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文檔簡介
1、動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體第一頁,編輯于星期五:十點(diǎn) 二十五分。教學(xué)目標(biāo): 1、了解并能簡述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程、條件及應(yīng)用 2、舉例說出動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體的原理和應(yīng)用教學(xué)重點(diǎn)和難點(diǎn): 1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程及條件 2.單克隆抗體的制備和應(yīng)用第二頁,編輯于星期五:十點(diǎn) 二十五分。復(fù)習(xí)回憶: 1、植物體細(xì)胞雜交的過程是怎樣的? 2、動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞有何不同 ?第三頁,編輯于星期五:十點(diǎn) 二十五分。一、動(dòng)物細(xì)胞融合:1、概念:也稱 ,是指 或 動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。形成的單核細(xì)胞稱為 。2、過程:不同 的兩個(gè)細(xì)胞 細(xì)胞細(xì)胞雜交學(xué)海導(dǎo)航兩個(gè)多個(gè)雜交細(xì)胞DNA雜交第四頁,編輯于星期五:十
2、點(diǎn) 二十五分。3、動(dòng)物細(xì)胞融合原理與植物原生質(zhì)體融合的根本原理是否相同? 誘導(dǎo)方法: 、 、 。思考:為什么滅活病毒能夠作為誘導(dǎo)劑?不滅活的是否可以?4、動(dòng)物細(xì)胞融合的意義:克服了 雜交的不親和性。物理法化學(xué)法生物法遠(yuǎn)緣滅活的病毒對(duì)細(xì)胞沒有感染能力。第五頁,編輯于星期五:十點(diǎn) 二十五分。動(dòng)物細(xì)胞融合雜種細(xì)胞愈傷組織雜種植株植物細(xì)胞A植物細(xì)胞B 原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B植物體細(xì)胞雜交去壁融合組培物理法化學(xué)法生物法:滅活的病毒動(dòng)物細(xì)胞A動(dòng)物細(xì)胞B雜種細(xì)胞第六頁,編輯于星期五:十點(diǎn) 二十五分。5、動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較:比較項(xiàng)目細(xì)胞融合的原理細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)手段用法植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞膜的流
3、動(dòng)性去壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合物理法(離心、振動(dòng)、電激)化學(xué)法(聚乙二醇獲得雜種植株動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流動(dòng)性使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合除以上方法,還有生物法制備單克隆抗體第七頁,編輯于星期五:十點(diǎn) 二十五分。二、單克隆抗體:1.其由何種細(xì)胞產(chǎn)生?2.主要分布在哪里?3.如何得到抗體?提問?第八頁,編輯于星期五:十點(diǎn) 二十五分。動(dòng)物細(xì)胞A動(dòng)物細(xì)胞B雜種細(xì)胞用動(dòng)物細(xì)胞融合的方法制備單克隆抗體試一試聚乙二醇或滅活的病毒雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)提取抗體效應(yīng)細(xì)胞腫瘤細(xì)胞第九頁,編輯于星期五:十點(diǎn) 二十五分。單克隆抗體制備過程示意圖第十頁,編輯于星期五:十點(diǎn) 二十五分。 注意: 對(duì)小鼠做何處理? 細(xì)胞融合后,培養(yǎng)液
4、中共有幾種細(xì)胞?有幾種融合細(xì)胞?雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能大量 ,又能產(chǎn)生 。思考:產(chǎn)生抗體的雜交瘤細(xì)胞如何篩選出來的?注射特定的抗原蛋白五種B淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞、B-B、骨骨、雜交瘤細(xì)胞 其中三種融合細(xì)胞。繁殖專一的抗體提示:抑制骨髓瘤細(xì)胞的DNA復(fù)制。第十一頁,編輯于星期五:十點(diǎn) 二十五分。單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)和應(yīng)用單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn) 強(qiáng), 高, 大。單克隆抗體的應(yīng)用: 作為診斷試劑:準(zhǔn)確識(shí)別各種 物質(zhì)的細(xì)微差異,并跟 的結(jié)合,具有 、 、 、 的優(yōu)點(diǎn)。 用于治療疾病和運(yùn)載藥物:主要用于治療 ,可制成“ ,也有少量用于治療其他疾病。特異性靈敏度產(chǎn)量抗原一定抗原發(fā)生特異性準(zhǔn)確 高效 簡易 快速癌癥生
5、物導(dǎo)彈第十二頁,編輯于星期五:十點(diǎn) 二十五分。1、從母羊甲的體細(xì)胞中取出細(xì)胞核,注入到母羊乙去掉核的卵細(xì)胞中,融合后的細(xì)胞經(jīng)卵裂形成早期胚胎,再植入到另一只母羊丙的子宮內(nèi),出生小羊的大多數(shù)性狀 ( ) A.難以預(yù)測 B.像甲 C.像乙 D.像丙22004年,全國用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體,以下實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的選項(xiàng)是 A將抗原注入小鼠體內(nèi),獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞B用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞C用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑,促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合D篩選雜交資金積累細(xì)胞,并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群,培養(yǎng)后提取單克隆抗體根底訓(xùn)練穩(wěn)固BB第十三頁,編輯于星期五:
6、十點(diǎn) 二十五分。3.動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中,正確的選項(xiàng)是 誘導(dǎo)融合的方法完全相同 所用的技術(shù)手段不相同 所采用的原理完全相同 都能形成雜種細(xì)胞A. B. C. D.4. 單克隆抗體制備過程中,骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后,要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞,在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是 淋巴細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞A BC D CA第十四頁,編輯于星期五:十點(diǎn) 二十五分。創(chuàng)新應(yīng)用訓(xùn)練5右圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法,設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案。據(jù)圖答復(fù):1該方案能到達(dá)預(yù)期效果嗎?。原因是 。2圖中為過程,常用作為誘導(dǎo)劑。該細(xì)胞繼承了 ,因此不僅能分泌 ,還有 本領(lǐng)。3該方案的目的是。不能 沒有將抗原注入小鼠體內(nèi),無法獲得產(chǎn)生單一抗體的B淋巴細(xì)胞.細(xì)胞融合 滅活病毒 雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì) 特異性抗體
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