風(fēng)味物質(zhì)提取方法

1、溶劑輔助風(fēng)味蒸發(fā)（SAFE）：是一種從復(fù)雜食品基質(zhì)中溫和、全面地提取揮發(fā)性物質(zhì)的方法，是德國 W.Engel等在1999年發(fā)明的。SAFE系統(tǒng)是蒸餾裝置和高真空泵的緊湊結(jié)合，樣品中的熱敏性揮發(fā)性 成分損失少，萃取物具有樣品原有的自然風(fēng)味，特別適合于復(fù)雜的天然食品中揮發(fā)性化合物的分離分 析。頂空分析方法（HS）：頂空分析是密閉容器中的樣品在一定溫度下，揮發(fā)性成分從食品基質(zhì)中釋放到 頂空，平衡后，再將一定量的頂空氣體進(jìn)行色譜分析。頂空分析可以專一性的收集樣品中易揮發(fā)的成 分，避免了冗長煩瑣的樣品前處理過程及溶劑對分析過程帶來的干擾，因此在氣味分析方面有獨(dú)特的 意義和價值。頂空分析方法分二類：靜態(tài)頂

2、空采樣（SHS）是直接取頂空物進(jìn)樣，受容器溫度和平 衡時間等因素的影響。SHS的樣品制備簡便，不用試劑，采集組分無干擾，但由于不同的香氣組分揮 發(fā)性不同，其存在于容器頂空中的含量會不同，這種方法有時必須進(jìn)行大體積的氣體進(jìn)樣，會影響色 譜的分離效果，因此僅適于高度揮發(fā)性或高含量組分的檢測。動態(tài)頂空（DHS）又稱吹掃捕集技術(shù)， 是指用一種惰性氣體（如高純氮?dú)猓┝鲝臒岬暮銣貥悠分袑㈨斂論]發(fā)性被分析物連續(xù)地“吹掃”出來， 再將揮發(fā)性組分加以富集，最后將抽提物進(jìn)行脫附分析。這種分析方法不僅適用于復(fù)雜基質(zhì)中揮發(fā)性 較高的組分，對濃度較低的組分也同樣有效，具有取樣量少、受基體干擾小、容易實(shí)現(xiàn)在線檢測等優(yōu) 點(diǎn)

3、，但是此系統(tǒng)提取步驟繁瑣、效率低下、費(fèi)用也較高。蒸館法:水蒸氣蒸餡法屬于傳統(tǒng)的提取方法，該方法只適用于具有揮發(fā)性的，能隨水蒸氣蒸餾而不 被破壞，與水不發(fā)生反應(yīng)，且難溶或不溶于水的成分的提取。水蒸氣蒸餾法提取進(jìn)程時間長、溫度高、 體系開放，其進(jìn)程易造成熱不穩(wěn)固及易氧化成分的損壞及揮發(fā)喪失，對部分組分有損壞現(xiàn)象。同時 蒸餡萃取法（SDE）：是一種集蒸餾與萃取于一體，收集揮發(fā)性、半揮發(fā)性成分的有效方法。但該方法 操作繁瑣、費(fèi)時，溶劑和樣品消耗量大，制備時間長，因此效率低下，而且長時間高溫沸騰會引起熱 降解，產(chǎn)生一些降解物。固相微萃?。⊿PME）： SPME與以往分析食品中揮發(fā)性化合物的常用方法相比，

4、將萃取、濃縮、解吸、 進(jìn)樣等功能集于一體，具有不使用溶劑、操作簡單、成本低、檢測速度快、靈敏度高、能夠盡可能減 少被分析的香氣物質(zhì)的損失等優(yōu)點(diǎn)。該方法不足是回收率低，不同批號萃取頭重復(fù)性差和纖維頭易損 壞等。吹掃捕集技術(shù)適用于從液體或固體樣品中萃取沸點(diǎn)低于200C,溶解度小于2%的揮發(fā)性或半揮發(fā)性有機(jī)物。動態(tài)頂 空法作為樣品的無溶劑的前處理方式，對環(huán)境不造成二次污染，而且具有取樣量少、富集效率高（檢出限比靜態(tài)頂 空低10100倍）、受基體干擾小及容易實(shí)現(xiàn)在線檢測等優(yōu)點(diǎn)，廣泛用于食品與環(huán)境監(jiān)測等部門。操作方法：摘自-動態(tài)頂空進(jìn)樣GC/MS法測定不同酒齡紹興酒的揮發(fā)性醛類化合物1.1儀器與試劑美國

