結(jié)核感染T細胞檢測以及意義

1、關(guān)于結(jié)核感染T細胞檢測及意義第一張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月2結(jié)核病現(xiàn)狀結(jié)核病(tuberculosis)是由結(jié)核分枝桿菌(tubercle bacillus)引起的一種慢性肉芽腫性炎。以肺結(jié)核最常見，死亡人數(shù)僅次于艾滋病。也可見于全身各器官。肺外結(jié)核占整個發(fā)病率的10%-20%，死亡率占結(jié)核病全部死亡率的14.1%-17.6%。全世界約三分之一的人群感染，2014年全球結(jié)核病報告顯示：2013年有900萬新發(fā)病例， 150萬人死亡。中國是結(jié)核病高發(fā)區(qū)，發(fā)病數(shù)居全球第二，現(xiàn)有600萬活動性肺結(jié)核，且患者人數(shù)逐年增加，始終位居全國甲乙類傳染病的前列。電鏡下的結(jié)核桿菌第二張，PPT共

2、四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月World Health Organization.Global tuberculosis control:epidemiology,strategy, financing:WHO report 2011(WHO/HTM/TB/2011.16).Geneva:WHO,20112010年新發(fā)880萬例結(jié)核患者，59%在亞洲，26%在非洲第三張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月發(fā)病人群前五位的國家India(2.0 million2.5 million) (26%) China (0.9 million1.2 million)South Africa (0.40

3、 million0.59 million)Indonesia (0.37million0.54 million) Pakistan (0.33 million0.48million).38%第四張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月結(jié)核病現(xiàn)狀及危害-傳播范圍廣第五張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月World Health Organization.Multidrug and extensively drug-resistant TB (M/XDR-TB): 2010 global report on surveillance and response. WHO/HTM/TB/201

4、0.3.逐年增加全球27個MDR-TB流行嚴重的國家之一，中國尤其嚴重第六張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月 HIV 感染和艾滋病破壞了機體的免疫系統(tǒng)，加劇了結(jié)核的發(fā)病， 1/3HIV病人死于結(jié)核 多菌耐藥的結(jié)核菌感染率增加 貧困、移民等 細菌學(xué)涂片率低，2/3TB病人菌陰性原 因第七張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月結(jié)核發(fā)病機理LTBI結(jié)核分枝桿菌（MTB）暴露感染自愈90%不發(fā)展為結(jié)核病Latency 2-5%疾病進展1%活動性結(jié)核病細菌全部被清除一直存在活菌需預(yù)防性服藥不需要預(yù)防性服藥Latency 潛伏9%復(fù)燃注：感染后發(fā)病與否和機體易感性有關(guān)！5-10%HIV10%活

5、動性結(jié)核： 發(fā)病狀態(tài)潛伏性結(jié)核感染（LTBI）：是宿主感染結(jié)核桿菌后尚未發(fā)病的一種特殊狀態(tài)未根治第八張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月結(jié)核病的免疫主要是細胞免疫Dheda K, et al.The immunology of tuberculoisis:From bench to beside.Respirogy,2010,15:433-450第九張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月10耗時長4-8周檢出率低50%涂陰檢出低22%-38%肺外結(jié)核難結(jié)核檢測的方法比較結(jié)核診斷X射線分子診斷涂片鏡檢細菌培養(yǎng)特異性差誤診肺炎、肺癌肺外結(jié)核難 操作復(fù)雜技術(shù)要求高涂陰檢出低34%肺外結(jié)核難

