色譜柱規(guī)格的選擇

1、要選擇一根合適的商用毛細(xì)管柱，主要需要考慮以下幾個(gè)因素：固定相、內(nèi)徑、柱長(zhǎng)、膜厚。下面分別就 這些因素加以討論。1、固定相色譜理論上講，選擇固定相首選遵循相似性原則，即：用非極性固定相分析非極性物質(zhì)，用極性固定相分 析極性物質(zhì)，用含芳香基團(tuán)的固定相分析芳香族化合物。在填充柱時(shí)代，這個(gè)想法是非常正確的，因?yàn)槟?個(gè)時(shí)候，分離度是首先需要把握的關(guān)鍵因素，分不開(kāi)，就沒(méi)辦法想其它。它的理由在于塔板理論的推論， 即：組分在固定相中有越大的溶解度，同樣的溶解度差異就會(huì)產(chǎn)生越大的分離度。但是在毛細(xì)管色譜時(shí)代，分離度不再始終是分析的首選問(wèn)題。毛細(xì)管具有幾十萬(wàn)塊塔板，如此大的柱效率， 以至于不再需要充分考慮分離問(wèn)

2、題了。這個(gè)時(shí)候，樣品兼容性、使用溫度、穩(wěn)定性、柱流失情況等，都可 能成為選擇的主要理由。例如分析甲醇乙醇丙醇等低級(jí)醇類(lèi)，正常應(yīng)選擇wax類(lèi)高極性色譜柱。但是在雜 質(zhì)較少的情況下，選擇DB-1這樣的非極性柱具有更高的靈活性和使用壽命。具體選擇主要依據(jù)以下規(guī)則:1）、因?yàn)榉菢O性毛細(xì)管柱具有明顯的穩(wěn)定性、高使用溫度、良好的色譜峰型等有利因素，因此易分離物質(zhì) 應(yīng)首先選用極性小的色譜柱。2）、分析氫鍵型物質(zhì)用氫鍵型PEG柱更佳。3）、輕烴或永久氣體用Plot柱更佳。4）、高苯基固定相對(duì)芳香族物質(zhì)保留能力更強(qiáng)。但是分析二甲苯等芳烴異構(gòu)體，首選Wax類(lèi)強(qiáng)極性色譜柱。2、內(nèi)徑毛細(xì)管柱理論塔板高度與內(nèi)徑成正比。

3、因此相同長(zhǎng)度的毛細(xì)管，內(nèi)徑越小柱效率越高。但內(nèi)徑越小，通常 意味著柱容量的減小，在分析低含量組分時(shí)，對(duì)檢測(cè)器靈敏度和進(jìn)樣口分流能力的要求越高。因此在選擇 內(nèi)經(jīng)的時(shí)候，首先考慮的是樣品分析難點(diǎn)在于分離還是檢測(cè)。對(duì)于分離困難的樣品，首選較小口徑的色譜 柱；對(duì)于含量過(guò)低檢測(cè)困難的樣品，首選較大口徑的色譜柱。在沒(méi)有分析難點(diǎn)的情況下，選擇小口徑毛細(xì) 管柱可以縮短柱長(zhǎng)，減小分析時(shí)間。下面一張表格，是不同口徑毛細(xì)管柱理論塔板數(shù)的參考數(shù)據(jù)。柱效率中的小字，是另一公司的測(cè)試數(shù)據(jù)。內(nèi)徑mm)樣品容量(ng)柱效 plates/m)最佳流量 He inL/min)0.105-107000 125UU0.180 20

4、5-30500。59400.40.2550-1004170 47300 60.32400-5003330 河To0531000-200QWO *280.7510X00-15,0001170562 t packed)20,000200020OOrn SPS-1 毛細(xì)柱 0.2&0.32mm肉徑Q25s膜厚 0.53&0./5fnm內(nèi)徑；hOun膜凈線速度=21s/，以R數(shù)據(jù)均為參考值3、柱長(zhǎng)。柱長(zhǎng)增加一倍，理論塔板數(shù)增加一倍，但同時(shí)分析時(shí)間也增加一倍，分離度由于與柱長(zhǎng)的平方根成正比， 因此理論上就只能夠得到0.414倍的增加，但實(shí)際得到的收益要更小。雖然如此，在分離度難以達(dá)到的時(shí) 候，選擇更長(zhǎng)的毛細(xì)管柱，仍然是最直接有效的方法。-W對(duì)于長(zhǎng)度不同的同一種色譜柱：式中，心、上分別為兩根色譜柱的長(zhǎng)度*可見(jiàn)，增加色譜柱的長(zhǎng)度,理論塔板數(shù)將會(huì)增加，從而可提高分籬度。4、膜厚。膜厚并不能直接影響毛細(xì)管柱的理論塔板高度，但他直接影響色譜柱的相比。越大膜厚，色譜柱的柱容量 就越大，組分出峰的時(shí)間就越晚。在需要更大的進(jìn)樣量的情況下，首選厚膜色譜柱；在需要快速分析的情況下，首選薄膜色譜柱。DB-1, 30 m x 0.32 mm 1 TOC o 1-5 h z 氨氣，38 cm/sec270