實(shí)時(shí)PCR檢測HSV2 DNA的方法學(xué)評價(jià)及應(yīng)用

1、實(shí)時(shí)PCR檢測HSV2DNA的方法學(xué)評價(jià)及應(yīng)用【摘要】目的對本室利用TaqManMG技術(shù)建立的HSV2實(shí)時(shí)定量PCR法進(jìn)行方法學(xué)評價(jià)及臨床應(yīng)用。方法收集60名近期有流產(chǎn)史婦女的全血及血清標(biāo)本，分別用FQPCR和ELISA法同時(shí)檢測，并進(jìn)行比較；另對FQPCR從重復(fù)性、靈敏度、線性范圍、特異性幾方面進(jìn)行方法學(xué)評價(jià)。結(jié)果對60份臨床標(biāo)本檢測，ELISA法的陽性率為%，F(xiàn)QPCR法的陽性率為%，明顯高于前者（P。FQPCR法的重復(fù)性較好批內(nèi)CV(變異系數(shù))值為%，批間CV值為%、線性范圍好101106copies/l，r=、靈敏度達(dá)到l、特異性較好（對HSV1、Vero細(xì)胞、巨細(xì)胞病毒、弓形蟲等無特

2、異性擴(kuò)增）。結(jié)論實(shí)時(shí)PCR測定HSV2方法比傳統(tǒng)的ELISA法更快速靈敏，是較有發(fā)展前途的新技術(shù)。【關(guān)鍵詞】實(shí)時(shí)定量PCR；單純皰疹病毒2型；生殖器皰疹【Abstract】ObjectiveToevaluatenewlyestablishedrealtimePCRmethodwithTaqManMGtechniqueandapplyitintoclinicalresearchMethodsSpecimensfrom60womenwithrecentabortionhistorywerecollectedanddetecteolwithFQPCRwereevaluatedonreproducib

3、ility,specificity,ThepositionrateofFQ%respectively,theformerishigherthanthelatter(P.Theassayshowedgoodreproducibility(intraandinter)，goodlinearrange101106copiesl，r=，goodspecificity(distinguishingHSV2fromotherpathogenicmicroorganism)FQPCRfordetectingHSV2ismoresensitive,fasterthanELISAandisapromisingt

4、echnique.【Keywords】rea1timePCR；HSV2；genitalherpes單純皰疹病毒2型（herpessimplexvirus,HSV2）是引起生殖器皰疹（genitalherpes,GH）的主要病原體，GH具有長期潛伏性、無法徹底治愈、病情反復(fù)發(fā)作等特點(diǎn)。孕婦GH還可引起胎兒宮內(nèi)感染或新生兒感染，導(dǎo)致流產(chǎn)、早產(chǎn)、先天畸形、新生兒死亡或發(fā)生嚴(yán)重后遺癥1。近年來，GH的發(fā)病率不斷上升，其中部分表現(xiàn)不典型，甚至無癥狀，而及時(shí)準(zhǔn)確地對這類感染者診斷并采取相應(yīng)的防治措施可有效降低感染率2。感度不高、耗時(shí)較長等缺點(diǎn)。而實(shí)時(shí)熒光PCR（realtimePCR）是近幾年發(fā)展較為迅速的新技術(shù)，具有高敏感性、高特異性和高精確性等優(yōu)點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)室在前期利用