與準確性。b.為了保證結果準確,一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進行計數(shù)。計算公式:每克樣品中的菌株數(shù)=

9、C/VM,其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù),V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL),M代表稀釋倍數(shù)。第16頁，共52頁。3.細菌分離與計數(shù)的實驗流程土壤取樣樣品稀釋取樣涂布微生物培養(yǎng)觀察并記錄結果細菌計數(shù)判斷培養(yǎng)基中是否有雜菌污染,需將未接種的培養(yǎng)基同時進行培養(yǎng);判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用,需設立牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行接種后培養(yǎng),觀察兩種培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目,進行對比得出結論。 尿素是一種重要的農業(yè)肥料,但若不經細菌的分解,就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多,下列是從土壤中分離分解尿素細菌的有關實驗,請分析回答問題。第17頁，共52頁。(1)如果要對培

10、養(yǎng)的菌落進行純化,在培養(yǎng)基上劃線操作中,操作的第一步及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán),目的是對接種環(huán)進行.(2)下表是一種培養(yǎng)基配方:制備培養(yǎng)基的操作步驟是。(填選項前的字母)a.倒平板b.計算c.熔化d.稱量e.滅菌成分KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O葡萄糖尿素瓊脂含量1.4 g2.1 g0.2 g10.0 g1.0 g15.0 g第18頁，共52頁。A.abcdeB.ebdcaC.bdcaeD.bdcea該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。(填選項前的字母,多選)。A.液體B.固體C.鑒定D.選擇E.天然使用該培養(yǎng)基的目的是。在培養(yǎng)基中加入指示劑,可初步鑒定出該種細菌能否分解尿素。(3)在進行分離

11、分解尿素的細菌實驗時,A同學從培養(yǎng)基上篩選出大約第19頁，共52頁。150個菌落,而其他同學只選擇出大約50個菌落。A同學的實驗結果產生的原因可能有。(填選項前的字母,多選)A.由于土樣不同B.由于培養(yǎng)基被污染C.由于操作失誤D.沒有設置對照解析:(1)接種前要對接種環(huán)進行灼燒滅菌,殺死接種環(huán)上殘留的細菌.(2)制備培養(yǎng)基的基本步驟是計算稱量熔化滅菌倒平板。從成分上看,該培養(yǎng)基中尿素是唯一的氮源,所以屬于選擇培養(yǎng)基,目的是篩選能分解尿素的細菌。因為含有瓊脂,所以該培養(yǎng)基又屬于固體培養(yǎng)基。解析第20頁，共52頁。(3)該同學的培養(yǎng)基中菌落的數(shù)目明顯多于其他同學,可能的原因是培養(yǎng)基被污染,采用的樣

12、土中細菌較多,或者操作有誤(如接種時沒有將菌液搖勻等)。答案:(1)滅菌(2)DBD篩選出能分解尿素的細菌酚紅(3) ABC三、分解纖維素的微生物的分離1.纖維素酶是一種復合酶,它包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。第21頁，共52頁。2.纖維素分解菌的篩選原理(1)剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應。(2)纖維素分解菌能產生纖維素酶分解纖維素,從而使菌落周圍形成透明圈。3.土壤中纖維素分解菌的篩選(1)方案土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產生透明圈的菌落。

13、第22頁，共52頁。(2)選擇培養(yǎng)的目的:增加纖維素分解菌的濃度,確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物。(3)涉及的微生物技術主要有:培養(yǎng)基的制作、無菌操作、稀釋涂布平板法、選擇培養(yǎng)基的作用、土壤取樣等。(1)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中無凝固劑,利用液體培養(yǎng)基以增加纖維素分解菌的濃度。(2)選擇培養(yǎng)基以纖維素作為碳源和能源,其他絕大多數(shù)微生物不能正常生長;鑒別培養(yǎng)基含瓊脂,故為固體培養(yǎng)基,剛果紅染色法就是應用的此培養(yǎng)基。第23頁，共52頁。(3)流程中的“選擇培養(yǎng)”是為了擴大培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量,具體需要與否要看土樣中微生物的數(shù)量。 如圖為分離并統(tǒng)計分解纖維素的微生物的實驗

