動(dòng)物細(xì)胞工程-動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體

1、動(dòng)物細(xì)胞工程-動(dòng)物細(xì)胞融合與一、動(dòng)物細(xì)胞融合隆抗體細(xì)胞工程：可分為植物細(xì)胞工程和動(dòng)物細(xì)胞工程兩大領(lǐng)域。二、隆抗體動(dòng)物細(xì)胞工程包括：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞融合、生產(chǎn)體等。隆抗1、定義：動(dòng)物細(xì)胞融合（cell fu）也稱細(xì)胞雜交（cell hybridization），是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物體細(xì)胞結(jié)一個(gè)細(xì)胞的過程。融合后形成的具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞。12、原理：2、原理：細(xì)胞膜的性細(xì)胞膜的性3、誘導(dǎo)： 物理法：離心、振動(dòng)、電刺激 化學(xué)法：聚乙二醇（PEG） 生物法：滅活的4、具體過程：4、具體過程：離體的動(dòng)物組織（胰蛋白酶處理）獲得分散的單個(gè)動(dòng)物細(xì)胞誘導(dǎo)

2、融合（雜種細(xì)胞）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)25、意義拓展：滅活誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，是細(xì)胞相互凝集，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合。這一過程既能反映出糖蛋白在細(xì)胞識(shí)別中的重要作用，又能反映出細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的性特點(diǎn)。突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能，至今種間、屬間、成功。甚至動(dòng)物和植物之間的細(xì)胞融合都已獲得了6、應(yīng)用滅活：用物理或化學(xué)使或細(xì)菌失去能力，但是并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)。用于研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等。特別是利用細(xì)胞融合技術(shù)而發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)，為制造隆抗體開辟了新途徑。點(diǎn)對點(diǎn)練習(xí)

3、【例1】動(dòng)物細(xì)胞融合和植物原生7、與植物體細(xì)胞雜交的比較融合比較，在動(dòng)物細(xì)胞融合中有特殊性的是（）A融合的原理 C融合的誘導(dǎo)B融合的優(yōu)點(diǎn) D融合的過程3動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交原理細(xì)胞膜的性細(xì)胞膜的性、細(xì)胞的全能性誘導(dǎo)物理法：離心、振動(dòng)、電刺激化學(xué)法：聚乙二醇（PEG） 生物法：滅活的物理法：離心、振動(dòng)、電刺激化學(xué)法：聚乙二醇（PEG）意義使遠(yuǎn)緣雜交成為可能克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的用途隆抗體等培育新品種等【例2】下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程的敘述，正確的是（1、隆）當(dāng)機(jī)體受抗原刺激時(shí)，被激活的B細(xì)胞增殖形成效應(yīng)B細(xì)胞G 誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合形成的雜種細(xì)胞，經(jīng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能得到優(yōu)良動(dòng)物B使用冷凍保存的正常細(xì)

4、胞通常為 10 代以內(nèi)，以保持細(xì)胞正常的二倍體核型（漿細(xì)胞）和B細(xì)胞，大量的漿細(xì)胞和大量的抗體分子分布到血液、組織液等中。如果能選出一個(gè)制造一種專一抗體的漿細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，就到由針對 大量的單細(xì)胞經(jīng)增殖而形成細(xì)胞群，即隆。隆細(xì)胞將C在顯微鏡下觀察發(fā)生品的毒性D用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織后，可用無菌水稀釋制成細(xì)胞懸浮液突變的細(xì)胞比例可推知某化學(xué)藥一種抗原的特異性抗體，如果能大量培養(yǎng)該種細(xì)胞，即可特異性抗體。3、2、雜交瘤細(xì)胞&隆抗體隆抗體過程B淋巴細(xì)胞（具體是指其中的漿細(xì)胞）具有產(chǎn)生單一抗體的能力，但不能在體外無限增殖；骨髓瘤細(xì)胞是一種癌細(xì)胞，它能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體。因此，把一種

5、B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合，產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞，它會(huì)兼有兩個(gè)親本細(xì)胞的特性能無限增殖，同時(shí)能特異性抗體，產(chǎn)生的這種特定的抗體就是隆抗體。4通過選擇培養(yǎng)基及抗原抗體雜交檢測，篩選出需要的雜交細(xì)胞4、隆抗體的優(yōu)點(diǎn)靈敏度高、特異性強(qiáng)、可大量5、隆抗體的應(yīng)用 作為試劑：隆抗體由于純度高、特異性強(qiáng)，因此能夠準(zhǔn)確地識(shí)別抗原物質(zhì)的細(xì)微差別，并跟一定的抗生特異性結(jié)合。利用同位素標(biāo)記的隆抗體，在特定組織中成像的技術(shù)，可以定位和腫瘤、心畸形等疾病。（注入小鼠的腹腔內(nèi)）5抗原抗體雜交【例3】“生物5、隆抗體的應(yīng)用”是指（） 用于治療疾病和運(yùn)載藥物：從目前臨床試驗(yàn)來看，AB雜交瘤細(xì)胞 D在單抗上連接抗癌藥物隆抗體

