免疫組織化學

1、關(guān)于免疫組織化學第一張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月是指用已知的抗原或抗體去檢測待檢組織中的抗體或抗原，抗原抗體結(jié)合后再用一系列呈色反應(yīng)，在光鏡下觀察，確定組織的來源、屬性和部位。目前免疫組織化學已成為科學研究及病理診斷中最重要的手段之一，而且已經(jīng)普遍地展開并擴展至基層單位，為病理事業(yè)做出應(yīng)有的貢獻。一、免疫組織化學的定義第二張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月抗原（抗原，AG）抗原是一類可以被機體的免疫系統(tǒng)識別，并刺激機體免疫系統(tǒng)合成和分泌免疫效應(yīng)分子(抗體)，同時可以與免疫效應(yīng)分子在體內(nèi)或體外發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)。第三張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月抗

2、原的性質(zhì)異物性 它是抗原所具有的特性，機體對進入體內(nèi)的某些異物、異體大分子物質(zhì)可產(chǎn)生免疫應(yīng)答。理化性狀 抗原分子量越大，其相應(yīng)的表面積也越大，接觸、碰撞免疫細胞的機會就增多，它的免疫原性就越強。第四張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月抗原的性質(zhì)特異性 各類抗原物質(zhì)結(jié)構(gòu)復雜，但能刺激機體并與抗體發(fā)生結(jié)合反應(yīng)的成分，僅僅是抗原表面的活性化學基團、化學結(jié)構(gòu)及空間構(gòu)型，稱為抗原決定簇。即一種抗體只能與相應(yīng)的抗原起反應(yīng)而不能與其它的抗原起反應(yīng)，這就是抗原的特異性，稱之為特異性抗原。但這種特異性是相對的。第五張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月抗原的性質(zhì) 另外，不同的抗原物質(zhì)常含有共同

3、的抗原成份，即一種抗體可與兩種以上不同抗原發(fā)生反應(yīng)，這些抗原稱為共同抗原。第六張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月抗原的類型 1.腫瘤相關(guān)抗原2.分泌抗原3.吞沉抗原第七張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月抗原的純化 為了獲得理想的抗體，使免疫組化技術(shù)達到定性可靠和定位準確的目的，不論是哪一種抗原，都必須進行純化，以排除雜質(zhì)，否則將會產(chǎn)生非特異性染色。第八張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月抗體（抗體, AB）機體的免疫系統(tǒng)受到抗原刺激后，通過機體一系列的化合作用：即體液免疫應(yīng)答、B淋巴細胞活化、增殖、分化為漿細胞，由漿細胞合成并分泌的僅與該抗原發(fā)生特異性反應(yīng)的球

4、蛋白物質(zhì)稱為抗體。第九張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月1.多克隆抗體(Polyclonal抗體,PCAB) 此類抗體成份較多，是多種單克隆抗體的混合物，可以跟抗原的多個決定簇起反應(yīng)，故稱多克隆抗體。2.單克隆抗體（Monoclonal抗體, MCAB） 只能跟抗原中的某個決定簇起反應(yīng)而獲得的抗體稱單克隆抗體。(一)抗體的種類第十張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月二、免疫組織化學技術(shù)的發(fā)展概況第十一張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月免疫熒光細胞化學技術(shù) 它的基本原理是把已知的抗原或抗體標記上熒光素，制成熒光抗原或抗體，然后以它作為探針來檢測組織或細胞內(nèi)的相應(yīng)

5、物質(zhì)。在熒光顯微鏡下，根據(jù)其形成的復合物所發(fā)的熒光，來判斷檢測物的來源、性質(zhì)和部位。第十二張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月常用的熒光標記法直接法：這是最早的方法。其基本原理是用已知的抗體標記上熒光素后成為特異性熒光抗體，染色時將該抗體直接滴在載玻片上進行孵育，使之直接與抗原結(jié)合，形成復合物。評價：該法簡單易行、特異性高、快速方便，常用于腎活檢組織中免疫球蛋白和病原體的檢測。但此法敏感性較差，只能檢測相應(yīng)的一種物質(zhì)。 第十三張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月間接法：基本原理是用特異性的抗體與切片中的抗原結(jié)合后，繼用間接熒光抗體，與前面的抗原抗體復合物結(jié)合，形成抗原抗體熒

6、光復合物。評價：本法發(fā)出的熒光亮度強，敏感性強。適用于多種第一抗體的標記顯示，目前本法應(yīng)用較廣泛。但制作好的切片不能長期保存，影響資料的積累。常用的熒光標記法第十四張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月免疫酶細胞化學技術(shù) 這種技術(shù)的基本原理是通過共價鍵將酶結(jié)合在抗體上，制成酶標抗體，在檢測時，抗原抗體復合物中帶有標記上去的酶，可催化底物，在抗原抗體反應(yīng)的部位上產(chǎn)生不溶性的有色產(chǎn)物，通過顯微鏡來觀察判斷，確定組織的來源、屬性和部位。第十五張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月免疫酶細胞化學技術(shù)評價：優(yōu)點：只需用普通光鏡檢查。切片可長期保存，有利于資料積累?？梢詴\，所得結(jié)果較為客