14、流程,據(jù)此回答有關問題。土壤取樣梯度稀釋將樣品接種到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產生透第24頁，共52頁。明圈的菌落,統(tǒng)計并計算每克樣品中的細菌數(shù)(1)要從富含纖維素的環(huán)境中分離纖維素分解菌,從高溫熱泉中尋找耐熱菌,這說明。(2)某同學根據(jù)需要,配制了纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基如下,整個實驗過程嚴格執(zhí)行無菌操作。第25頁，共52頁。纖維素粉NaNO3Na2HPO47H2OKH2PO45 g1 g1.2 g0.9 gMgSO47H2OKCl酵母膏水解酪素0.5 g0.5 g適量適量如果將其中的纖維素粉換成,菌落數(shù),即可說明選擇培養(yǎng)基的作用。(3)接種微生物最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法,本

15、實驗宜采用法,原因是。第26頁，共52頁。解析:(1)因為纖維素分解菌與耐熱菌有不同的生活習性,生活在不同的環(huán)境中,故要根據(jù)目的菌株對生存環(huán)境的要求,到相應的環(huán)境中去尋找。(2)因為葡萄糖是纖維素水解、能被微生物直接利用的有機小分子物質,所以如果將其中的纖維素粉換成葡萄糖,纖維素分解菌及其他細菌會生長繁殖得更快,故菌落數(shù)明顯多于選擇培養(yǎng)基。(3)因為稀釋涂布平板法要將菌液進行一系列的梯度稀釋,故該法可根據(jù)稀釋體積計算每克樣品中的細菌數(shù),而平板劃線法則不能這樣,所以本實驗宜采用稀釋涂布平板法。第27頁，共52頁。答案:(1)根據(jù)目的菌株對生存環(huán)境的要求,到相應的環(huán)境中去尋找(2)葡萄糖明顯多于選

16、擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)(3)稀釋涂布平板平板劃線法難以根據(jù)稀釋體積計算每克樣品中的細菌數(shù)第28頁，共52頁。1.(2012銀川模擬)從自然界微生物中篩選某菌種的一般步驟是:采集菌樣富集培養(yǎng)純種分離性能測定。(1)不同微生物的生存環(huán)境不同,獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣,然后再按一定的方法分離、純化。培養(yǎng)嗜鹽菌的菌樣應從環(huán)境中采集。(2)富集培養(yǎng)指創(chuàng)設僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件,使其群落中的數(shù)量大大增加,從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對產耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應選擇的培養(yǎng)基,并在條件下培養(yǎng)。第29頁，共52頁。(3)接種前要對培養(yǎng)基進行處理。在整個微生物的分離和培

17、養(yǎng)中,一定要注意在條件下進行。(4)如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖,請分析接種的具體方法。 獲得圖A效果的接種方法是,圖B效果的接種方法是。一同學在純化土壤中的細菌時,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上第30頁，共52頁。(5)如果探究溫度對纖維素酶活性的影響,自變量是,應該保的菌落連成一片,最可能的原因是,應當怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象?。持(至少答兩項)等不變。解析:(1)篩選菌種應從適于目的菌種生長、繁殖的環(huán)境中尋找,故培養(yǎng)嗜鹽菌應從高鹽環(huán)境中采集。(2)富集培養(yǎng)時培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件應能促進目的菌的生長、繁殖。(3)微生物的分離及培養(yǎng)中必須保證無菌,包括培養(yǎng)基的滅菌和操作過程的滅菌等。解

18、析第31頁，共52頁。(4)純化培養(yǎng)中接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法,前一種方法形成的菌落分布較均勻,后一種方法形成的菌落分布不均勻,先劃線的部分菌落密集甚至相連,后劃線的部分菌落分布稀疏。(5)探究溫度對酶活性的影響時,溫度為自變量,酶活性為因變量,其他凡能影響酶活性的變量如底物和酶的用量、pH、反應時間等均為無關變量。答案:(1)海灘等高鹽(2)以淀粉為唯一碳源高溫第32頁，共52頁。(3)高壓蒸汽滅菌無菌(4)稀釋涂布平板法平板劃線法菌液濃度過高增大稀釋倍數(shù)(或培養(yǎng)過程被雜菌污染嚴格無菌操作;或用接種環(huán)劃下一區(qū)域前接種環(huán)沒有滅菌每劃一個新區(qū)域前都要對接種環(huán)進行滅菌處理)(原因與操作

