吸光光度法的靈敏度與準確度概述及表現(xiàn)方法

1、吸光光度法的靈敏度與準確度概述及表現(xiàn)方法122.3.1 靈敏度的表示方法 摩爾吸光系數(shù) () A= b c =A/bc (Lmol-1cm-1) 越大, 靈敏度越高: 105為高靈敏度.3 2. Sandell(桑德爾)靈敏度 (S)定義：截面積為1cm2的液層在一定波長或波段處，測得吸光度為時所含物質的量。用S表示，單位：gcm-2A= bc= bc S小靈敏度高; 相同的物質, M小則靈敏度高.變換單位:bcmcmol/L=bcM106 g/1000cm24例1 鄰二氮菲光度法測鐵(Fe)=1.0mg/L, b=2cm , A=0.38 計算 、S 和解： c(Fe)=1.0 mg/L=1

2、.010-3/55.85 =1.810-5(molL-1)S=M/ =55.85/1.1104=0.0051 (g/cm2)或5 c =1.0mg/L=1.010-3 g /1000mL = 1.010-4 g/100mL6例2 比較用以下兩種方法測Fe的靈敏度.B. 用4,7-二苯基鄰二氮菲光度法測定鐵5332.2104 Lmol-1cm-1S = 55.85/(2.2104)0.0025 (gcm-2)B方法比A方法的靈敏度高.A. 用鄰二氮菲光度法測定鐵時，5081.1104 Lmol-1cm-1S = 55.85/(1.1104)0.0051 (gcm-2)72.3.2 準確度儀器測量

3、誤差100806040200T/% c1 c2 c3 T T T-透光率讀數(shù)誤差 cc1c1c2c2c3c310 4;選擇性好;顯色劑在測定波長處無明顯吸收, 對照性好, max 60 nm;反應生成的有色化合物組成恒定，穩(wěn)定;顯色條件易于控制，重現(xiàn)性好.142.4.2 顯色條件的確定c(R)c(R)c(R)1. 顯色劑用量（c(M)、pH一定）Mo(SCN)32+ 淺紅Mo(SCN)5 橙紅Mo(SCN)6- 淺紅Fe(SCN)n3-n152. 顯色反應酸度（c(M)、 c(R)一定）pH1pH * *n * * n *38躍遷 max(nm) *150(200)n *200100300n

4、*20080010100 *200104190CH2CH2 CH2135 （CC）CH3CH2CH3135 （CC）CH3CH3125 （CH）CH4max（nm）飽和烴類 *躍遷(飽和烴類)（作溶劑）39max(nm) max(nm)H2O1671480CH3OCH31842520CH3OH183150CH3NH2215600CH3Cl173200(CH3)2NH220100CH3Br204200(CH3)3N227900CH3I258365 n * 躍遷（含具n電子的雜原子）40n* 躍遷（帶孤對電子的雜原子與其他鍵共軛）280300飽和醛酮1000( n*)16( n*)186280CH

5、3COCH3異辛烷22280CH3NO2EtOH5339CH3NNCH3H2O60214CH3CONH2EtOH41204CH3COOHmax(nm）介質41* 躍遷（不飽和烴類)6000173CH三CH14000175CH2CH2max(nm）* 躍遷的max短， 大, n* 躍遷的max長， 小.42電荷遷移躍遷（荷移光譜）特點：譜帶寬,吸收強度大,max處的可大于104 。Fe3SCN- Fe2SCN （分子內(nèi)氧化還原）hRN1R2RhDADA-e給予體e接受體e給予體e接受體N1R2-+hCROCRO-+h432.6.2 有機分子中的生色團與助色團嚴格地說，只有含有不飽和基團或孤對電子

6、的基團，才是生色團（ n*， *）CC，CH ， * 150nmn*， *:CO CCO:n*， *CO，CSn* ,* 200nm:CN，CCl：:CC ,C C * ,* 200nm （孤立雙鍵 200nm）生色團類 型44生色團舉例-1221000275190(CH3)2C=O12.51000289182蒸氣H3CCHO CO4500172蒸氣C2H2 C三C15530171氣態(tài)C2H4 CC125CH4CH135C2H6CCmax溶劑例生色團45生色團舉例-2max溶劑例生色團15.84400279202己烷CH3NO2NO2160295MeOH乙酰胺CONH260204水乙酸乙酯CO

7、OR34240庚烷CH3COClCOCl41200EtOHCH3COOHCOOH200COH， CSHCN，CCl46生色團舉例-3max溶劑例生色團2257000261206.5水甲苯2057400254203.5水苯200238異辛烷C2H5CHNC5H6 CN25343水反式偶氮甲烷NN7417乙醚重氮甲烷NNCH347不飽和基團助色效應大256 261 264 282 320 276(K帶) 苯環(huán)B帶max(nm)CH3ClCH=CH2CCH3O常見助色團及其助色效應(紅移max增大):FCH3ClBrOHOCH3NH2NHCH3 N(CH3)2 NHC6H5O例： CH3Cl CH3Br CH3Imax(nm) 172 204 25848反助色團大多是吸電子基團（藍移）NH3SO2NH2COOCNCOOHCOOCH3 COCH3 max藍移水乙醇己烷A59溶劑極性增大， * 吸收紅移CH3溶劑效應無溶劑效應E1E2E2E1max紅移異亞丙基丙酮例： 異亞丙基丙酮305309315329n *243237238230 *水甲醇