7、觀。既適用于冰凍切片，也適用于石蠟切片。技術(shù)較為簡單，易于普及和推廣。 第十六張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月免疫酶細胞化學技術(shù)存在問題：酶與抗體間的共價結(jié)合可損害部分抗體和酶的化學結(jié)構(gòu)。酶標抗體分子量較大，對組織的穿透性較慢?？寡逯械姆翘禺愋钥贵w被酶標記后與切片中的抗原結(jié)合，常可引起背景的染色，影響陽性物的判斷。敏感性不強，目前已不被使用。第十七張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月非標記抗體酶法 由于酶標抗體存在許多問題，1974年Strernberger等人建立了非標記抗體酶法，其中最具代表的方法是過氧化物酶法即PAP法。染色原理：應(yīng)用第二抗體即橋抗體將抗原抗體復

8、合物與PAP復合物連接起來，形成較大的復合物，利用復合物中辣根過氧化物酶HRP水解底物而呈色。第十八張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月非標記抗體酶法優(yōu)點：PAP法具有較高的敏感性。存在的問題： 1.第一抗體和第三抗體必須為同種屬動物。如一抗為小鼠的，則三抗也必須為小鼠的。 2.抗體孵育時間過長。一抗要求置于4冰箱中過夜孵育，長時間的孵育容易產(chǎn)生背景染色，影響染色的成功率，而且容易掉片等。 3.復合物分子大，對組織的滲透力差，影響結(jié)果。第十九張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月卵白素-生物素復合物法(ABC法)它的原理是根據(jù)卵白素-生物素高親和力的生物學特性，利用卵白素分別

9、連接生物素標記的第二抗體和生物標記的酶，由酶催化底物，生成終產(chǎn)物，在抗原抗體活性部位沉淀下來。第二十張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月卵白素-生物素復合物法(ABC法)優(yōu)點:1.敏感性強，卵白素與生物素有4個連接部位，據(jù)認為它比PAP法敏感性更高，高出約20-40倍。2.需時少，節(jié)省大量的時間。如PAP法的一抗孵育時間需十幾小時以上，而本法只需1-60分鐘。3.背景清晰，陽性物鮮艷易辨。4.抗體可被高度稀釋，增加標記病例，降低成本。第二十一張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月卵白素-生物素復合物法(ABC法)存在的問題：需要預先形成卵白素-生物素復合物，該復合物在結(jié)合了其

10、他物質(zhì)后，體積增大，行動緩慢。卵白素中含有約7%的糖類，它可與組織中含糖基的物質(zhì)起反應(yīng)，造成背景的染色。卵白素帶較多的負電荷，纖維組織帶較多的正電荷，兩種電荷互相吸引造成背景染色。第二十二張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月堿性磷酸酶抗堿性磷酸酶法（APAAP法)該法的基本原理是在加入一抗后，依靠二抗的橋接作用，將抗原抗體復合物和APAAP復合物連接起來，然后通過復合物中的磷酸酶對底物的水解，生成鮮紅色或藍色的產(chǎn)物。第二十三張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月堿性磷酸酶抗堿性磷酸酶法優(yōu)點：在其它許多方法中，如ABC法和PAP法等，應(yīng)用的顯色劑都是DAB，據(jù)認為該試劑有致癌作

11、用，為了避免使用上述試劑，因而創(chuàng)立了這種方法。它敏感性高，不受組織中內(nèi)源性過氧化物酶的影響和干擾，可產(chǎn)生出鮮艷的紅色或藍色陽性物，非常容易被鑒別，常被用作雙標。 第二十四張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月堿性磷酸酶抗堿性磷酸酶法存在問題：切片不能長期保存。因為顯色用的是快紅或快藍，經(jīng)這些染料染色后的顏色，不能經(jīng)過酒精的脫水處理，否則所著染的顏色將被全部脫掉。只能用水性膠封片，然該種封片法保存的切片時間不長，一般只有數(shù)月即會褪色。切片的透明度較差，拍攝照片效果欠佳。 第二十五張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月免疫金銀法（IGSS） 基本原理：通過免疫反應(yīng)，沉積在抗原位置的

