細(xì)胞和免疫學(xué)技術(shù)和原理_第1頁(yè)
細(xì)胞和免疫學(xué)技術(shù)和原理_第2頁(yè)
細(xì)胞和免疫學(xué)技術(shù)和原理_第3頁(yè)
細(xì)胞和免疫學(xué)技術(shù)和原理_第4頁(yè)
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1、關(guān)于細(xì)胞與免疫學(xué)技術(shù)與原理第一張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 細(xì)胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的方法,通過(guò)類似于工程學(xué)的步驟,在細(xì)胞整體水平或細(xì)胞器水平上,按照人們的意愿來(lái)改變細(xì)胞的遺傳特性和生物學(xué)特性,以獲得新型生物或特種細(xì)胞產(chǎn)品的一門綜合性科學(xué)技術(shù)。第二張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 細(xì)胞融合技術(shù)第三張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月動(dòng)物方面組裝鼠 美國(guó)耶魯大學(xué)教授馬格特和彼德斯利用黑毛鼠,白毛鼠,黃毛鼠三種顏色的老鼠的受精卵組裝成披著黃百黑三種顏色的老鼠。綿山羊 英國(guó)和美國(guó)還組裝成功了綿羊和山羊的嵌合體,培育出具有綿羊的卷曲濃密的長(zhǎng)

2、毛,山羊式的仰角的綿山羊,毛肉兼用。第四張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月植物方面薯番茄和番茄薯 人們用馬鈴薯和番茄通過(guò)細(xì)胞融合獲得雜種薯番茄和番茄薯甘藍(lán)型歐洲油菜 用甘藍(lán)和白菜的細(xì)胞融合使兩個(gè)物種的染色體組相加,人工合成了甘藍(lán)型歐洲油菜。第五張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月微生物方面 蘇云金桿菌能殺玉米螟,滅蚊球孢菌有殺蚊子的效能,科學(xué)家們將這兩種菌的原生質(zhì)體融合獲得了既能滅蚊又能殺螟的新菌株。第六張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 這些都是自然進(jìn)化所不能出現(xiàn)的新品種,他主要是通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。 細(xì)胞融合是細(xì)胞工程最基本的核心技術(shù)。 第七張,PP

3、T共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞融合(又稱體細(xì)胞雜交): 是指用自然或人工方法使兩個(gè)或更多個(gè)不同的細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。并使之分化再生、形成新物種或新品種的技術(shù)。 第八張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月融合材料 植物或微生物原生質(zhì)體 動(dòng)物單個(gè)細(xì)胞第九張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第十張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月生物法仙臺(tái)病毒法 1958年 日本 岡田善雄 紫外光滅活的仙臺(tái)病毒可以誘發(fā)艾氏腹水瘤細(xì)胞相互融合;也可使兩種不同的動(dòng)物細(xì)胞之間發(fā)生凝集,進(jìn)而融合成一體。 動(dòng)物細(xì)胞融合中,仙臺(tái)病毒為產(chǎn)生細(xì)胞雜種的標(biāo)準(zhǔn)融合劑。 第十一張,PPT共一

4、百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月病毒誘導(dǎo)的細(xì)胞融合的過(guò)程首先是細(xì)胞表面吸附許多病毒粒子。接著是細(xì)胞發(fā)生凝集。幾分鐘至幾十分鐘后,病毒粒子從細(xì)胞表面消失。最后就在這個(gè)部位鄰接細(xì)胞的細(xì)胞膜融合,胞漿得以相互交流,最后形成融合細(xì)胞。第十二張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月病毒誘導(dǎo)的動(dòng)物細(xì)胞融合第十三張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月病毒誘導(dǎo)的細(xì)胞融合的缺點(diǎn)制備困難;每批病毒融合效價(jià)差別比較大,實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性差;滅活不完全時(shí),有病毒感染的危險(xiǎn)。 融合率較低第十四張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月化學(xué)法PEG 優(yōu)點(diǎn):聚乙二醇(PEG)來(lái)源方便,使用簡(jiǎn)便活性穩(wěn)定誘導(dǎo)細(xì)胞融

5、合的頻率較仙臺(tái)病毒高達(dá)數(shù)百倍誘導(dǎo)植物和動(dòng)物細(xì)胞融合第十五張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月聚乙二醇的作用機(jī)理 PEG的水溶性極強(qiáng),在液相介質(zhì)中,它的許多醚鍵帶有微弱負(fù)電荷;在Ca2+參與下,PEG將帶正電荷的表面蛋白或帶負(fù)電荷的糖蛋白,通過(guò)Ca2+橋連在起,使細(xì)胞發(fā)生聚集、融合。第十六張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 PEG的作用與細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)間形成離子鍵有關(guān)。 PEG可與水分子借氫鍵結(jié)合,在高濃度(50)的PEG溶液中自由水消失,導(dǎo)致細(xì)胞脫水而發(fā)生質(zhì)膜結(jié)構(gòu)的變化,由此引起細(xì)胞融合。第十七張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月化學(xué)誘導(dǎo)法的特點(diǎn)優(yōu)點(diǎn): 具有細(xì)胞融

6、合的通用性;與病毒比較,容易制備和控制;活性穩(wěn)定;使用方便。缺點(diǎn): 對(duì)細(xì)胞毒性很大;誘導(dǎo)產(chǎn)生雜交細(xì)胞的頻率仍在很低水平;不能在顯微鏡下觀察細(xì)胞的融合過(guò)程。第十八張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月物理法電融合誘導(dǎo)法概述: 在直流電脈沖的誘導(dǎo)下,原生質(zhì)體質(zhì)膜表面的電荷和氧化還原電位發(fā)生改變,使異種原生質(zhì)體黏合并發(fā)生質(zhì)膜瞬間破裂,進(jìn)而質(zhì)膜開(kāi)始連接,直到閉合成完整的膜形成融合體。第十九張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月細(xì) 胞細(xì)胞膜變薄細(xì)胞膜出現(xiàn)微孔細(xì)胞膜重新閉合細(xì)胞膜不能閉合電脈沖電勢(shì)不斷上升達(dá)到臨界膜電勢(shì)微孔不大微孔太大第二十張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞

7、電穿孔第二十一張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞電融合 第二十二張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月電場(chǎng)誘導(dǎo)的細(xì)胞融合主要優(yōu)點(diǎn):融合率高,融合率是PEG的l00倍,對(duì)細(xì)胞傷害小。操作簡(jiǎn)便、快速,裝置精巧,方便簡(jiǎn)單,誘導(dǎo)過(guò)程可控制性強(qiáng),重復(fù)性強(qiáng)。因?yàn)槭俏锢泶碳?,無(wú)殘余毒性,可免去洗滌過(guò)程。具有普遍性,可用于動(dòng)物、植物和微生物等各類細(xì)胞。可用顯微鏡或錄像觀察融合過(guò)程,探討融合機(jī)理。第二十三張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月缺點(diǎn): 目前電融合技術(shù)存在的主要問(wèn)題是融合細(xì)胞存活率低。第二十四張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月1、利用基因定位繪制人類基因圖