19、要對應)(5)溫度纖維素的量與濃度、反應時間、pH第33頁，共52頁。2.現(xiàn)在大力提倡無紙化辦公,但是每年仍然不可避免要產生大量的廢紙,其主要成分是木質纖維,人類正努力將其轉化為一種新的資源乙醇。下圖是工業(yè)上由微生物利用纖維素生產乙醇的基本工藝流程,請回答相關問題。第34頁，共52頁。 (1)自然界中環(huán)節(jié)需要的微生物大多分布在的環(huán)境中。將從土壤中獲得的微生物培養(yǎng)在以為碳源、并加入的培養(yǎng)基上篩選周圍有的菌落。(2)如上所述的篩選中獲得了三個菌落,對它們分別培養(yǎng),并完成環(huán)節(jié),且三種等量酶液中酶蛋白濃度相同,則你認為三種酶液的活性(填“一定相同”“不一定相同”或“一定不相同”),可以通過進行定量測定

20、。第35頁，共52頁。(3)根據(jù)測定結果,環(huán)節(jié)常選擇木霉,則中獲得的酶是酶。該酶至少包括三個組分。(4)生產中可以滿足環(huán)節(jié)的常見菌種是,為了確保獲得產物乙醇,環(huán)節(jié)要注意,過程要注意避免。(5)該技術雖然有廣闊的前景,但存在酶的成本高等問題,為了降低成本主要從以下幾方面入手改進該過程。首先要通過等技術手段對產酶微生物改造,提高酶的產量。其次,可利用等技術使酶能夠重復利用。第36頁，共52頁。解析:(1)題圖中培養(yǎng)產纖維素的酶,需要的微生物大多分布在富含纖維素的環(huán)境中。在剛果紅指示劑的培養(yǎng)基中篩選周圍有透明圈的菌落,即可獲得要分離的微生物。(2)酶的活性受多種因素的影響,等量的酶液中,即使酶蛋白濃

21、度相同,酶的活性不一定相同,可以用纖維素酶分解纖維素后產生的葡萄糖進行定量分析。(3)木霉中獲得的酶主要是纖維素酶,纖維素酶至少包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。第37頁，共52頁。(4)發(fā)酵生產乙醇離不開酵母菌,同時要提供無氧環(huán)境,保證酵母菌的無氧呼吸。(5)通過基因突變或基因工程等技術手段改造產酶微生物,提高酶的產量;同時可利用固定化酶等技術使酶重復利用。答案:(1)富含纖維素(其他答案合理也可,如落葉較多等)纖維素剛果紅透明圈(2)不一定相同對纖維素酶分解纖維素后所產生的葡萄糖(3)纖維素C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶(4)酵母菌發(fā)酵裝置密閉(或保證無氧條件等)雜菌污染(5)基因工程(基因突變

22、)固定化酶第38頁，共52頁。3.(密碼改編)氯苯化合物是重要的有機化工原料,因其不易降解,會污染環(huán)境。某研究小組依照下列實驗方案(圖1)篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌,培養(yǎng)基配方如下表。圖1第39頁，共52頁。表培養(yǎng)基的組成液體培養(yǎng)基蛋白胨牛肉膏氯苯氯化鈉硝酸銨無機鹽(無碳)蒸餾水號10 g5 g5 mg5 g1 L號50 mg5 g3 g適量1 L號2080 mg5 g3 g適量1 L第40頁，共52頁。(1)配制號固體培養(yǎng)基時,除添加號液體培養(yǎng)基成分外,還應添加1%的。(2)培養(yǎng)基配制時,滅菌與調pH的先后順序是。(3)從用途上來說,號培養(yǎng)基和號培養(yǎng)基分別屬于培養(yǎng)基和培養(yǎng)基。在號培

