免疫學檢查的課件

1、免疫學檢查(Immunologic test)一、檢查內(nèi)容1. 評估機體的免疫功能狀態(tài)2. 檢測與自身免疫病相關(guān)的抗體或致敏T 細胞3. 檢測與過敏性疾病相關(guān)的變應(yīng)原或IgE抗體4. 檢測某些致病微生物的抗原或抗體5. 檢測某些腫瘤抗原、激素含量二、常用的免疫檢查方法1. 沉淀試驗2. 凝集試驗3. 補體結(jié)合試驗4. 中和試驗5. 熒光免疫技術(shù)6. 酶免疫技術(shù)7. 放射免疫技術(shù)8.發(fā)光免疫技術(shù)9. 時間分辨熒光免疫技術(shù)10. 流式細胞儀分析技術(shù)11. 分子生物學分析技術(shù)三、機體免疫功能檢查(一)非特異性免疫功能測定1. 血清蛋白區(qū)帶電泳- + 白蛋白 1、2球蛋白 1、2球蛋白 -球蛋白 血清

2、蛋白區(qū)帶電泳示意圖譜2. 外周血中性粒細胞計數(shù)，趨化、吞噬、殺菌功能測定 趨化功能降低：易反復(fù)感染、齒齦炎、中耳炎、 Chediak-Higashi綜合征、遲鈍性白細胞綜合征、有肌蛋白功能不全、高于IgE綜合征等。 吞噬功能降低：中性粒功能異常綜合征、補體所致調(diào)理缺陷癥、膜糖蛋白缺陷癥、慢性肉芽腫、肌動蛋白功能不全等。 殺菌功能降低：慢性肉芽腫、多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、慢性粒白血病、糖尿病等三、機體免疫功能檢查3. 血清總補體、C3、C4、B因子、溶菌酶測定補體降低：自身免疫病，易反復(fù)感染等補體增高：風濕熱急性期、結(jié)節(jié)性多動脈炎、皮肌炎、心梗、Reiter綜合征等B因子降低：表示補體旁路途

3、徑激活溶菌酶：見于白血病、腎臟疾??；見于腫瘤患者三、機體免疫功能檢查2. B淋巴細胞功能檢查血清IgG含量測定特異性抗體產(chǎn)生能力的體內(nèi)試驗白喉類毒素、破傷風類毒素、肺炎球菌多糖抗原、流感嗜血桿菌多糖抗原接種后57天能檢測到IgM型抗體，再次免疫后1周產(chǎn)生IgG型抗體。特異性抗體產(chǎn)生能力的體外試驗洗滌+ +低倍鏡下計數(shù)酶點數(shù)(抗體生成細胞數(shù))Ag吸附醋纖膜外周血單個核細胞5%CO2376h生物素 溫育抗 體 洗滌酶復(fù)合物底物三、機體免疫功能檢查3. 淋巴結(jié)或組織活檢淺皮質(zhì)區(qū)B細胞的居住地深皮質(zhì)區(qū)T細胞的居住地髓 質(zhì)漿細胞(受抗原刺激)/髓索及髓竇(靜止淋巴結(jié))直腸粘膜固有層有豐富的漿細胞和IgA

4、抗體分泌細胞常見與體液免疫功能缺陷的疾病1. 性聯(lián)無丙種球蛋白血癥2. 普通變異型免疫缺陷病3. 高IgM綜合征4. 選擇性IgA缺陷病5. IgG亞類缺陷癥三、機體免疫功能檢查(三)細胞免疫功能檢查1. T細胞數(shù)量檢查CD3+ 成熟T細胞(69.44.86%)CD4+ 輔助T細胞、誘導(dǎo)T細胞、殺傷T細胞、單核吞噬細胞(41.175.28%)CD8+ 抑制T細胞、毒性T細胞、反抑制T細胞 (24.58 4.02%)2. T細胞功能檢查T細胞轉(zhuǎn)化試驗(60%80%)抑制性T細胞功能檢測(40% 10%)T細胞介導(dǎo)細胞毒試驗三、機體免疫功能檢查3.mIL-2R細胞檢測mIL-2R陽性細胞是T細胞活

5、化的標志(正常人的PBMC靜息狀態(tài)為2%6%，PHA誘導(dǎo)培養(yǎng)后為22%39%) 靜息時過度表達提示有免疫病理損害 誘導(dǎo)后表達率降低提示患者細胞免疫功能不全4.嬰幼兒側(cè)位胸片若不見胸腺陰影，提示有T細胞缺陷5.淋巴結(jié)活檢若皮質(zhì)區(qū)和副皮質(zhì)區(qū)界線不清，生發(fā)中心消失，提示有T細胞缺陷6.成人PPD 5u ,4872h后紅腫、硬結(jié)或直徑28%，CD4+/CD8+3.0，IgG、IgM、IgA2. 血清sIL-2R，SACE3. Kveim抗原試驗(90%陽性)支氣管哮喘1. 過敏原皮膚試驗呈陽性(bronchial asthma)2. 放射性過敏原吸附試驗(RAST)或ELISA呈陽性3. 嗜堿粒細胞脫

