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文檔簡介
1、金域檢驗(yàn) 臨床基因組檢測中心數(shù)字PCR平臺(tái)介紹及T790M的臨床應(yīng)用一、數(shù)字PCR原理與操作二、數(shù)字PCR的優(yōu)點(diǎn)三、數(shù)字PCR的應(yīng)用四、數(shù)字PCR檢測T790M的的臨床應(yīng)用數(shù)字PCR平臺(tái)介紹及T790M的臨床應(yīng)用數(shù)字PCR是以poison分布為數(shù)學(xué)模型的熒光定量PCR技術(shù)。什么是數(shù)字PCR?泊松分布的參數(shù)是單位時(shí)間(或單位面積)內(nèi)隨機(jī)事件的平均發(fā)生率。適合于描述單位時(shí)間內(nèi)(或單位面積)隨機(jī)事件發(fā)生的次數(shù)。數(shù)字PCR的算法:假設(shè)每個(gè)陽性信號(hào)記為一個(gè)Target copy。因此計(jì)數(shù)得到初始總Target數(shù)為m1,模板密度為=m1/n;n系微反應(yīng)數(shù)或者液滴數(shù)。得到二項(xiàng)分布函數(shù):X B(n, )當(dāng)0.
2、1時(shí), X的分布接近于泊松分布。得到Poisson分布函數(shù):X P(1)數(shù)字PCR的數(shù)學(xué)模型-1泊松分布的概率函數(shù)為:計(jì)算k=0,1,2.的概率(k即每個(gè)微空或液滴中可能存在的模板數(shù)),得到P(0),P(1).由此得到Target的平均數(shù)M。數(shù)字PCR的數(shù)學(xué)模型-2一、數(shù)字PCR原理與操作數(shù)字PCR的簡單操作流程數(shù)字PCR的簡單操作流程二、數(shù)字PCR的優(yōu)勢傳統(tǒng)的雙標(biāo)曲絕對(duì)定量法優(yōu)勢一:無需標(biāo)準(zhǔn)曲線;采用終點(diǎn)法定量優(yōu)勢2:高敏感性,達(dá)到0.1%ARMS vs. dPCR3大技術(shù)平臺(tái)的優(yōu)劣勢比較一、數(shù)字PCR檢測稀有突變?nèi)?shù)字PCR的應(yīng)用三、數(shù)字PCR的應(yīng)用-1 -稀有突變檢測三、數(shù)字PCR的應(yīng)用-2 -CNV檢測三、數(shù)字PCR的應(yīng)用-3 -高通量測序方面四、數(shù)字PCR檢測T790M的的臨床應(yīng)用液體活檢或小組織活檢3rd TKI: osimertinibapproved by FDA in NOV. 20158-16months of P
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