8、細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用第二十五張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 (1) 小鼠人雜交細(xì)胞,人染色體優(yōu)先丟失,而只留下一條或少數(shù)幾條人的染色體; (2) 染色體分帶技術(shù)可以把人與鼠的染色體區(qū)分開(kāi),而且能區(qū)別每一根人的染色體; (3) 電泳技術(shù)可以鑒別不同種動(dòng)物的蛋白和酶。第二十六張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月2、利用雜交細(xì)胞生產(chǎn)活性物質(zhì) 單克隆抗體工業(yè)的興起就是利用B淋巴細(xì)胞被特異的抗原刺激后能應(yīng)答而分泌特異的抗體的特點(diǎn)同骨髓瘤細(xì)胞的長(zhǎng)命不死的特點(diǎn)兩者融而為一。第二十七張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月推論: 可能利用胰臟細(xì)胞生產(chǎn)胰島素,利用甲狀腺細(xì)胞生產(chǎn)甲狀

9、腺素,利用垂體細(xì)胞生產(chǎn)生長(zhǎng)激素、各種促性腺激素、催乳素以及各種神經(jīng)激素等。還可以利用麝香腺細(xì)胞生產(chǎn)麝香。第二十八張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月3、生產(chǎn)實(shí)踐方面的應(yīng)用(1)在生物醫(yī)藥上的應(yīng)用 如:?jiǎn)慰寺】贵w的生產(chǎn)(2)在微生物構(gòu)建新菌株方面的應(yīng)用 第二十九張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 原生質(zhì)體融合也成了微生物育種的重要手段。乳糖發(fā)酵短桿菌和黃色短桿菌是兩種重要的氨基酸生產(chǎn)菌,黃色短桿菌是賴氨酸高產(chǎn)菌株,但生長(zhǎng)緩慢,發(fā)酵周期長(zhǎng),生產(chǎn)中易染菌,將它與生長(zhǎng)快的乳糖發(fā)酵短桿菌融合,得到了新的賴氨酸生產(chǎn)菌,提高了對(duì)葡萄糖的轉(zhuǎn)化率,發(fā)酵周期縮短4%。第三十張,PPT共一百八

10、十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 對(duì)醬油釀制來(lái)說(shuō),曲霉的蛋白酶對(duì)谷氨酸(味鮮)的產(chǎn)量有很大的影響。過(guò)去在改良和培育醬油曲霉菌種時(shí),其主要目的是增加產(chǎn)酶能力,但由于產(chǎn)蛋白酶高的菌株產(chǎn)谷酰胺酶的能力低,而產(chǎn)谷酰胺酶高的菌株產(chǎn)蛋白酶的能力低。人們把高產(chǎn)谷酰胺酶和蛋白酶的兩株菌原生質(zhì)體融合,獲得雙高產(chǎn)的優(yōu)良菌種。第三十一張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(3)在水產(chǎn)動(dòng)物遺傳育種上的應(yīng)用 科學(xué)家把大鱗副泥鰍同鰻尾泥鰍雜交培育了融合魚(yú)。 將鯉魚(yú)囊胚細(xì)胞與紅鯽魚(yú)卵融合,培育了融合魚(yú)苗。這些融合魚(yú)各具兩對(duì)觸須,形態(tài)類似鯉魚(yú)。 第三十二張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(4)在植物新品種育種

11、上的應(yīng)用 蘿卜和甘藍(lán)、粉藍(lán)煙草和郎氏煙草、番茄和馬鈴薯、煙草和大豆、甘蔗和高粱、芥菜和紫蕓苦等,這些雜種植物采用有性雜交的方法是難以得到的。 我國(guó)科學(xué)家已培育出普通煙草與黃花煙草、普通煙草與粉藍(lán)煙草、煙草與矮牽牛、煙草與天仙子等種間和屬間體細(xì)胞雜種植株。第三十三張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(5)在發(fā)酵工程中的應(yīng)用 日本科學(xué)家把兩個(gè)不同種類的酵母強(qiáng)行融合起來(lái),并使融合成的細(xì)胞繁殖,制成新的酵母。這一技術(shù)為今后改良酵母開(kāi)辟了新途徑,把最尖端的生物工程中的細(xì)胞融合辦法應(yīng)用到傳統(tǒng)的釀酒技術(shù)中,成為守舊的釀造技術(shù)體系革新的一個(gè)起點(diǎn)。第三十四張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月

12、 體細(xì)胞融合的技術(shù),如今已在動(dòng)物間實(shí)現(xiàn)了小鼠和田鼠,小鼠和 小雞,甚至于小鼠和人等許多遠(yuǎn) 緣和超遠(yuǎn)緣的體細(xì)胞雜交。第三十五張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月利用細(xì)胞雜交技術(shù)來(lái)制備工程細(xì)胞生產(chǎn)活性物質(zhì)的優(yōu)點(diǎn): (1)細(xì)胞融合率比較高; (2)操作也比基因工程簡(jiǎn)單; (3)所產(chǎn)生的蛋白都是已糖基化了的天然蛋白; (4)動(dòng)物細(xì)胞大批量生產(chǎn)技術(shù)的發(fā)展和改進(jìn)與細(xì)胞內(nèi)高效表達(dá)體系的建立,為動(dòng)物細(xì)胞工程的蛋白生產(chǎn)開(kāi)辟新途徑。第三十六張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié)動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù) 第三十七張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 指人工培養(yǎng)條件下,在動(dòng)物細(xì)胞生物反

13、應(yīng)器中高密度大量地培養(yǎng)有用動(dòng)物細(xì)胞以生產(chǎn)珍貴生物制品的技術(shù)。 第三十八張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 體外大規(guī)模培養(yǎng)真核細(xì)胞要比原核細(xì)胞困難得多。 無(wú)細(xì)胞壁,不耐受攪拌,易破碎,營(yíng)養(yǎng)要求高,生長(zhǎng)條件不易控制,增殖周期長(zhǎng),產(chǎn)品的產(chǎn)量低。 第三十九張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 原核細(xì)胞經(jīng)基因工程技術(shù)所合成的生物制品,不是分泌型的而是同細(xì)胞相結(jié)合的,需要破碎細(xì)胞,釋出產(chǎn)物,再經(jīng)濃縮、純化;因后加工過(guò)程復(fù)雜,而使產(chǎn)品的得率受到損失。第四十張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 真核細(xì)胞能對(duì)其分泌產(chǎn)物進(jìn)行修飾,例如二硫鍵的形成、糖甲?;?,使產(chǎn)物具有完整的生物學(xué)