6、 不能區(qū)分NTM檢出率低20%肺外結(jié)核難假陽/假陰多；（涂陰45%/35%）WHO建議禁用抗體檢測TST（結(jié)核菌素皮試）不能區(qū)分卡介苗接種者不能區(qū)分NTM48-72小時復(fù)診取樣操作簡便檢出率高（活動結(jié)核和潛伏結(jié)核）區(qū)分BCG、NTM檢測肺外結(jié)核IGRA方法接觸史臨床癥狀病原/病理第十張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月11TB-IGRATuberculosis（結(jié)核TB）Interferon（干擾素）Gamma（ ）Release（釋放）Assay（測定）原理: 感染者體內(nèi)被結(jié)核菌（TB）抗原致敏的效應(yīng)T細胞，在體外受到相同抗原的刺激（在APC輔助下）后，會分泌大量IFN- (細胞因子)

7、。通過IFN- 的檢測，判斷結(jié)核感染情況。第十一張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月contents目錄1. 結(jié)核病的診斷現(xiàn)狀2. TB-IGRA介紹3. TB-IGRA的臨床應(yīng)用4. TB-IGRA檢測方法及結(jié)果解釋第十二張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月APCT cellTB-IGRA方法介紹細胞因子活化/細胞因子細胞因子ELISAELISPOT流式細胞術(shù)細胞因子活化標志物IGRAsIFN-g release assayTNFaIFNgCK體外刺激：RD1抗原 原理: 機體內(nèi)被結(jié)核菌抗原致敏的效應(yīng)T細胞，在體外受到相同抗原的刺激（在APC輔助下）后，會分泌大量IFN- (細胞

8、因子)。通過IFN- 的檢測，判斷結(jié)核感染情況。第十三張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月兩種TB-IGRA比較高孟秋,劉菲,紀濱英等.兩種-干擾素釋放分析在結(jié)核病臨床診斷中的比較研究.中華結(jié)核和呼吸雜志，2012，35（10）：762-765第十四張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月TB-IGRA 產(chǎn)品特性高靈敏度，檢出率85%以上高特異性RD1區(qū)編碼的ESAT-6和CFP-10兩個特異性抗原該抗原具 有較強的Thl細胞免疫原性，且在所有制備卡介 苗的菌株及環(huán)境中絕大多數(shù)非結(jié)核分枝桿菌中均不存在該抗原，不受卡介苗和非分支桿菌影響TNFaIFNgCK第十五張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作

9、于2022年6月國內(nèi)外相關(guān)研究TB-IGRA快速簡便，是一種值得推廣的檢測方法：張華，黃圣文，羅振元.結(jié)核分枝桿菌r-干擾素體外釋放定量試驗診斷結(jié)核感染的臨床應(yīng)用.中華醫(yī)學(xué)院感染學(xué)雜志 2009年第19卷第14期第十六張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月國內(nèi)外相關(guān)研究國內(nèi)文章sensitivity結(jié)核分枝桿菌-干擾素體外釋放定量試驗診斷結(jié)核感染的臨床應(yīng)用90.24%（74/82）TB-IGRA與TST檢測菌培陽性肺結(jié)核患者比較80.3%（118/147)-干擾素釋放試驗診斷結(jié)核分枝桿菌感染的臨床意義88.64%（39/45）結(jié)核分枝桿菌相關(guān)-干擾素體外釋放試驗在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用價值90

10、.7%（243/268）兩種結(jié)核分枝桿菌相關(guān)-干擾素定量檢測試劑盒檢測結(jié)核分枝桿菌感染結(jié)果比較研究90.9%（290/319）體外釋放酶聯(lián)免疫法檢測結(jié)核桿菌-干擾素的實驗研究89.11%（90/101）干擾素釋放酶聯(lián)免疫法（TB-IGRA）用于檢測結(jié)核分枝桿菌的優(yōu)越性96.12%(99/103)體外-干擾素檢測結(jié)核分枝桿菌不同方法的應(yīng)用價值比較90.1%(308/342干擾素體外釋放酶聯(lián)免疫法在結(jié)核潛伏感染診斷中的價值88.6%(39/44)國外同類試劑優(yōu)勢A Three-Way Comparison of Tuberculin Skin Testing, QuantiFERON-TB Gol