5、 Agilent6890 plusGC/5973 N M S 氣質(zhì)聯(lián)用儀； 美國Tekmar3100型動態(tài)進(jìn)樣濃縮器，配有Tenax捕集 管，異戊醛、糠醛、油酸乙酯由美國Sigma提供，苯甲 醛、乙酸正戊酯為分析純試劑。L2分析條件氣質(zhì)聯(lián)用的分析條件:HP-INNOW AX毛細(xì)管柱 （30 m X）.25 m m X）.25 um ）;載氣為高純氮?dú)猓?0 psi;柱 溫：初始溫度40“C,保持2 m in,以5莒而in升至80 C, 再保持6 min,再以10 Vmin升至220 X?;分流比為 20 1;離子源溫度230 X?,四極桿溫度150 X?,EI源，電 子能量70 eV ,選擇離

6、子采集（SM ），選取定量離子為異 戊醛58,糠醛96,苯甲醛106。吹掃捕集條件：捕集溫度30 C;吹掃時間40 min; 空吹2 m in;預(yù)解吸溫度為175 C,解吸溫度180 C ;解 吸時間2 m in；烘烤溫度300 C :烘烤時間10 m in, 1.3標(biāo)準(zhǔn)貯備液的配制分別精確稱取異戊醛10.0 mg,糠醛lO.Omg,苯甲 醛10.0 m g于100 mL容量瓶，用15 %乙醇溶液稀釋至 刻度，配制成濃度均為 網(wǎng)的混會林準(zhǔn)儲備液。1.4樣品前處理精確吸取黃酒樣品5.0 mL于100 mL容量瓶中，加 入消泡劑5 uLt加入1000 m g/L乙酸正戊酯內(nèi)標(biāo)溶液 （溶劑為15%乙

7、醇溶液）0.1 mL,以蒸慵水稀釋至刻度。 搖勻后，取稀釋樣品5.0 mL,注入動態(tài)進(jìn)樣濃縮器中進(jìn) 行分析測定，2.1測定體系中各組分間的影響紹興酒測定體系中除水外，含量最大的是乙醇，樣 品雖經(jīng)稀釋，仍為非理想溶液；樣品中乙醇含量的變化 對各組分間的測定結(jié)果有一定的影響，因此，我們在考 察方法線性、精密度、回收率試驗(yàn)時調(diào)整待測溶液的乙 醇濃度以克服基質(zhì)效應(yīng)，2.2泡沫的影響黃酒在氣提時泡沫較多，過濾可去除一部分消泡, 但在吹出過程中仍有許多泡沫，并沿管壁上升進(jìn)入轉(zhuǎn)移 管線，而使管線發(fā)生污染。為克服這一缺點(diǎn)，選擇采用油 酸乙酯作為消泡劑經(jīng)實(shí)踐，油酸乙酯具有良好的消泡 效果，對測定不產(chǎn)生干擾。2.

8、3空吹時間的選擇掛品廁定時會佳直水慈遙的吹出,丕11王玉二盅 的 吸附,會繪色高螢去困避,蕓且濕度的增加會引起峰面 程的變化登丟去峰耳 我們選擇空吹時間2 m in,雖延長 了分析時間，但減少了水的峰面積且提高了信號質(zhì)量， 2.4線性試驗(yàn)及檢出限準(zhǔn)確吸取混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液（按L3方法）0, 0.1 ni L, 0.5 m L, 1.0 m L, 1.5 m Lt 2.5 m L 于 6 個 10 m L 容量瓶， 用15 %乙醇-水溶液定容，分別精確吸取5.0 m L按1A 操作方法進(jìn)行分析，以峰面積比（X）對相應(yīng)組分的濃度 比W）進(jìn)行線性回歸分析，得線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)丁、 線性范圍和檢出限L

9、OD,分別為：異 戊醛：Y 二54.64X -L40,1=0.9990,1 25 m g/L, LO D :0.33 m g/L ;糠 醛：Y 二36L02X+1.69,1=0.9955, 1 25 mg/L, LO D :0.69 m g/L ;苯甲醛:Y =53.19X +1.78, i=0.9985,1 25 mg/L, LO D :0.87 m g/L “ 2.5精密度及回收率試驗(yàn)選擇5年陳紹興酒作為樣品，精確吸取5.0 m L按 1操作方法進(jìn)行前處理，測定考察方法的精密度；精確 吸取處理酒樣4.0mL,3.0niL置于2個100 m L容量瓶 中，分別加入混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液（按1.3方法