14、功能。第四十一張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 真核細(xì)胞可以不斷合成和分泌,不斷收獲,后加工過(guò)程也相對(duì)簡(jiǎn)單,細(xì)胞可以重復(fù)利用。因此,利用培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞生產(chǎn)的生物制品,具有很高的市場(chǎng)價(jià)值。 第四十二張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 目前利用動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)可以生產(chǎn)許多有價(jià)值的生物制品,包括重要的疫苗、高效的治療藥物和靈敏的診斷試劑等。第四十三張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月1、病毒疫苗:乙肝疫苗(HbsAg)、脊椎灰質(zhì)炎疫苗(Polio)、狂犬疫苗(Rabies)等。2、非抗體疫苗調(diào)節(jié)劑:干擾素(IFN)、白細(xì)胞介素(IL)、B細(xì)胞生長(zhǎng)因子(BCG

15、F)、巨噬細(xì)胞激活因子(MAN)、T細(xì)胞替代因子(TRF)等。第四十四張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月3、多肽生長(zhǎng)因子:神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、血清生長(zhǎng)因子(SF)等。4、酶類:組織血纖維溶酶原激活劑 (t-PA)等。第四十五張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月5、激素:紅細(xì)胞生成素(EPO)、促黃體 生成素(LH)、促濾胞素(FSH)等。6、腫瘤特異性抗原:癌胚抗原(CEA)等。7、單克隆抗體(MCAB)。8、病毒殺蟲(chóng)劑:桿狀病毒等。第四十六張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月全球銷售額最高的6大類生物技

16、術(shù)藥物:1、腫瘤治療藥物2、胰島素3、anti-TNF-藥物4、促紅細(xì)胞生成素(EPO)5、-干擾素6、凝血因子 這6大類中有5類都是經(jīng)哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)生產(chǎn)的,只有-干擾素是大腸桿菌和酵母表達(dá)的。 第四十七張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)和表達(dá),對(duì)于生產(chǎn)抗體類蛋白質(zhì)藥物具有明顯優(yōu)勢(shì): 1、活性高、穩(wěn)定性好,占生物技術(shù)藥物生產(chǎn)方式的70%以上,能夠保證產(chǎn)品中二硫鍵多等復(fù)雜結(jié)構(gòu)蛋白的活性; 2、效率高、成本低,能夠提升生物技術(shù)藥物的創(chuàng)新能力和競(jìng)爭(zhēng)力。 動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)是當(dāng)今生物技術(shù)藥物生產(chǎn)的主流方式。第四十八張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 目前通

17、過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)獲得生物制品的研制,必須依賴3個(gè)關(guān)鍵技術(shù)的發(fā)展:(1)基因工程和細(xì)胞工程的發(fā)展;(2)大規(guī)模動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和生物反應(yīng)器開(kāi)發(fā);(3)產(chǎn)品的分離濃縮和提純技術(shù)的提高。第四十九張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月大規(guī)模動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的生物反應(yīng)器 第五十張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月1、滾 瓶 系 統(tǒng) 第五十一張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第五十二張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第五十三張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第五十四張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第五十五張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022

18、年6月第五十六張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月優(yōu)點(diǎn): 結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、投資少、技術(shù)成熟、重演性好,放大只是簡(jiǎn)單地增加滾瓶數(shù)。第五十七張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月缺點(diǎn): 滾瓶系統(tǒng)勞動(dòng)強(qiáng)度大,單位體積提供細(xì)胞生長(zhǎng)的表面積小,占用空間大,按體積計(jì)算細(xì)胞產(chǎn)率低,監(jiān)測(cè)和控制環(huán)境條件受到限制。第五十八張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月2、中空纖維管生物反應(yīng)器 第五十九張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月中空纖維管生物反應(yīng)器用途較廣,既可培養(yǎng)懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,又可培養(yǎng)貼壁依賴性細(xì)胞,細(xì)胞密度最高可達(dá)10/ml數(shù)量級(jí)。 中空纖維反應(yīng)器示意圖p-灌注液h-收獲液i-

19、管內(nèi)e-管外 第六十張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月中空纖維培養(yǎng)示意圖第六十一張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月中空纖維管生物反應(yīng)器已進(jìn)入工業(yè)生產(chǎn),主要用于培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體。第六十二張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月中空纖維用聚砜或丙烯的聚合物制成。管壁的厚約5075m,海綿狀,富含毛細(xì)管。管徑200m。管壁是極薄的半透膜。它能截留住分子量分別為1104、5104、10104道爾頓三種。 第六十三張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月一個(gè)培養(yǎng)筒由數(shù)千根中空纖維所組成內(nèi)室:每根纖維的管內(nèi)成為“內(nèi)室”;外室:管與管之間的間隙,可灌流無(wú)血清培

20、養(yǎng)液供細(xì)胞生長(zhǎng),成為“外室”。第六十四張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月接種的細(xì)胞貼附“外室”的管壁上,并吸取從“內(nèi)室”滲透出來(lái)養(yǎng)分,迅速生長(zhǎng)繁殖。培養(yǎng)液中的血清輸入到“外室”,由于血清和細(xì)胞分泌產(chǎn)物(如單克隆抗體)的分子量大而無(wú)法穿透到“內(nèi)室”去,只能留在“外室”并且不斷被濃縮。 第六十五張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中的代謝廢物都屬小分子物質(zhì),可從管壁滲進(jìn)“內(nèi)室” 。一般細(xì)胞在接種13周后,就可以完全充滿管壁的空隙。細(xì)胞停止增殖后,仍可以維持其高水平代謝和分泌功能,長(zhǎng)達(dá)幾個(gè)星期甚至幾個(gè)月。第六十六張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月優(yōu)點(diǎn)

21、:(1)培養(yǎng)器體積小,細(xì)胞高密度生長(zhǎng);(2)濃縮產(chǎn)品的功能;(3)產(chǎn)物純度高;(4)自動(dòng)化程度高,細(xì)胞生長(zhǎng)周期長(zhǎng)。(5)如果控制系統(tǒng)不受污染,能長(zhǎng)期運(yùn)轉(zhuǎn)。 第六十七張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月缺點(diǎn): 由于中空纖維每次生產(chǎn)的消耗器價(jià)格尚貴,如果使用不當(dāng)會(huì)增加生產(chǎn)成本。 第六十八張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月3、細(xì)胞培養(yǎng)專用微載體 第六十九張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月微載體含義: 微載體指直徑在60250m、能夠適用于貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)的微珠。 一般是由天然葡聚糖或者各種合成的聚合物組成。 第七十張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第七十一張

22、,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月微載體培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):1. 表面積/體積(S/V)大。2. 兼有懸浮培養(yǎng)和貼壁培養(yǎng)兩種方法優(yōu)點(diǎn)。3. 簡(jiǎn)便的顯微鏡觀察。能監(jiān)測(cè)出細(xì)胞在微珠生長(zhǎng)情況。 4. 培養(yǎng)基利用率高。 第七十二張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月5. 收獲細(xì)胞過(guò)程不復(fù)雜。 6. 放大容易。7. 勞動(dòng)強(qiáng)度小。 8. 培養(yǎng)系統(tǒng)占有空間小。 微載體培養(yǎng)細(xì)胞是目前公認(rèn)的最有發(fā)展前途的一種培養(yǎng)模式。第七十三張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月二、動(dòng)物細(xì)胞在微載體上貼壁生長(zhǎng)機(jī)理 貼壁依賴動(dòng)物細(xì)胞在微載體表面上增殖,可分為貼壁、生長(zhǎng)和擴(kuò)展成單層三個(gè)階段。 第七十四張,PPT共