11、d and T-SPOT.TB in ChildrenLatent TB檢出高Positive Tuberculin Skin Test or Interferon-Gamma Release Assay in Patients with Radiographic Lesions Suggesting Old Healed TuberculosisLatent TB檢出高Estimating diagnostic accuracy of tests for latent tuberculosis infection without a gold standard among healthcar

12、e workers特異性93.6%Clinical Utility of Interferon Gamma Assay in the Diagnosis of Tuberculosis靈敏度90%,特異性97%第十七張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月contents目錄1. 結(jié)核病的診斷現(xiàn)狀2. TB-IGRA介紹3. TB-IGRA的臨床應(yīng)用4. TB-IGRA檢測方法及結(jié)果解釋第十八張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月臨床應(yīng)用案例肺結(jié)核輔助診斷：某院呼吸科病人，男臨床癥狀：發(fā)熱1周，咳嗽檢測結(jié)果：TB-IgG(-)，TB-IGRA（+）T-N的值是21.5pg/ml結(jié)果分析：

13、TB-IgG靈敏度低，易漏檢。臨床診斷：肺結(jié)核備注：2011年，WHO建議不再使用結(jié)核抗體檢測結(jié)核感染第十九張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月臨床應(yīng)用案例肺外結(jié)核輔助診斷：某院感染科，女，75歲 臨床癥狀：發(fā)熱數(shù)日，胸痛，干咳檢測結(jié)果：X射線胸腔積液影像，積液涂片（-）、積液培養(yǎng)（-）、TB-IGRA T-N 350pg/ml，積液單核細胞增多，血沉快結(jié)果分析：對于肺外結(jié)核的診斷，涂片與培養(yǎng)的陽性率極低，TB-IGRA（+），結(jié)合其他非特異輔助指標可明確診斷肺外結(jié)核。臨床診斷：結(jié)核性胸膜炎第二十張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月臨床應(yīng)用案例肺炎與肺結(jié)核的鑒別診斷：某醫(yī)院呼吸內(nèi)科

14、，男，59歲臨床癥狀：肺部有胸水，高燒發(fā)熱，初步認定肺炎，抗生素治療1周不見效果，高度懷疑結(jié)核。檢測結(jié)果：痰涂片（-），結(jié)核抗體（-），TB-IGRA（-）結(jié)果分析：傳統(tǒng)結(jié)核檢測檢出率在20%-40%，靈敏度低。IGRA檢出率在90以上，陰性排除意義高于涂片和抗體?；颊呃^續(xù)用藥3周，病情好轉(zhuǎn)。臨床診斷：肺炎第二十一張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月22MTB與其他桿菌感染的鑒別診斷：某院呼吸內(nèi)科病人，男臨床癥狀：發(fā)熱、咳嗽、咳痰、呼吸困難，乏力，多汗，關(guān)節(jié)疼痛檢測結(jié)果：痰涂片（-），菌培（-），肺部X射線可見肺結(jié)節(jié)，胸腔積液診斷過程：該院診斷為結(jié)核但治療無好轉(zhuǎn)，患者轉(zhuǎn)院檢測IGRAs（

15、-），試管凝集實驗+，布病抗體+，確診布氏桿菌感染，與該院打官司勝訴。結(jié)果分析：由于痰涂片和菌培檢出率低，陰性也未能引起重視，只憑X片和癥狀診斷為結(jié)核并治療。治療無效后，病人轉(zhuǎn)院，檢測IGRAs陰性，考慮排除結(jié)核，且病人為牧民，確診布氏桿菌病。官司敗訴后，該院才開始重視IGRAs檢測。最終確診：布氏桿菌病臨床應(yīng)用案例第二十二張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月MTB與NTM的鑒別診斷：某院感染科病人，男臨床癥狀：發(fā)熱1周，咳嗽，少量痰檢測結(jié)果：兩次痰涂片（+），兩次TB-IGRA（-），肺部X射線無異常，后經(jīng)菌培鑒定為菌培（-）結(jié)果分析：痰涂片不能區(qū)分非結(jié)核分枝桿菌，造成假陽性，而TB-

