生物制品疫苗題

1、一、名詞：1、生物制品：是研究各類生物制品的來源、結(jié)構(gòu)、功能、特點、應(yīng)用、生產(chǎn)工藝、原理、現(xiàn)狀、存在問題與發(fā)展前景等諸多方面 知識的一門學(xué)科。2、疫苗：由性質(zhì)和作用不同是物質(zhì)共同組成的復(fù)合物。3、滅活疫苗：又稱死疫苗，是指用物理或者化學(xué)方法將具有完整的 病原微生物殺死，使其喪失感染性和毒性但仍保持免役原性，并結(jié) 合相應(yīng)的佐劑而制成的疫苗。4、減毒疫苗：篩選出毒力高度降低或無毒的活的病原微生物而制成的疫苗。5、亞單位疫苗：將病原體中能誘導(dǎo)保護性免疫應(yīng)答的目的抗原編碼 基因克隆后，插入適當(dāng)?shù)脑嘶蛘婧吮磉_載體質(zhì)粒；再將重組質(zhì)粒 導(dǎo)入細菌、酵母或哺乳動物中高效表達目的基因，分離、提取、純 化目的蛋白

2、而制成。6、遺傳重組疫苗：是指利用經(jīng)遺傳重組方法獲得的重組微生物制成 的疫苗。7、基因工程疫苗： 即遺傳工程疫苗，是指使用重組 DNA技術(shù)克隆 并表達保護性抗原基因，利用表達的抗原產(chǎn)物或重組體本身制成的 疫苗。8、逆向疫苗學(xué)：測病原微生物的核酸，由此預(yù)測抗原表達的核酸位 點基因。9、核酸疫苗：又稱基因疫苗或 DNAS苗，就是把外源基因克隆到真 核質(zhì)粒表達載體上，然后將重組的質(zhì)粒 DNA直接注射到動物體內(nèi)， 使外源基因在活體內(nèi)表達，產(chǎn)生的抗原激活機體的免疫系統(tǒng)，引發(fā) 免疫反應(yīng)。10、活載體疫苗：又稱重組載體疫苗，是目的抗原的編碼基因?qū)?活載體中，構(gòu)建重組菌株；目的基因可隨重組菌株在宿主體內(nèi)的增

3、 殖而大量表達，從而誘發(fā)相應(yīng)的免疫保護作用。11、CCID50:即半數(shù)組織細胞培養(yǎng)感染量，指用不同劑量的病毒處理細胞，使半數(shù)組織細胞感染病毒的劑量。12、LD5。即半數(shù)致死量，一定時間內(nèi)殺死全部實驗動物中半數(shù)所需齊I量。13、CPE即細胞病變，多數(shù)病毒在敏感細胞增殖，可引起細胞代謝等方面的變化，發(fā)生形態(tài)變化。二、簡答：1、生物制品質(zhì)量檢驗主要包括哪些內(nèi)容？答：生物制品的理化鑒定、生物制品的安全鑒定、生物制品的效力鑒定；（1）生物制品的理化鑒定又包括物理性狀鑒定和化學(xué)性狀鑒定；（2）生物制品的安全鑒定又包括一般安全性檢查、殺毒、滅活和脫毒情況的檢查、外源性污染檢查和過敏性物質(zhì)檢查；（3）生物制品

4、的 效力鑒定又包括動物保護力試驗、活菌數(shù)和活病毒滴度測定、血清學(xué) 試驗和其他相關(guān)的鑒定和評價。2 .比較活疫苗與死疫苗各有哪些優(yōu)缺點？答：活疫苗的優(yōu)缺點：（1）優(yōu)點：可在體內(nèi)繁殖，免疫力持久，產(chǎn) 量高，成本低、多數(shù)只需免疫一次，接種劑量?。?）缺點：有毒力增強和反祖危險抗原干擾現(xiàn)象保存條件苛刻 。死疫苗的優(yōu)缺點：（1）優(yōu)點：不能在體內(nèi)繁殖，性質(zhì)穩(wěn)定，安全性高、有利于制備多價或多聯(lián)疫苗、比較安全，不發(fā)生全身性副反 應(yīng)，無毒力反祖現(xiàn)象、受外界影響小，有利于保存運輸（2）缺點：免疫劑量大，需多次免疫，成本高 只能誘導(dǎo)機體產(chǎn)生體液免疫、 通常需要用佐劑或攜帶系統(tǒng)來增強其免疫效果。3、簡述生物制品生產(chǎn)中

