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1、藥物對離體平滑肌受體的作用適用對象適用對象適用對象適用對象中藥學(xué)、藥學(xué)、藥物制劑專業(yè)實驗?zāi)康模豪猛檬改c或上段空腸,觀察乙酰膽堿,阿托品與氯化鋇對離體兔腸平滑肌的作用。實驗原理:離體兔腸平滑肌在適當(dāng)?shù)臈l件下可以保持較長時間的自動節(jié)律性收縮。根據(jù)受體在腸道平滑肌中分布的特點,可觀察藥物的作用,并可借助工具藥分析其作用原理。儀器設(shè)備:(動物與藥品試劑)1、動物:家兔2.5kg左右2、藥品與試劑:0.001%氯化乙酰膽堿溶液,0.1%硝酸毛果蕓香堿溶液0.1%硫酸阿品托溶液0.05%溴化新斯的明溶液1%氯化鋇溶液臺氏液3、儀器設(shè)備:BL-420E生物機(jī)能實驗系統(tǒng),力換能器,HW-300型恒溫平滑

2、肌槽,多用電源插座,鐵支架,雙凹夾,L型鉤,培養(yǎng)皿,縫線,1ML注射器,10ML注射器,手術(shù)器械一套。四、相關(guān)知識1、由于腸肌上分布有M受體,當(dāng)向營養(yǎng)液加入Ach(N、M受體激動藥、阿品托(M受體阻斷藥)、毛果蕓香堿(M受體激動藥)、新斯的明(抗膽堿酯酶藥)等藥物時,可與相應(yīng)的受體結(jié)合,激動或阻斷M受體,引起腸肌收縮或松弛。2、氯化鋇是一種非受體作用的有毒化合物,對腸肌有直接的興奮收縮作用,常用于藥理實驗中、五、實驗步驟(一)儀器連接1、打開HW300型恒溫平滑肌,恒溫37-38攝氏度。2、啟動電腦,確認(rèn)USB接口已經(jīng)連通,打開BL420E生物機(jī)能實驗系統(tǒng)軟件,在“實驗項目”下拉菜單中選擇“消

3、化道平滑肌活動”,或在“輸入信號”下拉菜單中選擇“1通道”的“力”,在“1通道”連接力換能器。(二)制備標(biāo)本取家兔1只,擊頭致死,剖腹,取出空腸或十二指腸,放入臺氏液的器皿中,用吸管吸取臺氏液將腸空物沖凈,剝離腸系膜。將腸管煎成2cm的腸段備用。腸管兩端對角穿線,將其安放在有臺氏液的平滑肌槽中,上端連接拉力換能器,下端系于L型鉤上,通入空氣供氧。(三)藥物對離體兔腸平滑肌的作用1、加藥:待腸肌穩(wěn)定10min后,描記正常收縮曲線,然后依次加藥并記錄收縮曲線的變化,順序如下:(1)0.001%Ach溶液0.2ml,當(dāng)腸肌活動曲線降至基線時,臺氏液連續(xù)沖洗3次;(2)重復(fù)(1),作用達(dá)到最高點時再加

4、0.1%阿品托0.2ml,記錄曲線變化后,臺氏液連續(xù)沖洗3次;(3)1%氯化鋇1.0ml作用達(dá)到最高峰時立即加入0.1%阿品托1.0ml,記錄曲線變化;(4)待腸肌活動穩(wěn)定后加入0.1%毛果蕓香堿0.5ml觀察描記腸肌活動曲線后,臺氏液連續(xù)沖洗3次;(5)加0.1%阿品托0.5ml,作用明顯時再加0.1%毛果蕓香堿0.5ml,觀察描記腸肌活動曲線后,臺氏液連續(xù)沖洗3次;(6)加0.05%新斯的明溶液0.5ml,描記腸肌活動曲線變化。2、記錄結(jié)果:將描記的曲線圖打印剪貼,標(biāo)明題目,時間,地點,室溫,實驗者與主要條件(如腸段長度,走紙速度,加藥標(biāo)記等)。(四)須知:1、實驗用動物在實驗前24h禁食

5、,不禁水,已保持腸道無糞便。2、每加入藥液,至作用明顯后,用臺氏液連續(xù)沖洗3次,等到曲線恢復(fù)到用藥前的水平,隨之描記一段基線,再加入下一個藥液,如果腸管反應(yīng)已失靈,可更換一段腸管。3、向管加藥時,不要觸碰連接線,也不要把藥滴到管壁上4、腸管與換能器連接線不宜太緊,亦不能與浴管壁接觸。5、關(guān)閉電腦時,確認(rèn)USB接口已經(jīng)關(guān)閉,再關(guān)閉BL420E生物機(jī)能實驗系統(tǒng)軟件,關(guān)閉電腦。六、實驗報告要求、實驗報告容應(yīng)包括:實驗?zāi)康?、實驗原理、器材、藥品與試劑、動物、實驗方法、結(jié)果與討論等部分。結(jié)果要對所得實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析;討論要對實驗中遇到的問題進(jìn)行描述并分析原因。七、思考題1、試分析上述藥物對離體腸平滑肌有什么作用。為什么?2、用實驗方法,還可以做哪些實驗?八、實驗成績評定方法原理描述:10分實驗流程:10分?jǐn)?shù)據(jù)記錄:10分解決問題的能力:20分資料搜集:10分實驗結(jié)果:10分實驗效果10分附錄:許多二價離子都和鈣離子相似的作用,如鎂離子。可能是這么機(jī)制吧。興奮信號傳到肌接頭處時,興奮引起鈣離子大量釋放.釋放的鈣離子促進(jìn)神經(jīng)軸突中的囊泡膜與接頭前膜(突觸前膜)發(fā)生融合而破裂而釋放囊泡中的乙酰膽堿(遞質(zhì)),乙酰膽堿(遞質(zhì))經(jīng)過神經(jīng)肌肉接頭間隙(突觸間隙);與接頭后膜(突觸后膜)上的受體結(jié)合,引發(fā)終板電位。其過程,包括三個階段.(一是鈣離

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