16、IGRA與菌培結(jié)果相符，對結(jié)核分枝桿菌有很好的特異性。臨床診斷：鳥型分枝桿菌感染臨床應(yīng)用案例第二十三張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月NTM（非結(jié)核分枝桿菌）比例增高2000 年全國流調(diào)分離的抗酸桿菌菌株中，NTM 菌株占11. 1% ，其中90% 為非結(jié)核分枝桿菌肺病。NTM 肺病的臨床表現(xiàn)與結(jié)核病相似， 既可有全身中毒癥狀，亦有局部損害表現(xiàn)。但癥狀和體征缺乏特異性，20%-50% 的病人無明顯癥狀，除非做菌型鑒定，憑臨床表現(xiàn)難與肺結(jié)核病相鑒別。PPD 試驗：弱陽性多見，但不能鑒別MTB和NTM感染。 細菌學(xué)檢查：常規(guī)痰涂片無法鑒別MTB和NTM。培養(yǎng)特性：固體培養(yǎng)基上，NTM菌落常

17、光滑，部分菌落有色素產(chǎn)生，生長迅速，且在含PNB(對硝基苯甲酸)和含TCH (噻吩二羧酸肼)選擇性培養(yǎng)基上均可生長，而結(jié)核分枝桿菌只在TCH選擇性培養(yǎng)基上生長。第二十四張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月06.16.201125 使用抗TNF藥物前排查結(jié)核的意義發(fā)病率 /100.000 患者/年Dixon W G et al. Ann Rheum Dis 2010;69:522528.Tubach et al. Arthritis & Rheum 2009; 60: 1884-1894發(fā)病率 /100.000 患者/年第二十五張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月潛伏性感染監(jiān)控某中學(xué)

18、高三年級小規(guī)模結(jié)核爆發(fā)初始病例1例（7班）6月初第一批疫情5例（7班）8-9月第二批疫情10例（8例7班）9月對師生采血進行IGRA檢測IGRA陽性者進行預(yù)防性服藥疫情控制自行住院全年級師生胸透，胸透陰影預(yù)防性服藥全年級師生PPD試驗疫情發(fā)展階段結(jié)核病例及分布疫情時間疫情初處理一起小規(guī)模結(jié)核暴發(fā)流行的調(diào)查與控制第二十六張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月潛伏性感染、抗結(jié)核治療監(jiān)控定量檢測干擾素釋放強度，可用于持續(xù)監(jiān)控：第二十七張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月抗結(jié)核治療效果輔助評估Kobashi等利用IGRA對50例結(jié)核患者的治療進行追蹤檢測：治療開始后，結(jié)核患者中IGRA的敏感

19、性和反應(yīng)強度均有明顯的下降趨勢第二十八張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月綜上，TB-IGRA： 高特異性，高靈敏性，體外，全血，定量檢測應(yīng)用方向：肺結(jié)核輔助診斷肺外結(jié)核輔助診斷結(jié)核感染排查潛伏性感染監(jiān)控，抗結(jié)核治療追蹤TB-IGRA的臨床應(yīng)用第二十九張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月TB-IGRA應(yīng)用匯總肺結(jié)核的輔助診斷，尤其是細菌學(xué)檢測陰性的肺結(jié)核的輔助診斷：TB-IGRA從細胞水平上檢測結(jié)核感染，檢出率高，早期感染即可檢出，實現(xiàn)早診斷早治療。肺外結(jié)核的輔助診斷：TB-IGRA取靜脈血進行檢測，克服肺外結(jié)核患者痰樣找不到結(jié)核菌，病灶部位取樣難的問題。呼吸系統(tǒng)疾病與結(jié)核的鑒別診