6、隆抗體主要用于的治療，也有C產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞少量用于其他疾病的治療。將抗癌細(xì)胞的隆抗體與放射性同位素、化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素結(jié)合，制成“生物”，注入體內(nèi)，能夠?qū)⑺幬锒ㄏ驇У桨┘?xì)胞所在的位置，在原位置殺死癌細(xì)胞。【例4】運(yùn)用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)篩選雜交瘤細(xì)胞 【例5】下列關(guān)于利用細(xì)胞工程技術(shù)隆抗體的正確操作步驟是（特異性抗原）隆抗體的敘述，不正確的是（）A給小鼠注射抗原，是為了獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B細(xì)胞 B骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞混合培養(yǎng)，是為了獲得融合細(xì)胞免疫動(dòng)物免疫的細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞 誘導(dǎo)細(xì)胞融合C隆抗體的第二次篩選是選出雜交瘤細(xì)胞D雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)培

7、養(yǎng)，是為了獲得能產(chǎn)生隆抗體的胚胎隆抗體的大量 B DE生物是用癌細(xì)胞的隆抗體殺死癌細(xì)胞A CF動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)是細(xì)胞具有全能性6【例7】利用細(xì)胞工程方法，以 SARS體下列相關(guān)敘述正確的是（【例6】下列有關(guān)利用動(dòng)物細(xì)胞工程生產(chǎn)核衣殼蛋白為抗原）出隆抗隆抗體的敘述，錯(cuò)誤的是（）A B隆抗體隆抗體使用的主要生物材料是骨髓瘤細(xì)胞和漿細(xì)胞的原理之一是一個(gè)漿細(xì)胞可以產(chǎn)生多種特異性抗體用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的克隆抗體體外培養(yǎng)單個(gè)效應(yīng)B 細(xì)胞可以獲得大量針對 SARS抗體抗體為單C篩選能理所需抗體的雜交瘤細(xì)胞運(yùn)用了抗原-抗體特異性反應(yīng)原的隆D隆抗體具有純度高、產(chǎn)量大、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)C將

8、等量效應(yīng) B 細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng) PEG 誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞D利用該出隆抗體與SARS者核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可【例8】（2013 重慶）如圖是【例8】（2013 重慶）如圖是抗體流程的簡明示意）抗體流程的簡明示意）圖。下列有關(guān)敘述，正確的是（圖。下列有關(guān)敘述，正確的是（A是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T 淋巴細(xì)胞 B中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成 C同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能特異性抗體的細(xì)胞群7【例10】下圖為細(xì)胞融合的簡略過程，請據(jù)圖回答：【例9】（2014）為達(dá)到相應(yīng)目的，必須通過分子檢測的是（）A攜帶鏈霉素抗性受體菌的篩選B

9、產(chǎn)生抗人白細(xì)胞介素8 抗體的雜交瘤細(xì)胞的篩選C轉(zhuǎn)抗蟲棉植株抗蟲效果的鑒定D21 三體綜合征的（1）若A、B 是植物細(xì)胞，在細(xì)胞融合之前須處理獲得原生，由A、B 到細(xì)胞 C 的過程中，常用的促融劑是。融合完成的標(biāo)志是?！纠?0】若A、B 是植物細(xì)胞，則形成的 D 細(xì)胞還要應(yīng)用技術(shù)把D 培養(yǎng)成植株。在組織培養(yǎng)過程中，除了提供水分和必要的有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要在培養(yǎng)基中加入 和 。同時(shí)，培養(yǎng)過程中，除保證必要的溫度、光照和氧氣等外界條件外，還必須保證的關(guān)鍵條件。（4）若A、B 是動(dòng)物細(xì)胞，一般取自，然后用使其分散開來；由A、 B 到 C 的過程中，常用的且不用于植物細(xì)胞融合段是。 A、B 融合為 C

10、 的過程說明了細(xì)胞膜具有。（5）若該過程是隆抗體，在A、B 到 C 的過程中，兩兩融合所形成的 C 有種，用來培養(yǎng)的D 細(xì)胞應(yīng)該是，獲得D 后，常用的培養(yǎng)方法是培養(yǎng)液中培養(yǎng)和。8【例11】（1）（2）【例11】人絨毛膜促 種糖蛋白，隆抗體隆抗體過程中要用到 和技術(shù)。隆抗體過程中，給小鼠注射的 HCG 相當(dāng)于 ，使小鼠激素（HCG）是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞的一抗 HCG。下圖是抗 HCG隆抗體可用于早孕的相應(yīng) 的淋巴細(xì)胞，此過程屬于特異性免疫中的免疫。取產(chǎn)生流程示意圖，請分析回答：該小鼠的淋巴細(xì)胞 細(xì)胞進(jìn)行融合，使用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是，細(xì)胞融合的原理是。（3）圖中有兩次篩選過程，其中步驟將融合細(xì)胞放在A 裝置中的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的目的是篩選出，步驟是通過的方法篩選出。（4）在細(xì)胞內(nèi) DNA一般有兩條途徑，主途徑是在細(xì)胞內(nèi)由糖和氨DNA，而氨基喋呤可以阻斷此途徑。另一（5）將篩選得到的雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)過或小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)，獲取大量基