23、一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞能否在微載體表面貼附,取決于: 1、細(xì)胞與微載體接觸的機(jī)率 2、細(xì)胞與微載體的相融性 第七十五張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月一般操作方式 貼壁期采用低攪拌轉(zhuǎn)速,時(shí)攪時(shí)停,經(jīng)數(shù)小數(shù)后,一旦細(xì)胞附著于微載體表面,則維持設(shè)定的低轉(zhuǎn)速,進(jìn)入培養(yǎng)階段。第七十六張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 微載體表面的理化性質(zhì) 動(dòng)物細(xì)胞帶負(fù)電荷。微載體表面帶的是正電荷,由于靜電相吸作用,使細(xì)胞容易貼在微載體表面上。 表面光滑的微載體,細(xì)胞擴(kuò)展成單層的速度快。 第七十七張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月優(yōu)良微載體具備特性:1.不含有能毒害細(xì)

24、胞的成分。2.與細(xì)胞有良好的相容性,使細(xì)胞容易 貼壁。3.密度應(yīng)略大于培養(yǎng)基,一般要求在1.031.05之間,最大不宜超過(guò)1.1。為什么?第七十八張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月4.粒徑在40120m(干態(tài))范圍,經(jīng)生理鹽水溶脹后增大到60250m,粒度分布要均勻,表面光滑以利于細(xì)胞鋪展。 5.具有良好的光學(xué)透明性,便于顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。6.能在PBS中耐120125、2030min熱壓滅菌。 第七十九張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月7.基質(zhì)應(yīng)是非剛性材料,避免在培養(yǎng)過(guò)程中相互碰撞而損傷細(xì)胞。 8.不吸收培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分,特別是血清。9.收獲細(xì)胞或細(xì)胞制品容

25、易,不影響蛋白制品分離純化。 10.價(jià)廉,能重復(fù)使用。第八十張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月4、動(dòng)物細(xì)胞的微囊化培養(yǎng)技術(shù)第八十一張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月動(dòng)物細(xì)胞的微囊化 微囊化是固定化技術(shù)中的一種,它是用一層 親水性的半透膜將酶、輔酶、蛋白質(zhì)等生物大分子或動(dòng)植物細(xì)胞包圍在珠狀的微囊里,從而使得酶等生物大分子和細(xì)胞不能從微囊里逸出,而小分子的物質(zhì)、培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)可自由出入半透膜,達(dá)到催化或培養(yǎng)的目的。第八十二張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 微囊化細(xì)胞的模式圖第八十三張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 優(yōu)點(diǎn): 降低剪切力,形成小環(huán)境

26、。 動(dòng)物細(xì)胞微囊化后,與游離細(xì)胞比較,降低了培養(yǎng)時(shí)對(duì)細(xì)胞的剪切力,微囊里實(shí)際上是一種微小的培養(yǎng)環(huán)境,與液體培養(yǎng)差不多,能使細(xì)胞生長(zhǎng)良好。第八十四張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 提高細(xì)胞密度、增加產(chǎn)物濃度和純度。培養(yǎng)過(guò)程中,微囊化能提供很高的細(xì)胞密度,使得產(chǎn)物濃度增加,純度提高。 動(dòng)物細(xì)胞微囊化克服了大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)的一些缺點(diǎn)。 第八十五張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月包埋生物大分子及細(xì)胞必備條件:1.不傷細(xì)胞。微囊化的過(guò)程溫和,快速,不損傷細(xì)胞,盡可能在液體狀態(tài)和生理?xiàng)l件下制備; 2.無(wú)毒。微囊化所用的試劑和膜材料必須對(duì)細(xì)胞無(wú)毒害作用; 第八十六張,PPT共一百八十

27、七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月3.保證物質(zhì)交流。微囊化所形成的膜必須能使?fàn)I養(yǎng)物和代謝產(chǎn)物自由通過(guò),膜的孔徑可以控制; 4.足夠強(qiáng)度。膜應(yīng)具有足夠的機(jī)械強(qiáng)度以抵抗培養(yǎng)過(guò)程中的攪拌,不至使微囊破裂。 目前的方法用得最多的是聚賴氨酸/海藻酸(PLL/ALG)法。第八十七張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月聚賴氨酸/海藻酸(PLL/ALG)微囊化 原理: 海藻酸是以1,4鍵連接的聚醛酸,其主要成份是甘露糖醛酸和古羅糖醛酸。當(dāng)它的水溶液以鈣鹽的形式存在時(shí),則成凝膠狀態(tài);而用螯合劑將鈣離子去除后,則海藻酸又回復(fù)到溶液狀態(tài);當(dāng)海藻酸鈣凝膠用聚賴氨酸處理后,其接觸部分不再被螯合劑去鈣而溶解。第八十八張,

28、PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月微囊化裝置及步驟 : 微囊發(fā)生器 為得到一定大小、非常均一的微囊,制備微囊需要微囊發(fā)生器來(lái)完成。第八十九張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月制備微囊化動(dòng)物的步驟:無(wú)菌收集動(dòng)物細(xì)胞,離心后用生理鹽水洗滌離心收集細(xì)胞,加海藻酸鈉溶液混合均勻,成懸浮液;將懸浮液裝入微囊發(fā)生器,制成微滴第九十張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月凝膠珠懸浮于聚賴氨酸溶液中,使之形成膜;微滴加到CaCl2溶液中形成凝膠珠凝膠珠用生理鹽水洗去殘留的CaCl2生理鹽水洗滌第九十一張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月得到動(dòng)物細(xì)胞微囊凝膠珠加0.05mol/

29、L檸檬酸溶液處理使半透膜的ALG成液態(tài)生理鹽水洗滌懸浮于培養(yǎng)基中培養(yǎng)第九十二張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月微囊半透膜的孔徑?jīng)Q定因素: 主要由聚賴氨酸的分子量決定,一般來(lái)說(shuō)用高分子量的聚賴氨酸(PLL)覆膜孔徑大,PLL分子量低則孔徑小,通常使用4000080000分子量的PLL。 PLL溶液的濃度及處理時(shí)間、溶液的pH值及使用溫度也會(huì)影響膜的孔徑。第九十三張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月微囊機(jī)械性能影響因素:海藻酸的純度高、粘度高容易成囊;甘露糖醛酸和古羅糖醛酸的比例會(huì)影響微囊的形成及機(jī)械性能。含古羅糖醛酸多的海藻酸容易成囊,機(jī)械性能好,不易破碎。第九十四張,PP

