藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方案

1、藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方案藥理實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)I設(shè)計(jì)人：2011級(jí)藥學(xué)一班 張禮杰 2011515010 信盼 2011515024 陳茂琴 2011515026 何朵朵 2011515028 藥學(xué)四班 楊 森 20115151 01 馮 禹 2011515110 王同月 2011515102元胡止痛片中抗炎和鎮(zhèn)痛作用研究實(shí)驗(yàn)?zāi)康模禾接懺雇雌逆?zhèn)痛和抗炎作用IIIl=j實(shí)驗(yàn)原理:元胡止痛片收載于元胡止痛片收 載于中國(guó)藥典是由元胡、白芷兩味藥組成 的中藥復(fù)方制劑為行氣活血止痛劑臨床用于 治療氣滯血瘀胃痛、脅痛、頭痛及月經(jīng)痛等癥 療效確切。本實(shí)驗(yàn)是為驗(yàn)證元胡止痛片的鎮(zhèn)痛 和抗炎作用進(jìn)行驗(yàn)證。實(shí)驗(yàn)對(duì)四川禾邦陽(yáng)光制

2、藥廠家生產(chǎn)元胡止痛片不同劑量進(jìn)行了藥效 學(xué)研究采用小鼠醋酸扭體法、小鼠熱板法和耳 腫脹法實(shí)驗(yàn)分別測(cè)定小鼠扭體反應(yīng)抑制率、小 鼠痛閡值提高率和腫脹率從而確定不同劑量 的鎮(zhèn)痛和抗炎作用效果。在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究中篩選鎮(zhèn)痛藥的常用致 痛方法概括有物理法（熱、電、機(jī)械）和化學(xué) 法。動(dòng)物的疼痛反應(yīng)常表現(xiàn)出嘶叫、舔足、翹 尾、蹦跳及皮膚、肌肉抽搐?；瘜W(xué)法，即將某 些化學(xué)物質(zhì)，如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、鉀離子、緩激肽 等，涂布于動(dòng)物的的某些敏感部位或腹腔注射。腹腔注射損傷物質(zhì)引起受試動(dòng)物腹痛，動(dòng)物表現(xiàn)出“扭體反應(yīng)”（即腹部?jī)?nèi)凹、軀干與 后肢伸張、臀部高起）。l=j實(shí)驗(yàn)方法：使用小鼠熱板法、醋酸扭體法、耳 腫脹法，并分別建立小

3、鼠疼痛和炎癥模型，灌 胃給予不同劑量元胡止痛片配成的溶液，觀察 對(duì)動(dòng)物的鎮(zhèn)痛和抗炎作用。實(shí)驗(yàn)過(guò)程：1.內(nèi)容4.1藥品與試劑元胡止痛片：四川禾邦陽(yáng)光制藥股份有限公司， 國(guó)藥準(zhǔn)字z51021658，規(guī)格：片芯重0.25g，12 片阿司匹林：浙江金華市第三制藥廠，國(guó)藥準(zhǔn)字: H13023716,臨用前用蒸餾水配制為適當(dāng)濃度 的混懸液。4.2動(dòng)物：健康昆明種小白鼠，雌性，32只1=III4.3器材：數(shù)控超級(jí)恒溫槽，燒杯、1ml注射 器、電子秤4.4分組：l=j空白對(duì)照組（灌胃0.9%生理鹽水10 mL/kg） 元胡止痛片高、低劑量組（0.2, 0.4mg / 10g）陽(yáng)性藥阿司匹林對(duì)照組（灌胃阿司匹林

4、0. 4 g/kg）4.5人和動(dòng)物劑量換算公式小白鼠二人 0.0026 /g202方法（1）熱板法動(dòng)物篩選：致痛潛伏期（痛閾值）為530s 之間的合格雌性小鼠。32只，熱板法鎮(zhèn)痛試驗(yàn) 篩選痛閾值合格的小鼠，取早小鼠于給藥前先 用熱板儀于55 0. 5 C分別測(cè)定每只小鼠 的正常痛閾值將小鼠放于智能熱板儀上至出 現(xiàn)舔后足的所需時(shí)間作為痛閾值（s），連續(xù)2 次，間隔30 s,測(cè)定平均值即為正常痛閾值。 將舔后足時(shí)間V 5 s或30 s，或跳躍者不用 于此實(shí)驗(yàn)器材：數(shù)控超級(jí)恒溫槽，燒杯、1ml注射器、 電子秤、熱板儀分組：按體重隨機(jī)分組，每組8只，各鼠給 藥前測(cè)定二次正常痛閾值（二次測(cè)定間隔1h）,

