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文檔簡介

1、實驗一 棉籽餅粕中游離棉酚含量的測定一、實驗目的 掌握國標法測定飼料中游離棉酚含量的原理、方法及結果的表示。2二、游離棉酚的測定方法概述一般用在70%丙酮水溶液或在3-氨基-1-丙醇存在下，用異丙醇和正己烷的混合溶劑提取游離棉酚，用比色法、高效液相色譜法測定。比色法：有苯胺法、三氯化銻法、甲氧基苯胺法、間苯三酚法、紫外分光光度法等。苯胺比色法準確度高、精密度好，也是國標方法。 HPLC法準確度高，干擾少。HPLC法所測得的結果往往低于比色法。 3三、方法原理 在3-氨基-1-丙醇存在下，用異丙醇與正己醇的混合溶劑提取游離棉酚。苯胺與棉酚結合為苯胺棉酚，在最大吸收波長（440nm）處進行比色測定

2、。 該方法適用于棉籽粉、棉籽餅粕和配合飼料中游離棉酚含量的測定。4四、儀器與器皿樣品粉碎機及分樣篩分析天平電動振蕩器恒溫水浴鍋分光光度計容量瓶、具塞錐形瓶、玻璃漏斗、移液管、量筒、玻璃珠5五、試劑（1）異丙醇；（2）正己烷；（3）冰乙酸；（4）3-氨基-1-丙醇；（5）苯胺；（6）異丙醇、正己烷混合溶劑：6：4（V/V）； （7）溶劑A：取500ml異丙醇、正己烷混合溶劑，2ml 3-氨基-1-丙醇，8ml冰乙酸和50ml水，放入1000ml容量瓶中。再用異丙醇、正己烷混合溶劑定容至刻度。6六、操作方法（1）游離棉酚的提?。悍Q取1-2g棉籽餅粕樣品于250ml具塞錐形瓶中，加入20粒玻璃珠。準

3、確加入50ml溶劑A。塞緊瓶塞。于振蕩器上劇烈振蕩1小時（每分鐘120次左右）。用干燥的定量濾紙過濾。過濾時在漏斗上加蓋一表玻璃皿。棄去最初幾滴濾液。收集濾液于100ml具塞錐形瓶中。（2）以下操作見下表 78（3）測定吸光度值：在440nm波長處以a0為參比溶液測定空白液b0的吸光度；以a為參比液測定樣品測定液b的吸光度。從以b的吸光度值減去b0的吸光度值，得到校正吸光度A。9七、結果的計算 游離棉酚（mg/kg）= A5025106 KmVL1000 式中：A校正吸光度； K質量吸收系數(shù)，游離棉酚為62.5cm-1g-1l; m試樣質量，g； V測定用濾液的體積，ml； L吸收池長度，cm； 50提取樣品的提取液體積，ml；10結果表示與重復性每個試樣做兩個平行，以其算術平均值為結果。結果表示到20mg/kg。：重復性： FG500 mg/kg時，相對偏差不超過15%； FG在500

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