30、T共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 微囊化動(dòng)物細(xì)胞的應(yīng)用 1、生產(chǎn)藥物(1)單克隆抗體的生產(chǎn) 微囊化哺乳動(dòng)物細(xì)胞的主要應(yīng)用是單克隆抗體的生產(chǎn)。微囊工藝已生產(chǎn)以克計(jì)的單克隆抗體。微囊膜的孔徑可以控制在能截留10萬(wàn)以上分子量的蛋白質(zhì)的水平上,能截留單克隆抗體在微囊中。 第九十五張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月懸浮培養(yǎng)與微囊培養(yǎng)比較 第九十六張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 優(yōu)點(diǎn):微囊系統(tǒng)更有利于單克隆抗體的生產(chǎn),而且單克隆抗體截留在微囊中,培養(yǎng)獲得的產(chǎn)物濃度和純度均更高。培養(yǎng)基中血清尤其是那些-蛋白能被半透膜排阻在微囊外,使純化更簡(jiǎn)單。 第九十七張,PPT共一百八十

31、七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(2)高值生化藥物的生產(chǎn) 高表達(dá)有工業(yè)價(jià)值的蛋白質(zhì)的重組細(xì)胞更多的用微囊化培養(yǎng)。例: 一種在黑色素瘤細(xì)胞中表達(dá)的分子量為65000的重組蛋白用微囊化培養(yǎng),純化更簡(jiǎn)便。 第九十八張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(3)干擾素的生產(chǎn) 通過(guò)試劑和病毒方法誘導(dǎo)微囊化FS-1和Namalwa細(xì)胞生產(chǎn)干擾素。這兩種細(xì)胞在微囊中生產(chǎn)比懸浮單層培養(yǎng)或單層培養(yǎng)旺盛 第九十九張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月2、在治療及藥物篩選上的應(yīng)用(1)人工器官 微囊化動(dòng)物細(xì)胞在排除免疫反應(yīng)上可能有普遍的意義。人們已將某些器官的細(xì)胞微囊化并植入體內(nèi)以期望能代替這些器官的功能。

32、第一百?gòu)?,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 人工胰是研究得最多的一種,微囊化肝細(xì)胞也被用來(lái)研究人工肝。 例:微囊化大鼠蘭氏胰島細(xì)胞注入大鼠腹腔內(nèi),可用于治療糖尿病。當(dāng)41084.5108個(gè)細(xì)胞/ml微囊注入體內(nèi)后,當(dāng)天就使血糖由400-500mg/dL降至100mg/dL左右,并能長(zhǎng)期維持正常血糖水平,在360天內(nèi)不出現(xiàn)糖尿病癥狀。第一百零一張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(2)抗癌藥的的篩選 微囊化的腫瘤細(xì)胞用于估價(jià)抗癌藥物對(duì)活體的作用。 人的腫瘤細(xì)胞經(jīng)微囊化后注入小鼠腹腔中,服用受檢的抗癌藥,檢測(cè)微囊化的腫瘤細(xì)胞對(duì)藥物的反應(yīng),結(jié)果發(fā)現(xiàn)抗癌藥能穿透微囊的膜作用于微囊中

33、的腫瘤細(xì)胞,抑制和殺滅的水平與其它體外和體內(nèi)測(cè)定的藥效一致。第一百零二張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第三節(jié)體外受精技術(shù)第一百零三張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 體外受精是指通過(guò)人為操作成熟的卵子與精子在合適的體外環(huán)境中完成受精過(guò)程。它的基本原理是在人工模擬體內(nèi)環(huán)境,包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、濕度、氣體、滲透壓、pH等,使卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體中的初級(jí)卵母細(xì)胞成熟,同時(shí)使精子獲能并完成受精。第一百零四張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月人工受精與體外受精的主要區(qū)別?第一百零五張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月人工受精與體外受精的區(qū)別與聯(lián)系第一百零六張,PP

34、T共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 20世紀(jì)60年代初至20世紀(jì)80年代中期,人們以家兔、小鼠和大鼠等為實(shí)驗(yàn)材料,進(jìn)行了大量基礎(chǔ)研究,在精子獲能機(jī)理和獲能方法方面取得很大進(jìn)展。 試管小鼠(1968)、大鼠(1974)、嬰兒(1978)、牛(1982)、山羊(1985)、綿羊(1985)和豬(1986)等相繼出生。 第一百零七張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月體外受精技術(shù)的基本操作程序 哺乳動(dòng)物體外受精的基本操作程序,主要環(huán)節(jié)包括以下幾個(gè)方面:1、卵母細(xì)胞的采集和成熟培養(yǎng)(1)卵母細(xì)胞的采集 活體卵巢上采集:這種方法是借助超聲波探測(cè)儀、內(nèi)窺鏡或腹腔鏡直接從活體動(dòng)物的卵巢中吸取卵母

35、細(xì)胞。 一頭健康母牛每周可獲得510枚卵子。 第一百零八張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(2)母細(xì)胞的選擇 常把未成熟卵母細(xì)胞分為A、B、C和D四個(gè)等級(jí)。A級(jí)卵母細(xì)胞要求有三層以上卵丘細(xì)胞緊密包圍,細(xì)胞質(zhì)均勻;B級(jí)要求卵母細(xì)胞質(zhì)均勻,卵丘細(xì)胞層低于三層或部分包圍卵母細(xì)胞;C級(jí)為沒(méi)有卵丘細(xì)胞包圍的裸露卵母細(xì)胞;D級(jí)是死亡或退化的卵母細(xì)胞。 一般只培養(yǎng)A級(jí)和B級(jí)卵母細(xì)胞。 第一百零九張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(3)卵母細(xì)胞的成熟培養(yǎng) 由超數(shù)排卵采集的卵母細(xì)胞已在體內(nèi)發(fā)育成熟,不需培養(yǎng)可直接與精子受精,對(duì)未成熟卵母細(xì)胞需要在體外培養(yǎng)成熟。 第一百一十張,PPT共一百

36、八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月2、精子的采集與體外獲能 哺乳動(dòng)物精子的獲能方法有培養(yǎng)和化學(xué)誘導(dǎo)兩種方法。牛、羊的精子常用化學(xué)藥物誘導(dǎo)獲能,誘導(dǎo)獲能的藥物常用肝素和鈣離子載體。第一百一十一張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 3、體外受精 將獲能的精子和成熟的卵子置于受精液中共同培養(yǎng),除鈣離子載體誘導(dǎo)獲能外,精子和卵子一般在獲能液中完成受精過(guò)程。受精培養(yǎng)時(shí)間與獲能方法有關(guān)。 第一百一十二張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 4、受精卵的體外培養(yǎng) 體外受精的早期胚胎在體外發(fā)育過(guò)程中,往往會(huì)停滯在某一階段不再發(fā)育,此種現(xiàn)象稱之發(fā)育阻斷。 用體細(xì)胞與胚胎在微滴同培養(yǎng),利用體細(xì)胞生長(zhǎng)