5、以其平均值為給藥前正常值，按4.4分組 給藥測(cè)定痛閾值：熱板法小鼠的鎮(zhèn)痛作用參照文獻(xiàn)方法，取恒溫水浴鍋，調(diào)節(jié)恒溫水浴，使 水溫恒定在55 + 0. 5C,將500ml燒杯放入其 中，使燒杯底部接觸水面。取合格雌性小鼠， 隨機(jī)分組，按0.2mg/10g灌胃不同藥液，測(cè)定 給藥后15、30、60、90分鐘后各鼠痛閾值。痛閾提高百分率按下式計(jì)算痛閾提高百分 率表格1藥物對(duì)小鼠熱板法影響記錄低濃度組別給藥30柄：劑量樣本舔足時(shí) 間痛閾提 高百分 率生理鹽 水組給藥90min：組別劑量樣本舔足時(shí) 間痛閾提 高百分 率生理鹽 水組陽(yáng)性藥 物對(duì)照 組試驗(yàn)藥 物1組 高濃度試驗(yàn)藥 物1組 低濃度（2）醋酸扭體

6、法：本實(shí)驗(yàn)將0.7%醋酸直接腹 腔注射，刺激腹膜引起持久的疼痛反應(yīng)，致使 小鼠出現(xiàn)“扭體反應(yīng)”。鎮(zhèn)痛藥物可以抑制動(dòng)物 的“扭體反應(yīng)”，本法敏感、簡(jiǎn)便、重復(fù)性好。器材：1ml注射器、電子秤藥品：元胡止痛片：四川禾邦陽(yáng)光制藥股份 有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字z51021658，規(guī)格：片芯重0.25g阿司匹林：浙江金華市第三制藥廠，國(guó)藥準(zhǔn)字:H13023716,（臨用前用蒸餾水配制為適當(dāng)濃度的混懸液） 醋酸溶液動(dòng)物：2025g雄性小白鼠32只隨機(jī)分組、編號(hào)，每組8只，按4.4分組給 藥給藥1h后，給每只小鼠腹腔注射0. 6%的 醋酸（臨用前新鮮配制）每只0. 2 L,觀察：5min后記錄15分鐘內(nèi)各小鼠出現(xiàn)扭

7、體反應(yīng)”的次數(shù)。表格2藥物對(duì)小鼠醋酸扭體法影響記錄組別劑量樣本扭體 次數(shù)生理鹽 水組陽(yáng)性藥 物對(duì)照 組試驗(yàn)藥 物組高 濃度 （混合 藥物）試驗(yàn)藥 物組正 常濃度 （混合 藥物）注意事項(xiàng)（1）小鼠體重輕，“扭體反應(yīng)”次數(shù)較低。室溫以20C為宜，低溫時(shí)，小白鼠扭體 次數(shù)減少。動(dòng)物的疼痛反應(yīng)個(gè)體差異較大，因此實(shí)驗(yàn) 用動(dòng)物數(shù)越多結(jié)果越可靠。耳腫脹法器材：注射器，電子秤，棉簽，鼠耳打孔 器，剪刀藥品：元胡止痛片：四川禾邦陽(yáng)光制藥股份 有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字z51021658，規(guī)格：片芯重0.25g阿司匹林：浙江金華市第三制藥廠，國(guó)藥準(zhǔn)字: H13023716,(臨用前用蒸餾水配制為適當(dāng)濃度的混懸液) 二甲苯

8、分組：取小鼠32只，隨機(jī)分為4組，每組8只：I三給藥：分組與給藥劑量與4.4相同測(cè)量:給小鼠的右耳前后涂上二甲苯0.1ml/ 只，30分鐘后處死小鼠，沿耳廓對(duì)稱剪下兩只 耳殼，用6mm打孔器取耳片，以兩耳重量差計(jì) 算腫脹度。計(jì)算腫脹率腫脹率（%）司右耳片重（mg）-左耳片重（mg）/ 左耳片重（mg）X100%腫脹抑制率 =（對(duì)照組耳腫率-實(shí)驗(yàn)組耳腫 率）/對(duì)照組耳腫率*100%參考文獻(xiàn): 1李見(jiàn)春,黃繼漢，桂常青,鄭青山.元胡止痛 栓鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究J.中國(guó)臨床藥理學(xué)與 治療學(xué),2004(04)2唐嵐.元胡止痛分散片藥學(xué)研究J.成都中 醫(yī)藥大學(xué),2002徐叔云(Au FY)，卞如濂(Ban RL)，陳修(Chen X).藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué).第3版M .北京：人民衛(wèi)生出版社， 2002. 886, 911, 934, 1408.4楊巧芳，孟慶剛.炎癥動(dòng)物模型探要J. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2008,26(3):5165林定齊非甾體類抗炎藥及解熱鎮(zhèn)痛藥用藥情況分析J當(dāng)代醫(yī)學(xué)2012 (02)6劉和莉，李月玲，薛永志；不同溫度和醋酸 濃度對(duì)小鼠扭體疼痛模型的影響J包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)2012 (02)清單：元胡止痛片：四川禾邦陽(yáng)光制藥股份有限公司， 國(guó)藥準(zhǔn)字z51021658，規(guī)格：片芯