8 抗原抗體反應

1、抗原抗體反應Antigen-Antibody Reaction 1Injectmicrobe/exotoxinserumagglutinin/antitoxin？antibody，Ab！antigen，Ag！21890年，德國學者E von Behring和日本學者北里（S Kitasato）在Koch研究所應用白喉外毒素給馬免疫制抗血清34一、 Antigen, Ag抗原是指能與相應克隆的淋巴細胞上獨特的抗原受體特異性結(jié)合，誘導淋巴細胞產(chǎn)生免疫應答的物質(zhì)。 免疫原性 免疫反應性51 Immunogenicity指引起應答的性能，包括誘導產(chǎn)生抗體及效應T淋巴細胞具有免疫原性的物質(zhì)稱為免疫原（i

2、mmunogen）抗原的免疫原性取決于： 抗原的理化性質(zhì) 宿主反應性 免疫方式62 Immunoreactivity指能與免疫應答產(chǎn)物相互作用起反應的性能主要決定于抗原分子的化學性質(zhì)AntigenAntibodyT Cell Receptoror73 半抗原（hapten）/不完全抗原（incomplete antigen）只具有免疫反應性而無免疫原性的物質(zhì)稱為半抗原半抗原與抗體結(jié)合8抗原決定簇（antigenic determinant）又稱表位（epitope），是指抗原性物質(zhì)表面決定該抗原特異性的特殊化學基團，是免疫應答和免疫反應具有特異性的物質(zhì)基礎(chǔ)抗原決定簇9105 抗原結(jié)合價（Ant

3、igenic valence）指抗原物質(zhì)所具有的能與抗體分子結(jié)合的抗原決定簇的總數(shù)每一種半抗原可理解為單一的抗原決定簇，而天然抗原含有很多不同的抗原決定簇11Important medical antigen 各種微生物及其代謝產(chǎn)物 各種微生物12經(jīng)免疫動物的抗血清 抗毒素作用機理13異嗜性抗原 不同種屬動物組織間共同存在的抗原抗原14同種異型抗原 ABO blood group system HLA antigen system Transplant（graft）15二、Antibody能與相應抗原特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白?？贵wAntibody，Ab免疫球蛋白immunoglobul

4、in，Ig免疫血清？16抗原與抗體間的特異性結(jié)合反應體內(nèi) 體液免疫應答的效應作用溶菌、殺菌、促進吞噬、中和毒素等，或免疫病理損傷體外 抗原抗體結(jié)合反應沉淀、凝集、細胞溶解、補體結(jié)合、中和毒素等(又稱血清學反應)三、Principle（原理） of Antigen and Antibody Reaction17抗原抗體特異性結(jié)合的基礎(chǔ)： 抗原決定簇與抗體超變區(qū)分子間的結(jié)構(gòu)互補性與親和性，決定于抗原抗體分子空間構(gòu)型抗原抗體結(jié)合過程示意圖18分兩個階段： 抗原抗體特異性結(jié)合階段 可見反應階段19抗原抗體結(jié)合力靜電引力：帶相反電荷的氨基和羧基，與距離有關(guān)范德華力：原子與原子、分子與分子相互接近時分子極

5、化發(fā)生的引力氫鍵結(jié)合力：氫原子與氫受體原子間的引力疏水作用力：兩個疏水基團對水排斥而趨向聚集20抗原抗體的親和性和親和力親和性（affinity）：抗體分子上一個抗原結(jié)合點與對應的抗原決定簇間相適應而存在著的引力。親和性越高，與抗原結(jié)合越牢固?？贵w的親和力（avidity）：抗體結(jié)合部位與抗原決定簇間結(jié)合的強度。分子空間構(gòu)型的吻合程度越高，親和力越高，結(jié)合越牢固213 親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體蛋白質(zhì)分子帶電荷的殘基由于靜電作用，在蛋白分子周圍形成相反電荷的電子云，PH7.4下帶負電的蛋白分子周圍形成水化層，加上電荷相斥，避免了蛋白分子聚集。為親水膠體?？乖贵w結(jié)合后，水化層表面電荷減少，水化層變

6、薄，電子云消失，變?yōu)槭杷z體。22四、抗原抗體反應的特點Characteristics of Antigen and Antibody Reaction1 特異性 specificity： 一把鎖只愛一把鑰匙，一把鑰匙永遠忠于一把鎖！23指物質(zhì)之間的相互吻合的針對性 抗體超變區(qū) 抗原決定簇 決定于兩者空間結(jié)構(gòu)的互補性24交叉反應（Cross reaction） 抗原除與其相應的抗體發(fā)生特異性反應外，還與其他抗體發(fā)生反應稱為交叉反應25引起交叉反應的原因：抗原異質(zhì)性（用于免疫動物的抗原性物質(zhì)中含有多種抗原分子，任何其他物質(zhì)只要含有一種或多種與上述物質(zhì)相同的抗原分子，必將與上述多特異性的抗血清發(fā)生

7、交叉反應）共同決定簇決定簇相似26交叉反應272 比例性proportionality28抗原抗體反應的等價帶（zoneofequivalence）：曲線的高峰部分，抗原抗體分子比例合適的范圍。在此范圍內(nèi)，抗原抗體充分結(jié)合，沉淀物形成快而多。最適比（optimalratio）：其中有一管反應最快，沉淀物形成最多，上清液中幾乎無游離抗原或抗體存在，表明抗原與抗體濃度的比例最為合適。帶現(xiàn)象（zonephenomenon）：等價帶前后分別為抗體或抗原過剩則無沉淀物形成。前帶（prezone）：抗體過量后帶（postzone）：抗原過剩。29Marrack（1934）網(wǎng)絡學說 303 可逆性rever

8、sibilityAg + Ab Ag-Ab抗體對相應抗原的親和力環(huán)境因素31五、抗原抗體反應的影響因素 Factors Influencing of Antigen-Antibody Reaction1 抗原抗體自身因素（Antigen and Antibody）抗原：理化性狀 決定簇種類和數(shù)量抗體： 來源： 兔等， 馬、人 單克隆抗體 濃度 特異性和親和力322 環(huán)境因素（Condition）電解質(zhì) Na+和C1，可分別中和膠體粒子上的電荷，使膠體粒子的電勢下降，促使抗原抗體復合物從溶液中析出，形成可見的沉淀物或凝集物。33酸堿度 抗原抗體反應一般在pH為68進行。PH過高或過低都將影響抗原

9、與抗體的理化性質(zhì)，例如pH達到或接近抗原的等電點時，即使無相應抗體存在，也會引起顆粒性抗原非特異性的凝集，造成假陽性反應。34溫度 溫度升高可加速分子運動，抗原與抗體碰撞機會增多，使反應加速。但若溫度高于56時，可導致已結(jié)合的抗原抗體再解離，甚至變性或破壞；在40時，結(jié)合速度慢，但結(jié)合牢固，更易于觀察。常用的抗原抗體反應溫度為37。35適當振蕩/攪拌 可促進抗原抗體分子的接觸，加速反應36對照設置（Control）對照是實驗質(zhì)量控制的手段之一，目的在于消除無關(guān)變量對實驗結(jié)果的影響。陽性positive control陰性negative control空白blank control標準品standard control（定量基礎(chǔ)）37六、抗原抗體反應的經(jīng)典類型Types of