37、過(guò)程中分泌的有益因子,促進(jìn)胚胎發(fā)育,克服發(fā)育阻斷。 第一百一十三張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第一百一十四張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月受精卵的發(fā)育過(guò)程第一百一十五張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第一百一十六張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月動(dòng)物體外受精程序 精子采集 超數(shù)排卵 假孕動(dòng)物準(zhǔn)備精子獲能 卵子采集 胚胎移植 體外受精 胚胎培養(yǎng) 產(chǎn)仔第一百一十七張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 2010年10月4日公布的諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng),獲獎(jiǎng)?wù)邽樗赜小霸嚬軏雰褐浮敝Q的英國(guó)生理學(xué)家羅伯特愛(ài)德華茲。由他開(kāi)創(chuàng)的體外受精技術(shù)使4

38、00多萬(wàn)人得以降生。 第一百一十八張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月英國(guó)科學(xué)家羅伯特愛(ài)德華茲 試管嬰兒之父2010年諾貝爾生理學(xué)、醫(yī)學(xué)獎(jiǎng) 第一百一十九張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 1978年7月25日11時(shí)47分,世界第一位“試管嬰兒”誕生了,名為路易絲布朗。 路易斯的出生再次引起了社會(huì)對(duì)“試管嬰兒”的關(guān)注,很多人對(duì)“試管嬰兒”的健康提出質(zhì)疑,“他們的發(fā)育正常么?”“智力會(huì)不會(huì)有問(wèn)題?”“這項(xiàng)技術(shù)是否值得推廣?”而更多的壓力來(lái)自倫理和社會(huì)方面,為了提高成功率,會(huì)培育多個(gè)胚胎,那么其他未被采用的胚胎又該如何對(duì)待?這種工廠化的生產(chǎn)方式是否會(huì)加速人口過(guò)剩?人類的后代是否

39、可以改造?人類基因組是否也能被設(shè)計(jì)?第一百二十張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 2004年,26歲的路易斯與34歲的韋斯利姆林德喜結(jié)連理。愛(ài)德華茲受邀參加他們的婚禮。2006年年初,路易絲以自然受孕方式懷孕,當(dāng)年12月20日自然分娩產(chǎn)下男嬰卡梅倫。不過(guò),路易絲不是世界首名“試管嬰兒媽媽”。她的妹妹納塔莉1999年自然分娩產(chǎn)下一個(gè)孩子,如今育有兩個(gè)孩子。 第一百二十一張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 我國(guó)第一個(gè)試管嬰兒于1988年在北京誕生,距世界上第一個(gè)試管嬰兒誕生只有10年。 第一百二十二張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第四節(jié)細(xì)胞轉(zhuǎn)基因技術(shù)第一百二十

40、三張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞轉(zhuǎn)基因技術(shù) 是指人類按照自己的意愿有目的,有計(jì)劃,有根據(jù),有預(yù)見(jiàn)地將外源基因?qū)肷锛?xì)胞內(nèi),通過(guò)與染色體基因組進(jìn)行穩(wěn)定的整合,將生物性狀遺傳給后代的技術(shù)。第一百二十四張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 植物轉(zhuǎn)基因 植物轉(zhuǎn)基因是把目的基因與適當(dāng)?shù)妮d體相連接形成重組體DNA分子,并將它導(dǎo)入到寄主細(xì)胞中進(jìn)行增殖與表達(dá)。第一百二十五張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月植物轉(zhuǎn)基因的主要步驟1、目的基因的獲得2、目的基因與載體連接3、重組體DNA分子導(dǎo)入宿主細(xì)胞4、目的基因在宿主細(xì)胞中的復(fù)制與表達(dá)第一百二十六張,PPT共一百八十七頁(yè)

41、,創(chuàng)作于2022年6月植物細(xì)胞轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用1、抗病蟲(chóng)害轉(zhuǎn)基因植物2、抗逆轉(zhuǎn)基因植物 (耐鹽,抗凍,抗旱等)3、抗雜草轉(zhuǎn)基因植物4、轉(zhuǎn)基因花卉植物5、轉(zhuǎn)基因植物食品6、藥用轉(zhuǎn)基因植物(已用于生產(chǎn)各種疫苗,生長(zhǎng)因子,生長(zhǎng)激素等)第一百二十七張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 轉(zhuǎn)基因技術(shù)目前在植物品種改良方面應(yīng)用的主要領(lǐng)域有:(1)抗蟲(chóng)基因工程(2)抗除草劑基因工程(3)抗病基因工程(4)抗逆基因工程(5)延熟保鮮基因工程(6)品質(zhì)改良基因工程(7)雜種優(yōu)勢(shì)利用基因工程。 第一百二十八張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 目前國(guó)內(nèi)外已經(jīng)得到60種以上轉(zhuǎn)基因植物,其中玉米、大

42、豆、油菜、馬鈴薯、番茄和棉花等,已經(jīng)大面積種植。 但國(guó)際上爆發(fā)了關(guān)于轉(zhuǎn)基因植物對(duì)人體和環(huán)境是否安全的爭(zhēng)論。 食用轉(zhuǎn)基因植物是否會(huì)長(zhǎng)腫瘤? 你是支持轉(zhuǎn)基因還是反對(duì)轉(zhuǎn)基因?理由是什么?第一百二十九張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 我國(guó)農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)商品化生產(chǎn)的轉(zhuǎn)基因植物共有六種,包括兩種抗棉鈴蟲(chóng)的棉花,一種耐儲(chǔ)存的番茄,一種抗黃瓜花葉病毒的番茄,一種甜椒,和一種轉(zhuǎn)花色的矮牽牛。 第一百三十張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 指用人工方法將外源基因?qū)雱?dòng)物受精卵或早期胚胎細(xì)胞,使外源基因與動(dòng)物本身的基因組整合,并隨細(xì)胞的分裂而增殖,從而將外源基因穩(wěn)定的遺傳給下一代的工

43、程化動(dòng)物。第一百三十一張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用 動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)基因技術(shù)在生物學(xué)基礎(chǔ)研究、醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)及生物工程等領(lǐng)域的應(yīng)用,已取得相當(dāng)?shù)某晒?研究基因的結(jié)構(gòu)和功能及其表達(dá)與調(diào)控 第一百三十二張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月2建立人類疾病動(dòng)物模型,研究人類疾病基因治療 傳統(tǒng)的藥物篩選方法是進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)實(shí)驗(yàn),而傳統(tǒng)的動(dòng)物模型一般選取與人類某種疾病有類似癥狀的動(dòng)物,其致病機(jī)理常與人體不完全一致,導(dǎo)致篩選結(jié)果與臨床結(jié)果不一致。 利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)可建立敏感動(dòng)物品系和產(chǎn)生與人類相同疾病的動(dòng)物模型來(lái)進(jìn)行藥物篩選,大大提高了準(zhǔn)確性,縮短了試驗(yàn)時(shí)間,降