6、顆粒試驗(HBDT)(70%陽性)4. 血漿組胺(正常: 1.82.7mol/L) 尿組胺(正常：15%；(idiopathic pulmonary2. 血清r-球蛋白，IgA、IgM、 IgG、fibrosis, IPE) RF(+)、ANA(+)外源性變應(yīng)性肺泡炎1. 血清特異性抗原沉淀抗體(90% (+)(extrinsis allergic alreolitis, EAA)2. BALF中淋巴細胞，肥大細胞, CD4+/CD8+,s IL-2R ,透明質(zhì)酸酶 3. 血清sIL-2R、CRP、RF(+)、Ig3.常見的器官特異性自身免疫病及異常免疫指標肺嗜酸粒細胞浸潤癥1. 外周血及痰中

7、嗜酸粒細胞計數(shù)(pulmonary infiltration2. 血清及BALF中IgE，Igwith eosinophilia, PIE)3. 過敏原皮膚試驗呈陽性慢性淺表性胃炎(chronic surface 血及胃液中胃壁細胞抗體(PCA)gastritis, CSG) (23.6%67.5%(+)慢性萎縮性胃炎內(nèi)因子抗體(IFA)(53%(+)(chronic atrophic gastritis, CAG)潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis, UC)血清ANCA(+)(UC可達48%88%),克羅恩病(Crohn disease)Crohn病為7%25%)3.常見的器

8、官特異性自身免疫病及異常免疫指標自身免疫性肝炎1. 血清ANA(74%(+)，SMA（86% 91% (autoimmune (+)），肝腎微粒體(LRM)-1抗體(+)，Ig hepatitis) 2. 抗細胞色素P450D6抗體(+)IgA腎病1. 血清IgA-FN聚合物，IgA，IgA(IgA nephropathy)型RF(30%以上(+) )，IgA-CIC (33%(+)2. 腎活檢組織冰凍切片有IgA沉積3. 尿Tamm-Horsfall(TH)蛋白包裹紅細胞60%新月體性腎小球腎炎1. 血清抗腎小球基底膜(GBM)抗體(+)，(crecentic glomeru-ANCA(+)

9、，CIClonephritis)2. 腎活檢顯示新月體內(nèi)有大量纖維蛋白沉積3.常見的器官特異性自身免疫病及異常免疫指標膜性增生性腎小球腎炎1. 血清CIC，CH50, C3, C1q ，(membranopnoliferativeC4Glomerulonephritis, MPGN）2. 尿液免疫復(fù)合物(UIC)3. 腎活檢顯示腎小囊腔和腎小管基底膜有C3沉積腎小管間質(zhì)性腎炎1. 血清抗腎小管基底膜(TBM)抗體(+)，(tubwlointerstitial抗TH抗體(+)，抗集合管抗體(+)nephritis, TIN) 2. 尿TH蛋白1. 血NK細胞活力,CD3+ 、CD4+ 、心肌炎(

10、myocarditis) CD8+，C3 ，T細胞轉(zhuǎn)化率2. 血清ANA(+)、抗心肌抗體(+)、RF(+)心肌病(myocardial diseases)血清抗ADP/ATP載體(ANT)抗體(+)急性炎性脫髓鞘性多發(fā)性神經(jīng)病 (acute inflammatory demyelinatingCSF中抗病原體抗體(+)，糖脂抗體(+), 硫Polyneuropathy, AIDP or Guillain-脂抗體(+)，蛋白，細胞數(shù)正常。Barre syndrome, GBS)3.常見的器官特異性自身免疫病及異常免疫指標重癥肌無力血清抗AchR抗體(+)，抗橫紋-銀環(huán)蛇(myasthenia gravis, MG)毒、川楝毒、-蝮毒素抗體(+)，IL-2, C3全植物神經(jīng)功能不全血清抗交感神經(jīng)組織抗體(+)(pandysautonomia)毒性彌漫性甲狀腺腫血清甲狀腺球蛋白抗體(TGA)(30%(+) )(Graves disease)甲狀腺微粒體抗體 (TMA)(1:80，d1:160，或1周后抗體有4倍增高，可診斷為傷寒感染。若O121:80，a/b/c1:80，或1周后抗體有4倍增高，可診斷甲/乙/丙型副傷寒感染。Vi抗原有陽性反應(yīng)，提示病人為傷寒帶菌者。若O12 對照血清查30%為陽性3、HLAA、B、C、PK、PQ抗原分型被檢淋巴