穩(wěn)心顆粒對(duì)心力衰竭兔心肌細(xì)胞鈣調(diào)控蛋白的影響

1、穩(wěn)心顆粒對(duì)心力衰竭兔心肌細(xì)胞鈣調(diào)控蛋白的影響研究背景心肌細(xì)胞收縮/舒張功能與心肌細(xì)胞內(nèi)鈣循環(huán)密切相關(guān) 心衰時(shí)心肌細(xì)胞鈣離子循環(huán)異常是心肌舒縮功能障礙的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ) 穩(wěn)心顆?？剐穆墒Сr(shí)能改善心衰患者和動(dòng)物的心功能穩(wěn)心顆粒與西藥聯(lián)合應(yīng)用治療CHF具有協(xié)同增強(qiáng)心功能的作用Bers (2002) Nature 415: 198-205鈣 循 環(huán)通過左心容量和壓力超負(fù)荷方法制作家兔心衰模型及穩(wěn)心顆粒對(duì)心衰家兔心功能的作用探討穩(wěn)心顆粒對(duì)心衰時(shí)鈣調(diào)控蛋白的影響研究目的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 新西蘭大耳白兔，3月齡，雌雄不拘，體 重2.03.0 kg 分組 假手術(shù)組 （shame） 8只 假手術(shù)穩(wěn)心顆粒組 (HF-drug

2、) 8只 心衰組 (HF) 10只 心衰穩(wěn)心顆粒組 (HF-drug) 10只 材料和方法主要器材 多道生理記錄儀 （中國四川錦江通用實(shí)業(yè)） 超聲心動(dòng)圖儀 （ Vivid 7，美國GE公司） 基因擴(kuò)增儀 （Bioneer，EDC-810) DNA電泳儀 （ Bio-RAD ，Sub-Cell Model 96） 酶標(biāo)儀 （PerKinElmer，Wallac 1420 ） 凝膠成像儀 （ Bio-RAD，Universal Hood ） 材料和方法材料和方法主要藥品和試劑 穩(wěn)心顆粒 （山東步長(zhǎng)制藥） 肝素鈉注射液 （天津生物化學(xué)制藥） 鈣調(diào)控蛋白引物 （Invitrogen Biot） 鈣調(diào)控

3、蛋白一抗 （abcam公司） 組織總蛋白提取試劑盒 （谷歌生物公司） 心衰動(dòng)物模型制作 新西蘭大耳兔主動(dòng)脈瓣關(guān)閉不全腹主動(dòng)脈縮窄EF 1.20 cm脈壓增大50%超聲資料左室舒張末內(nèi)徑 LVEDD左室收縮末內(nèi)徑 LVESD左室舒張末容積 LVEDV左室收縮末容積 LVESV左室射血分?jǐn)?shù) LVEF左室短軸縮短分?jǐn)?shù) LVFS檢測(cè)指標(biāo)RT-PCR和Western blot肌漿網(wǎng)鈣泵 SERCA2a雷諾定受體 RyR2受磷蛋白 PLB鈉鈣交換體 NCX基因和蛋白表達(dá)情況檢測(cè)指標(biāo)計(jì)量數(shù)據(jù)均以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差表示采用單因素方差分析所有數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0分析P0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義統(tǒng)計(jì)學(xué)處理穩(wěn)心顆粒改善心衰

4、家兔的心功能LVEDD (mm)1.300.13 1.310.10 1.840.08 1.550.07LVESD (mm)0.780.07 0.810.08 1.540.12 1.050.07LVEDV (ml)4.181.07 4.080.80 10.341.19 6.680.79 LVESV (ml)1.060.27 1.160.31 5.900.75 3.040.51 LVEF (%)74.472.5074.054.19 44.392.04 55.152.28 LV FS (%)39.722.23 39.493.63 20.391.01 26.351.28 與假手術(shù)組相比， P0.05；

5、與心衰組相比， P0.05假手術(shù)組（n=8）假手術(shù)穩(wěn)心顆粒組 （n=8） 心衰組 （n=7） 心衰穩(wěn)心顆粒組 （n=7） 結(jié) 果 穩(wěn)心顆粒能提高心衰家兔的 LVEF 和 LVFS *P0.05, 與假手術(shù)組比較，P0.05,與 心衰組比較 結(jié) 果心衰組RyR2mRNA表達(dá)降低,穩(wěn)心顆粒對(duì) RyR2表達(dá)無影響RyR2-actin 1. shame 2. shame-drug 3 .HF 4. HF-drug149bp184bp 1 2 3 4 1 2 3 4*P0.05 結(jié) 果心衰組SERCA2a表達(dá)降低，心衰穩(wěn)心顆粒組 SERCA2a表達(dá)水平上調(diào)143bp184bpSERCA2a-actin1

6、. shame 2. shame-drug 3 .HF 4. HF-drug*P0.05, 與假手術(shù)組比較，P0.05 結(jié) 果心衰組NCXmRNA和蛋白水平表達(dá)降低 穩(wěn)心顆粒對(duì)NCX表達(dá)無影響 133bp184bpNCX-actin*P0.05 vs 假手術(shù)組1. shame 2. shame-drug 3. HF 4. HF-drug 1 2 3 4 1 2 3 4結(jié) 果本研究采用主動(dòng)脈瓣返流聯(lián)合腹主動(dòng)脈縮窄致左室壓力和容量超負(fù)荷的方法成功制作家兔心衰模型 穩(wěn)心顆?？稍黾尤萘亢蛪毫Τ?fù)荷心衰兔的LVEF和LVFS，改善左室收縮功能結(jié) 論結(jié) 論 穩(wěn)心顆粒改善心衰心功能的機(jī)制 SERCA2a 表達(dá) SR攝鈣能力SR鈣容量 鈣瞬變 穩(wěn)心顆粒 收縮功能舒張期Ca2+濃度舒張功能胞漿Ca2+清除率PLB表達(dá)水平不變SERCA表達(dá)水平 PLB / SERCA2a 水平比值 PLB 對(duì)SERCA2a 的抑制作用SERCA2a功能 穩(wěn)心顆粒改善心衰心功能的機(jī)制結(jié) 論心衰組 NCXmRNA 和蛋白表達(dá)減少，可能與心衰分期有關(guān)，相關(guān)的機(jī)制還需要進(jìn)一步研究 。結(jié) 論穩(wěn)心顆?？梢欢ǔ潭壬细纳迫萘亢蛪毫Τ?fù)合所致家兔心衰