44、低成本。第一百三十三張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月3改良動(dòng)物品種 轉(zhuǎn)基因乳??僧a(chǎn)出營(yíng)養(yǎng)成分更加豐富合理,生理生化特性更優(yōu)良的牛奶。 轉(zhuǎn)基因綿羊長(zhǎng)出的羊毛光澤亮麗,羊毛脂含量明顯提高。第一百三十四張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 4.提高動(dòng)物繁育速度 導(dǎo)入生長(zhǎng)激素的動(dòng)物表現(xiàn)出生長(zhǎng)周期縮短,體形增大等特點(diǎn)?,F(xiàn)已有成功的轉(zhuǎn)基因小鼠,轉(zhuǎn)基因魚(yú)及經(jīng)濟(jì)動(dòng)物如牛,兔,馬等。第一百三十五張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月5研制生物反應(yīng)器,生產(chǎn)天然活性藥物蛋白 利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作為生物反應(yīng)器生產(chǎn)人類蛋白質(zhì)藥物,其質(zhì)量大大優(yōu)于通過(guò)微生物發(fā)酵獲得的產(chǎn)品,并且生產(chǎn)成本可大大降低

45、。 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生物反應(yīng)器主要包括動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器(生物活性蛋白)和動(dòng)物血液生物反應(yīng)器(非生物活性的融合蛋白)等。第一百三十六張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月問(wèn)題和展望轉(zhuǎn)基因表達(dá)水平低難以控制轉(zhuǎn)基因在宿主基因組中的行為對(duì)基因作用缺乏深入了解制作轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的效率低對(duì)傳統(tǒng)倫理的挑戰(zhàn)對(duì)于人類的生存存在一定的負(fù)面影響第一百三十七張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月轉(zhuǎn)基因動(dòng)物第一百三十八張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月轉(zhuǎn) 基 因 鼠 1999年,美國(guó)普林斯頓大學(xué)的科學(xué)家曾經(jīng)培育出一種轉(zhuǎn)基因“聰明鼠”,它們腦部的NMDA受體較多,該受體能夠激活神經(jīng),幫助記憶。實(shí)驗(yàn)表明

46、,這種轉(zhuǎn)基因鼠學(xué)習(xí)躲避輕度電擊的能力比普通鼠要強(qiáng)。 第一百三十九張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月轉(zhuǎn) 基 因 猴 這只名為“安迪”的轉(zhuǎn)基因猴于2000年10月2日誕生。添加在“安迪”體內(nèi)的是一種綠色熒光蛋白(GFP)標(biāo)志基因。如果動(dòng)物體內(nèi)含有這種蛋白,在受到特定波長(zhǎng)的光照射時(shí),就會(huì)出現(xiàn)特定的熒光。第一百四十張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月轉(zhuǎn)基因魚(yú)2001年5月,新加坡國(guó)大生物系宮知遠(yuǎn)博士把來(lái)自水母的綠熒光蛋白基因和??募t熒光蛋白基因,注射入斑馬魚(yú)的早期胚胎。根據(jù)注射的不同基因,斑馬魚(yú)會(huì)在特別的光照下發(fā)出不同的光芒。 第一百四十一張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于202

47、2年6月轉(zhuǎn)基因蝴蝶 為了能夠更有效地研究蝴蝶翅膀的顏色之迷,美國(guó)巴法羅大學(xué)的生物學(xué)家們近日成功地制造出世界上第一只轉(zhuǎn)基因蝴蝶。有意思的是,這只蝴蝶的一些基因是來(lái)自水母的。 第一百四十二張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月轉(zhuǎn)基因獼猴和普通獼猴外觀上沒(méi)有什么區(qū)別,在特殊光源下,轉(zhuǎn)基因獼猴通體呈現(xiàn)綠色,因?yàn)樗w內(nèi)的綠色熒光蛋白所致。第一百四十三張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月十大神奇轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 2007年末,哈佛大學(xué)的杰夫-里奇曼為首的科研小組在實(shí)驗(yàn)鼠的基因組中導(dǎo)入水母的綠色熒光蛋白基因,熒光鼠腦細(xì)胞的圖片傳遍世界各地,這些五彩斑斕的腦細(xì)胞是單個(gè)的神經(jīng)元,鮮艷的色彩幫助科學(xué)家

48、將它們區(qū)分開(kāi)來(lái)。這種綠色熒光基因?qū)π∈鬅o(wú)害,只起到標(biāo)記作用。1、熒光鼠 第一百四十四張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月2、蜘蛛羊 這種轉(zhuǎn)基因山羊是獨(dú)一無(wú)二的,因?yàn)樗鼈兡墚a(chǎn)生普通的蜘蛛絲。這種構(gòu)成蜘蛛網(wǎng)的同樣物質(zhì)由它們的乳腺產(chǎn)生。如果把很多蜘蛛絲擰成一股繩的話,它足夠強(qiáng)韌,可制成防彈背心、降落傘繩,或者從飛機(jī)到航母等設(shè)備。蜘蛛絲還可被制成人造韌帶和人造腱,支撐組織、骨骼和神經(jīng)細(xì)胞,讓它們?cè)谏L(zhǎng)期間保持穩(wěn)定。 第一百四十五張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月3、抗癌老鼠 這些老鼠內(nèi)轉(zhuǎn)入Par-4基因,產(chǎn)生的一種蛋白質(zhì)能消滅腫瘤細(xì)胞,卻不會(huì)傷害體內(nèi)的健康組織。這種蛋白質(zhì)還能抵抗

49、乳腺癌、胰腺癌和頭頸癌等。至關(guān)緊要的一點(diǎn)是這些老鼠沒(méi)有出現(xiàn)任何明顯的副作用。第一百四十六張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月4、翡翠海參 翡翠海參看起來(lái)更像一片樹(shù)葉,而不是黏滑的腹足軟體動(dòng)物,但它卻是已知第一種在自然演化過(guò)程中發(fā)生轉(zhuǎn)基因現(xiàn)象的物種。這種生物令很多科學(xué)家大惑不解。研究發(fā)現(xiàn)海參中的一種基因與水藻中具有光合作用的基因類似,這表明在過(guò)去的漫長(zhǎng)歲月中,該基因或許通過(guò)自然進(jìn)化的方式從水藻轉(zhuǎn)移到海參的 DNA中。第一百四十七張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月5、熒光魚(yú) 2003年,美國(guó)得克薩斯的一家公司宣布,經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)他們已經(jīng)研制出能發(fā)熒光的小型熱帶魚(yú)“熒光魚(yú)”。這