10、）0.15 mL, 0.25 mL,以下操作按1.4操作方法進(jìn)行測定來檢驗(yàn)方法 的準(zhǔn)確度，結(jié)果見表1.表1 3種組分的精密度（n二6）和回收率（n二3）測定項(xiàng)目本底值（mg/L）標(biāo)準(zhǔn) 偏差 （mg/L）相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（%）加標(biāo)量平均檢平均 回收率 （%）（岫出量（岫異戊醛2. 350. 114. 6815. 025. 024. 2230. 819& 8095, 04糠醛12, 690, 2L 8115. 025. 067. 2460. 64109. 8790. 28苯甲醛6. 280. 294. 6215. 025. 039, 5944. 7096.47103. 442. 3. 2.1靜態(tài)頂空法

11、分離提取樣品中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)移取姑1鮮牛乳放人自動靜態(tài)頂空專用的頂空樣品岐中. 1ml內(nèi)標(biāo)溶液 限L)和2? gNaC，j EC F保持min，燃后使用自動進(jìn)樣器抽取1ml頂空揮發(fā)性 網(wǎng)味成分.進(jìn)樣至GC-MS ffi fi分析.2, 3, 2. 2吹掃捕集法分離提取樣品中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)移取lOmli?牛乳放人專用的頂空樣品臨中,加入1ml內(nèi)標(biāo)溶液L0 缺和運(yùn)用自動吹掃捕集派縮儀將頂空揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)吹掃出來.并吸附到一裝有Ten赤吸附村料 的毛細(xì)管捕集器上。樣品在6MC溫度條件下加瑋10mm,然后通人包氣l氮?dú)饧兌却笥?99 999%.流速lOml/min 咪掃60 min，完成吸附過程。最后

12、通過20j3C. 4 min快速熱解 析將揮發(fā)性風(fēng)味物卮解析下來.同時注 GC-MS iS行分析。2. 3. 2.3頂空固相微萃取法分離提取牛乳中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)移取1鮮牛乳至15ml貝空瓶|帶1封墊中.加入I ml內(nèi)標(biāo)溶( 0 05pg/L :(: 2 5 g N迎L旋緊蓋于密封。樣品在60 C水圭中平衡60mm,然后將10mm長的PDMS纖維 ;k 氽提*捉樣 頊涕3、卬1叫項(xiàng)；：1 ；,i.C=.了“：葉口，匚廠,星 取頭，進(jìn)樣GC-MS M行分折 PW 輜頭使用前先在* ；相色譜進(jìn)樣 2503C活化30m皿2. 2主要儀器氣相色譜-質(zhì)樸任用彼An k：-11 隊(duì)灑：）-,七|-11 7

13、77A-：-|右細(xì)管邑譜柱Ag lenL 二口美靜態(tài)頂空儻AgJcnl HSNA災(zāi)掃捕集濃縮位O 1002. 3一 4保鮮乳中揮發(fā)性物質(zhì)的風(fēng)味評價I本試驗(yàn)采用評定檢出物質(zhì)風(fēng)味強(qiáng)度的方法對巴氏殺菌乳和UHT乳中揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行風(fēng)味評價。風(fēng)味強(qiáng)度(Fu)是表征某種物原對風(fēng)味貢獻(xiàn)程度的大小，由下式表示風(fēng)味強(qiáng)度(Fu)二風(fēng)味物質(zhì)濃度/風(fēng)味闋值如果某物廉Fu值)1。表示.國味顯著Fu值在，表示有風(fēng)味；Fu 3的9種風(fēng)味化合物的標(biāo)準(zhǔn)品1 pL, 再加入內(nèi)標(biāo)物2-甲基-3庚酮IpL,用正己烷定溶至1 mL,則得到標(biāo)準(zhǔn)溶液。再將相同量的內(nèi)標(biāo)物加入到待 測樣品中，組成樣品溶液。在相同的條件下兩種溶液 分別進(jìn)樣,先根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液和內(nèi)標(biāo)物的濃度和峰面積 之間的關(guān)系求出一個校正因子，再用樣品溶液和內(nèi)標(biāo) 物的峰面積之比求出的待測組分的濃度乘以校正因子 則求出校正后的待測組分的濃度，計算公式如下】f= Ci/j4i（3）