5、常用的減毒方法有哪些？答：（1）體外減毒：體外連續(xù)傳代培養(yǎng)減毒；（2）冷適應(yīng)篩選：溫度可能改變病毒的特性，在通常情況下，將病毒在低溫條件下進行連續(xù) 或逐步傳代，可以誘導(dǎo)產(chǎn)生基因組多處突變或損害的減毒冷變異株，這種冷變異株常伴有毒力減弱和各種特征性標(biāo)志。（3）誘變法：利用化學(xué)、物理或生物學(xué)等方法的誘變也可以使細菌或病毒的基因發(fā)生改變，通過篩選而獲得毒性減弱可用疫苗生產(chǎn)的菌 /毒種。4、簡述禽胚尿囊腔接種病毒的實驗過程。答：選7-11日齡雞胚照檢標(biāo)出氣室邊界和胚胎位置，避開血管做標(biāo) 記，用碘酒消毒標(biāo)記處的卵殼，在標(biāo)記處鉆孔，再次用碘酒消毒鉆孔 區(qū)；將注射劑針頭經(jīng)孔刺入尿囊胚，注入 0.1-0.2m

6、l接種物，用蠟熔 化封孔，33C-35 c孵化48-72h.5、基因工程亞單位疫苗抗原基因的選擇原則是什么？答：（1） 一般選擇病原體表面糖蛋白編碼基因；（2）對于易變異病毒，可選擇各亞型共有的核心蛋白的主要保護型抗原基因序列。6、簡要回答目前用于研究轉(zhuǎn)基因植物疫苗常用的植物有哪些？各種 植物具有哪些特點？答：常用的有香蕉、煙草、馬鈴薯、番茄等，在煙草中已經(jīng)成功表達 了鏈球菌變異株SpaA蛋白疫苗、防治霍亂和乙肝疫苗及瘧疾抱子蟲 抗原等；在馬鈴薯中表達了乙肝病毒表面抗原基因和大腸桿菌腸毒素 基因；在番茄中已表達了狂犬病毒糖蛋白和乙肝表面抗原蛋白，天花病毒表面抗原又在番茄中表達成功。7、核酸疫苗

7、的定義是什么？詳細闡述構(gòu)建核酸疫苗的基本要素是什么？答：核酸疫苗又稱基因疫苗或 DNA5苗，就是把外源基因克隆到真核質(zhì)粒表達載體上，然后將重組的質(zhì)粒DNA1接注射到動物體內(nèi)，使外源基因在活體內(nèi)表達，產(chǎn)生的抗原激活機體的免疫系統(tǒng)，引發(fā)免疫反應(yīng)；核酸疫苗構(gòu)建的基本要素：(1)基因疫苗的構(gòu)建：未使用高保真的酶；切膠時不迅速，紫外線照射發(fā)生誘變。(2)重組質(zhì)粒的篩選與鑒定：主要有表型篩選、酶切測定及測序鑒定的順序進行。8、簡述生物制品動物保護力實驗及原理。答：生物制品動物保護力實驗是將疫苗免疫動物后， 再用同種的活菌、 活毒或毒素攻擊，從而判斷制品的保護水平。.病毒性細胞疫苗制造工藝流程。大圖.簡述細胞增殖病毒-異步接毒技術(shù)？答：(1)異步接毒：細胞生長成單層后，倒去生長液，按維持液的1%-10%(V/V)量接毒，37c吸附1小時后加入維持液，多數(shù)病毒用此法；(2)同步接毒：種植細胞的同時，或在種植細胞 4小時內(nèi)將病毒接入，主要用于病毒復(fù)制發(fā)生在細胞有絲分裂盛期的病毒；(3)收毒：病毒在敏感細胞內(nèi)增殖，在 CPBi 80施右時，收獲反復(fù)凍融多 次使病毒釋放，3000rpm離心15-20分鐘，除去細胞碎片，取上清病 毒液-20 C保存。三、論述1、一些高危型人乳頭瘤病毒感染是女性宮頸癌的主要發(fā)病原因，該