12、膠體金顆粒起著一種催化作用，用對苯二酚將銀離子還原為銀原子，銀原子沉積在金顆粒周圍形成“銀殼”。它本身具催化作用，使更多的銀離子還原并促進“銀殼”越來越大，最終在光鏡下就能看到被放大的黑褐色物質(zhì)。第二十六張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月免疫金銀法優(yōu)點：該法敏感性高，特異性強，背景較低，陽性物容易辨認，可用于任何切片，能檢測微量的抗原。存在的問題:操作繁鎖，步驟較多。需要預先制備成膠體金，且需要在暗室中進行。使用的金-銀試劑，容易造成沉淀或污染。第二十七張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月LSAB法或SP法為了解決ABC法存在的問題，90年代初提出了用鏈卵蛋白素替代卵白素

13、生物素復合物。該物質(zhì)是從鏈菌屬蛋白中分離出來的一種蛋白，有四個和生物素親和力極高的結(jié)合點。 LSAB法是目前國內(nèi)使用最廣泛的一種方法，它敏感性強，效果好，背景清晰，無雜質(zhì)。第二十八張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月LSAB法或SP法優(yōu)點：1.不需預先形成復合物，分子體積小，行動靈活，對組織參透性強。2.鏈卵蛋白素的等電點為5.5-6.7，接近中性，不易與組織中的正電荷發(fā)生相互吸引，因而可降低背景的染色。3.鏈卵蛋白素不含糖基，不存在與組織中含糖基類的物質(zhì)起反應(yīng)的現(xiàn)象。4.鏈卵蛋白素有4個與生物素結(jié)合的點，它們可以全部和二抗上的生物素結(jié)合，從而增加其敏感性。第二十九張，PPT共一百一

14、十二頁，創(chuàng)作于2022年6月LSAB法或SP法5.節(jié)省時間，每種抗體的孵育時間都在10-30min左右。6.抗體可以高度稀釋，增加標記病例，降低成本。7.背景清晰，無非特異性染色，陽性物突出，明顯易辨。8.染色時間短，提高了染色的成功率，減少了反復制作的機會，提高工作效率。 第三十張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月二步法EnVision Systems 該法是近幾年在國內(nèi)推廣使用的一種方法，它的原理是將多個抗鼠和抗兔IgG分子與辣根過氧化物酶聚合形成復合物后，可直接與抗原抗體復合物聚合在一起，經(jīng)DAB顯色即可完成染色。第三十一張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月EnVis

15、ion TM Systems評價：敏感性更高，效果更好。步驟減少，省時省力?？贵w的孵育時間可節(jié)省。該系統(tǒng)不含有生物素，可以免除由內(nèi)源性生物素所造成的背景染色。背景清晰干凈，陽性物突出明顯。第三十二張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月三、常用免疫組織化學染色方法 (注：下面各種方法，均為手工操作，如沒特別說明，均在室溫下進行) 第三十三張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月ABC法 切片經(jīng)二甲苯 5分鐘。切片經(jīng)二甲苯 5分鐘。無水酒精 30秒。無水酒精 30秒。95%酒精 30秒。95%酒精 30秒。90%酒精 30秒。80%酒精 30秒。70%酒精 30秒。自來水洗。0.3%

16、H2O2甲醇處理切片10-20分鐘。水洗?？乖迯汀BS洗3次，1分鐘/次。加入血清孵育20分鐘。注: 后面所述各種方法中的切片脫蠟至水同上述ABC法中1-10步驟.第三十四張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月(一)ABC法加入二抗孵育30分鐘。PBS洗3次，2分鐘/次。加入ABC復合物，孵育30分鐘。PBS洗3次，2分鐘/次。DAB-H2O2孵育切片5-10分鐘。PBS洗，水洗。Harris蘇木素染核5-10分鐘。水洗，分化，藍化，脫水，透明并封固。第三十五張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月(二)LSAB法 (SP法) 切片脫蠟至水。0.3%H2O2甲醇處理切片10-

17、20min。水洗?？乖迯汀BS洗3次，1min/次。加入血清孵育10min。摔去血清，加入一抗孵育30-60min。PBS洗3次，每次2min。加入二抗，孵育20min。PBS洗3次，每次2min。加入SP復合物孵育20-30min。PBS洗3次，每次2min。DAB-H2O2孵育5-10min。PBS洗，水洗。Harris蘇木素染核5-10min。水洗，分化 ，藍化，脫水，透明并封固 第三十六張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月(三)二步法Envision Systems 切片脫蠟至水。0.3%H2O2甲醇處理切片10min。水洗。抗原修復。PBS洗3次，1min/次。加入一抗

18、孵育30-60min。PBS洗3次，2min /次。加入增強劑孵育20-30min。PBS洗3次，2min /次。加入酶標抗兔/鼠復合物，37孵育30min。PBS洗3次，2min /次。DAB-H2O2孵育5-10min。PBS洗，水洗。Harris蘇木素染核5min。水洗，分化，藍化，脫水，透明并封固。第三十七張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月四、抗原修復 第三十八張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月為什么要進行抗原修復？組織在制作過程中，由于化學試劑的作用封閉了抗原，又由于熱的作用致使部分抗原的肽鏈發(fā)生扭曲，以致在免疫組化的染色過程中不能將其顯示出來，為了解決上述問