23、養(yǎng)基中,為SP1菌提供氮源的成分是。(4)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的號培養(yǎng)液中培養(yǎng),得到生長曲線(如圖2)。從圖2可知,SP1菌在培養(yǎng)條件下最早停止生長,其原因是。第41頁，共52頁。 圖2解析:(1)固體培養(yǎng)基必須含有適量的瓊脂。(2)配制培養(yǎng)基時應先調pH后滅菌。(3)號培養(yǎng)基是為了獲得更多的菌株,屬于通用培養(yǎng)基,號培養(yǎng)基是為選擇出SP1菌株,屬于選擇培養(yǎng)基,號培養(yǎng)基成分中含N物質為硝酸銨,由它為SP1菌株提供氮源。(4)SP1菌株以氯苯為解析第42頁，共52頁。碳源,當氯苯耗盡時,菌株因缺少碳源而不能繼續(xù)生存,故氯苯含量越少,SP1菌株越早停止生長。答案:(1)瓊脂(2)先調pH,

24、后滅菌(3)通用選擇硝酸銨(4)20 mg/L氯苯碳源最早耗盡第43頁，共52頁。4.(2012河南焦作)如圖表示為平板劃線法分離純化細菌示意圖。根據(jù)所學生物學知識,回答下列問題。 (1)微生物所需的營養(yǎng)成分包括、水和無機鹽。(2)培養(yǎng)微生物時,除考慮微生物生長所需的營養(yǎng)外,還要考慮微生物生長所需的溫度、以及是否需要O2等。第44頁，共52頁。(3)對培養(yǎng)基進行滅菌時,多采用法,而對接種環(huán)或涂布器滅菌時則用法。(4)平板劃線時,為保證每次劃線都從上次劃線末端的微生物濃度開始,所以每次劃線前都要,平板劃線結束后,最后一次劃的線不能與第一次劃的線。(5)脲酶可以將尿素分解為NH3,從而使尿素溶液p

25、H升高,這可用試劑來檢驗。用纖維素做唯一碳源的培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物,得到的纖維素分解菌中可能還混雜有(生物)。第45頁，共52頁。(6)抗生素可以抑制肽聚糖合成,從而可以抑制多數(shù)原核生物繁殖。實驗室現(xiàn)有酵母菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌三種微生物混雜生長的固體培養(yǎng)基,已知大腸桿菌菌落遇伊紅美藍試劑變?yōu)樽仙?并帶有金屬光澤;金黃色葡萄球菌耐高濃度食鹽水,菌落為金黃色;酵母菌細胞壁成分主要為幾丁質,營養(yǎng)條件好,氧氣充足,顯微鏡下可見典型的出芽生殖?，F(xiàn)在請你設計一個合理的實驗方案,從一個培養(yǎng)基中,將三種微生物一次分離開來。(所需試劑可自選)實驗方案:。第46頁，共52頁。解析:本題考查多為識記內容,如培養(yǎng)

26、基的成分、微生物生長條件、常用的滅菌方法等,即前三小題。(4)考查平板劃線法的操作方法,如果劃線相重合則不能分離出純種。(5)酚酞可檢驗堿性溶液,用纖維素做唯一碳源的培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物,得到纖維素分解菌,但自養(yǎng)微生物也能生存,需要進一步分離。(6)根據(jù)條件可以將不同菌分離開來,見答案。答案:(1)碳源氮源(2)pH(3)高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌第47頁，共52頁。(4)對接種環(huán)灼燒滅菌相交(相接、相連、交叉等)(5)酚酞自養(yǎng)微生物(硝化細菌)(6)實驗方案:根據(jù)菌落顏色,首先分離出金黃色葡萄球菌;然后向培養(yǎng)基中加入伊紅美藍試劑,將變?yōu)樽仙?帶有金屬光澤的菌落分離出來,得到大腸桿菌;然后加入非磺胺類抗生素如青霉素,將培養(yǎng)基中