20、斷：發(fā)熱、咳嗽、咳痰2周；咯血；胸痛等癥狀疑似結(jié)核，胸片/CT不能明確診斷者；抗炎治療治療效果不佳患者的結(jié)核排查，陰性結(jié)果在很大程度上可以排除結(jié)核。第三十張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月2周以上不明原因發(fā)熱病人的結(jié)核感染排查：有研究發(fā)現(xiàn)其中20%是結(jié)核引起的，大部分是肺外結(jié)核。高危人群的結(jié)核感染篩查：如使用生物制劑/免疫抑制劑、大劑量激素患者，HIV患者，糖尿病患者，血液病和癌癥放化療之前患者進行結(jié)核篩查，以防陳舊性結(jié)核、潛伏性結(jié)核爆發(fā)以及近期結(jié)核感染?？菇Y(jié)核治療效果跟蹤以及潛伏性結(jié)核定期監(jiān)控：TB-IGRA結(jié)果是一個定量值，活動性結(jié)核患者隨治療進行陽性強度降低甚至轉(zhuǎn)陰；潛伏感染患者

21、若發(fā)生陽性強度明顯升高，有發(fā)展成活動性結(jié)核風險。流調(diào)顯示有85%90%新診斷的活動性肺結(jié)核由潛伏性結(jié)核演變而來。第三十一張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月已有25個國家發(fā)布了IGRAs 應(yīng)用指南： 美國、加拿大、英國、巴西、法國、西班牙、意大利、德國、澳大利亞、葡萄牙、愛爾蘭、瑞士、丹麥、挪威、芬蘭、捷克、斯洛伐克、波蘭、保加利亞、克羅地亞、沙特、 奧地利、南韓、日本、中國潛伏性感染和活動性結(jié)核的輔助診斷（美國CDC，英國NICE ，中國） 疑似結(jié)核的輔助診斷，陰性結(jié)果排除感染（中國）在所有人群中可以完全代替PPD試驗（美國CDC，日本厚生?。?接受抗TNF-a治療前必須用IGRA進行

22、結(jié)核桿菌感染的篩查，PPD篩查不再使用（瑞士衛(wèi)生署和肺科協(xié)會） 兩個國際組織WHO、ECDC也發(fā)布了應(yīng)用指南。萬泰TB-IGRA試劑是“中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標準結(jié)核分枝桿菌-干擾素體外檢測方法”中唯一提到的結(jié)核檢測試劑。第三十二張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第三十三張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月contents目錄1. 結(jié)核病的診斷現(xiàn)狀2. TB-IGRA產(chǎn)品介紹3. TB-IGRA的臨床應(yīng)用4. TB-IGRA檢測方法及結(jié)果解釋第三十四張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月萬泰TB-IGRA北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司國家傳染病診斷試劑與疫苗工程技術(shù)研

23、究中心廈門大學(xué)研制歷經(jīng)6年，2012年4月獲得SFDA認證國食藥監(jiān)械（準）字2012第3400557號第三十五張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月TB-IGRA檢測方法第三十六張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月陰性對照管N陽性對照管P檢測管T培養(yǎng)液無刺激原培養(yǎng)液刺激抗原培養(yǎng)液PHATB特異性刺激抗原（RD1區(qū)：ESAT-6、CFP-10）無刺激效應(yīng)非特異性刺激抗原（PHA）評估-IFN升高水平評估-IFN本底水平評估T淋巴細胞活性ELISA定量分析第三十七張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月TB-IGRA結(jié)果判定T：測試培養(yǎng)管（T）含量值N：本底對照培養(yǎng)管（N）含量值P：陽性對照培養(yǎng)管（P）含量值 NP-NT-N結(jié)果判定結(jié)果解釋400任何值14 且 N/4陽性感染結(jié)核分枝桿菌（結(jié)核活動期感染、潛伏感染）2014 或 N/4陰性未感染結(jié)核分枝桿菌2014 或 400任何值任何值不確定第三十八張，PPT共四十六頁，創(chuàng)作于2022年6月TB-I