50、種“光芒四射”的紅色熒光魚(yú),是利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)得到商標(biāo)注冊(cè)的第一種商業(yè)性熒光寵物魚(yú)。改基因后的斑馬魚(yú)散發(fā)出粉紅色熒光,遠(yuǎn)看像金魚(yú)一樣。目前,公司以GloFish的商標(biāo)對(duì)紅色熒光魚(yú)進(jìn)行了注冊(cè),這標(biāo)志著轉(zhuǎn)基因熒光魚(yú)可以被當(dāng)作家庭寵物出售。第一百四十八張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月6. 轉(zhuǎn)基因蚊子 倫敦帝國(guó)學(xué)院的科研小組培育了一種轉(zhuǎn)基因蚊子,其中的雄性具有熒光睪丸,很容易被識(shí)別,然后令其不育。研究者稱,可以將大量這樣的轉(zhuǎn)基因蚊子放到野外 與普通的雌蚊交配,減少瘧蚊的產(chǎn)卵量,從而慢慢減少瘧蚊的數(shù)目。這種轉(zhuǎn)基因蚊子沒(méi)有生育能力,所以不會(huì)將基因遺傳給野生蚊子。第一百四十九張,PPT共一百八十

51、七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月7、超級(jí)老鼠 一種超級(jí)老鼠可以不知疲倦地奔跑數(shù)小時(shí)、壽命更長(zhǎng)、擁有更強(qiáng)繁殖能力、吃得更多而不增加體重美國(guó)科學(xué)家培育出的這種轉(zhuǎn)基因老鼠震撼了世界,引起人們的遐想:培育超級(jí)老鼠的技術(shù)手段能否應(yīng)用于人類,改善人類的能力? 研究者將高度活躍的磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(PEPCK-C)基因注入老鼠胚胎。基因轉(zhuǎn)化的老鼠在運(yùn)動(dòng)時(shí)有效利用身體脂肪產(chǎn)生能量,同時(shí)避免產(chǎn)生大量乳酸。乳酸可導(dǎo)致肌肉痙攣,即使耐力最強(qiáng)的運(yùn)動(dòng)員也會(huì)發(fā)生肌肉痙攣。第一百五十張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月8、產(chǎn)藥的小雞 曾培育出世界上第一只克隆羊“多利”的英國(guó)羅斯林研究所,又取得了一項(xiàng)重大的科學(xué)突破:該

52、研究所的科學(xué)家成功培育出世界上第一批能下“神奇雞蛋”的小雞。這種經(jīng)過(guò)基因改造的小雞所下的蛋能用來(lái)制造治療癌癥和其他疾病的藥物。這一重大科學(xué)突破無(wú)疑為大規(guī)模生產(chǎn)藥物提供了非常廣闊的前景。法國(guó)品種雞名為“依沙褐殼蛋雞”,每年可下約300顆雞蛋。經(jīng)過(guò)基因改造后的“依沙褐殼蛋雞”,其DNA中含有人為加入的人類基因,當(dāng)母雞生下蛋 后,科學(xué)家就能從雞蛋的蛋白中提取用來(lái)制造藥物的蛋白質(zhì)。第一百五十一張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月9、無(wú)所畏懼的老鼠 日本科學(xué)家最近通過(guò)改變老鼠的基因,培育出了一只不怕貓的老鼠。長(zhǎng)期以來(lái),科學(xué)家們一直認(rèn)為,動(dòng)物的恐懼可能是由它們靈敏的嗅覺(jué)喚起的。老鼠擁有大約100

53、0個(gè)嗅覺(jué)感受器基因,而人類只有400個(gè)起作用的和大約800個(gè)不活躍的嗅覺(jué)感受器基因。在用老鼠所做的一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中,研究人員確認(rèn)并移除了老鼠大腦嗅球上的某些感受器,結(jié)果這些老鼠變成了一群無(wú)所畏懼的嚙齒動(dòng)物,在天敵貓面前轉(zhuǎn)來(lái)轉(zhuǎn)去,顯示出極強(qiáng)的好奇心,永遠(yuǎn)不知道危險(xiǎn)的存在。第一百五十二張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月10、有利于改善環(huán)境的基因豬 攜帶細(xì)菌基因的轉(zhuǎn)基因豬可產(chǎn)生更清潔,污染更少的綠肥。這些基因,可幫助豬除去食物中的磷酸鹽,從而有助減少豬畜牧業(yè)中產(chǎn)生的對(duì)農(nóng)業(yè)有害的廢物。 轉(zhuǎn)基因豬經(jīng)過(guò)遺傳修飾,在唾液中產(chǎn)生肌醇六磷酸酶,從而可以吸收植物中的磷,而普通豬是不能消化磷的。對(duì)轉(zhuǎn)基因豬產(chǎn)生

54、的肥料進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn),他們比普通豬的排磷量減少了75%。第一百五十三張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第五節(jié)克隆技術(shù)第一百五十四張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月生殖克隆技術(shù) 先將含有遺傳物質(zhì)的供體細(xì)胞的核移植到去除了細(xì)胞核的卵細(xì)胞中,利用微電流刺激等使兩者融合為一體,然后促使這一新細(xì)胞分裂繁殖發(fā)育成胚胎,當(dāng)胚胎發(fā)育到一定程度后,再被植入動(dòng)物子宮中使動(dòng)物懷孕,便可產(chǎn)下與提供細(xì)胞者基因相同的動(dòng)物。 第一百五十五張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月治療克隆技術(shù) 當(dāng)細(xì)胞發(fā)展到囊胚階段時(shí),不把細(xì)胞放入子宮,而是把其中胚胎干細(xì)胞在體外誘導(dǎo)、分化,胚胎干細(xì)胞是能在體外分化生

55、成各種組織和器官的原始細(xì)胞,因此可以定向發(fā)育成各種組織和器官所需的細(xì)胞。第一百五十六張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月兩者區(qū)別生殖性克隆是“培養(yǎng)個(gè)體” 治療性克隆是“定向分化”第一百五十七張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月應(yīng)用前景:1、利用克隆技術(shù)的細(xì)胞水平治療 2、用于建立人類疾病動(dòng)物模型 3、復(fù)制瀕危的動(dòng)物物種,保存和傳播動(dòng)物物種資源 第一百五十八張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月十二生肖已經(jīng)克隆過(guò)半第一百五十九張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月子 第一只體細(xì)胞克隆鼠卡繆麗娜,1997年10月3日出生。 與克隆羊多利不同的是,來(lái)自日本、英國(guó)、美國(guó)和意大利等國(guó)的科學(xué)家采用了提高克隆成功率的新技術(shù),一下子培育出了多只克隆鼠,而且還獲得了“克隆的克隆”的第二及第三代克隆鼠。體細(xì)胞克隆鼠的誕生同時(shí)也宣告此前對(duì)多利羊身份和克隆技術(shù)的質(zhì)疑結(jié)束。 第一百六十張,PPT共一百八十七頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月丑 能都和加賀是最早的兩頭體細(xì)胞克隆牛,出生在1998年7月5日,其名字均源于誕生地日本石川縣的地名。盡管這兩頭牛早產(chǎn)近40天,但發(fā)育正常。它們的“媽媽”分娩當(dāng)天沒(méi)有異常反應(yīng),但第二天早晨卻食欲不振,下午就死亡。 克隆牛成功的事

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