口腔腫瘤分子生物學(xué)課件

1、第六節(jié) 口腔腫瘤分子生物學(xué)一、細(xì)胞增殖與細(xì)胞凋亡 （一）細(xì)胞增殖 （二） 細(xì)胞凋亡二、口腔腫瘤發(fā)生的分子機(jī)制 （一） 癌基因 （二） 抑癌基因 三、口腔腫瘤轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制 （一）口腔腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移過(guò)程 （二）口腔腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制四、口腔腫瘤相關(guān)基因的篩選與功能研究策略 一、細(xì)胞增殖與細(xì)胞凋亡1. 細(xì)胞增殖是指通過(guò)細(xì)胞分裂增加細(xì)胞數(shù)量。2. 細(xì)胞周期是指細(xì)胞完成一次有絲分裂的過(guò)程。3. 真核細(xì)胞的細(xì)胞周期分為4個(gè)時(shí)期： DNA合成前期（G1期） DNA合成期（S期） DNA合成后期（G2期） 分裂期（M期） 休眠細(xì)胞暫時(shí)退出細(xì)胞周期，但在適當(dāng)?shù)拇碳は驴芍匦逻M(jìn)入細(xì)胞周期,稱G0期細(xì)胞。（一）細(xì)

2、胞增殖 G1SG2M細(xì)胞周期G0 對(duì)細(xì)胞分裂增殖有調(diào)控作用的細(xì)胞生長(zhǎng)因子。周期蛋白（cyclin）和周期蛋白依賴性激酶（cyclin-dependent kinase，CDK）,這兩種蛋白是細(xì)胞周期進(jìn)展的主要推動(dòng)力。CDK抑制劑，負(fù)責(zé)負(fù)向調(diào)控CDK的活性。細(xì)胞周期檢查點(diǎn)調(diào)控蛋白，負(fù)責(zé)監(jiān)控細(xì)胞遺傳物質(zhì)的忠實(shí)復(fù)制。腫瘤是失去調(diào)控的非正常細(xì)胞增殖。4. 細(xì)胞周期的調(diào)控細(xì)胞凋亡是一種程序性細(xì)胞死亡，是一種主動(dòng)的細(xì)胞死亡。細(xì)胞凋亡的過(guò)程受到了嚴(yán)格的調(diào)控，細(xì)胞凋亡的缺陷可以導(dǎo)致細(xì)胞的過(guò)度增生。細(xì)胞凋亡主要途徑： 線粒體/細(xì)胞色素C途徑。 通過(guò)TNF受體家族激活Caspase-8。（二） 細(xì)胞凋亡二、口腔腫

3、瘤發(fā)生的分子機(jī)制（一）癌基因原癌基因：是正?；?，同時(shí)也是細(xì)胞生長(zhǎng)必不可少的關(guān)鍵基因癌基因：在癌癥中，原癌基因發(fā)生突變或表達(dá)水平過(guò)度增加后就會(huì)形成能夠致瘤的癌基因。（二）抑癌基因抑癌基因編碼的蛋白產(chǎn)物抑制細(xì)胞生長(zhǎng)或引起細(xì)胞死亡。抑癌基因的突變或表達(dá)缺失可以導(dǎo)致其抑制細(xì)胞生長(zhǎng)功能喪失，有利于癌癥的發(fā)生。原癌基因和抑癌基因的關(guān)系及在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用原癌基因+抑癌基因-癌基因+抑癌基因失活X腫瘤細(xì)胞正常細(xì)胞生長(zhǎng)生長(zhǎng)三、口腔腫瘤轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制（一）口腔腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移過(guò)程腫瘤細(xì)胞侵入局部組織基質(zhì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)入脈管系統(tǒng)，包括血液循環(huán)和淋巴系統(tǒng)。腫瘤細(xì)胞在遠(yuǎn)處脈管黏附和形成癌栓。腫瘤細(xì)胞出脈管并在繼發(fā)組織器

4、官定位生長(zhǎng)，形成轉(zhuǎn)移病灶轉(zhuǎn)移病灶繼續(xù)擴(kuò)散，形成新的轉(zhuǎn)移病灶口腔腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移過(guò)程（二）口腔腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制誘導(dǎo)新的血管形成腫瘤細(xì)胞黏附能力的變化細(xì)胞外基質(zhì)的破壞和細(xì)胞運(yùn)動(dòng)逃避免疫監(jiān)視四、口腔腫瘤相關(guān)基因的篩選與功能研究策略遺傳學(xué)方法抑制消減雜交技術(shù)基因芯片技術(shù)激光顯微切割技術(shù)小鼠體內(nèi)的逆轉(zhuǎn)錄插入性突變口腔腫瘤相關(guān)基因功能研究策略構(gòu)建和表達(dá)突變基因基因敲除或沉默抑制消減雜交技術(shù)是一種鑒定、分離兩種組織細(xì)胞中差異表達(dá)基因的技術(shù)，有商業(yè)試劑盒。Diatchenko 等1996年在抑制性PCR的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的cDNA消減雜交方法。 優(yōu)點(diǎn)：與差異顯示PCR相比假陽(yáng)性率低；與代表性差異分析法RDA相比效率高，減少了雜交輪次；敏感性高。缺點(diǎn)：需要較多的樣本（需數(shù)微克mRNA）；不能同時(shí)進(jìn)行數(shù)個(gè)樣品之間的比較。電泳結(jié)果差異表達(dá)基因有關(guān)技術(shù)簡(jiǎn)介激光顯微切割技術(shù)激光顯微切割技術(shù)是由美國(guó)國(guó)立癌癥研究所發(fā)展的一種在顯微鏡下用激光進(jìn)行微切割采樣的方法。優(yōu)點(diǎn)：可以快速精確地