19、題，利用化學試劑和熱的作用將這些抗原重新暴露出來或修正過來的過程稱為抗原修復。第三十九張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月用什么方法進行抗原修復？至今為止，抗原修復有多種方法，在這些方法中，有的是根據(jù)抗體的要求來進行，有的是根據(jù)抗原的表達程度來進行。第四十張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月(一)真空負壓抗原修復法操作方法:切片放入0.01M檸檬酸鹽緩沖液(PH6.0)，真空負壓干燥箱預先調(diào)至95，真空負壓處理10分鐘。第四十一張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月(一)真空負壓抗原修復法評價:這是一種操作簡單，效果特佳，溫度恒定，能一次性處理大量切片的方法。優(yōu)點:

20、1.各物質(zhì)的分子在失重的情況下四處飄游，增加各分子間的碰撞機會；2.有恒定的溫度，既能使甲醛固定的蛋白發(fā)生變性，又不需要使抗原修復液達到沸騰，不易掉片；3.不受器皿條件限制，不管是金屬性還是非金屬器皿都可以進行操作；4.可以一次性制作大批的切片。第四十二張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月(二)微波輻射抗原修復法操作方法:切片放入0.01M檸檬酸鹽緩沖液(PH6.0)，于微波爐內(nèi)微波輻射10分鐘，如檢測ER和PR則需要20分鐘左右。第四十三張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月(二)微波輻射抗原修復法評價:該法的特點是：產(chǎn)熱迅速，容易操作，也容易引起抗原修復液的沸騰，使用微波

21、爐時禁止使用金屬性的器皿，以防引起失火或爆炸。第四十四張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月(三)高壓抗原修復法操作方法:切片放入抗原修復液中，同容器放入高壓鍋中加熱至沸騰。蓋上壓力閥至噴汽后持續(xù)1-4分鐘。第四十五張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月(三)高壓抗原修復法評價:該法應(yīng)用高壓和高熱來促進醛鍵的斷裂，當加熱至沸騰，加上高壓閥后，汽體噴出，此時的溫度已達121左右。該法被應(yīng)用于一些較難修復的抗原，經(jīng)多次實驗認為，該法效果不錯。第四十六張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月(四)隔水熱抗原修復法操作方法:切片放入0.01M檸檬酸鹽緩沖液(PH0.6)中，同容器

22、一起放入水浴鍋中加熱，其間應(yīng)不斷用溫度計測其溫度，待抗原修復液的溫度達到有效溫度后(92)。即開始計時，持續(xù)40分鐘。第四十七張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月(四)隔水熱抗原修復法評價:該法效果不及前面三種方法，它需要較長時間的熱的作用，在早期應(yīng)用于ER和PR染色的抗原修復時，我們的修復時間為40分鐘，如果達不到這時間，效果將不理想。第四十八張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月(五)電爐加熱抗原修復法操作方法:將切片放入抗原修復液中于電爐上加熱，不時用溫度計測量溫度，當達92后，即可拔離電源，當溫度低于92時，再插上電源，如此反復持續(xù)10分鐘左右。第四十九張，PPT共一

23、百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月(五)電爐加熱抗原修復法評價:該法是在沒有上述的設(shè)備時才選用的一種方法，當然效果是最差的，因為它只是單靠熱的作用，這是遠遠不夠的，另外，電爐加熱必須常用溫度計來測量溫度，對其溫度不好控制，有時需要多次關(guān)閉電源來維持所需的溫度。第五十張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月五、做好免疫組織化學必須注意的問題第五十一張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月組織固定越新鮮越好。組織脫水必須徹底干凈。切片必須完整、均勻、平展、無皺折。切片的附貼必須牢固，使用合適的粘貼劑。切片必須烘烤附貼牢固，既要經(jīng)得起抗原修復時高溫的作用而不脫片，又不至于破壞抗原。切片脫蠟

24、必須干凈，否則將會影響結(jié)果。注意事項第五十二張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月注意事項徹底抑制內(nèi)源性過氧化物酶的活性，才能降低背景的染色。適當合理地使用封閉試劑。選擇合適的抗體。連接抗體的選用必須正確，否則可造成假陰性的現(xiàn)象。復合物的使用及孵育時間的確定。PBS的沖洗。第五十三張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月六、免疫組織化學在臨床病理診斷中的應(yīng)用病理學教研室 帥萍第五十四張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月(一)免疫組化常用抗體標志物第五十五張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 上皮性標志物 1.細胞角蛋白（Cytokeratin,CK）有20種不

25、同分子量的CK，高分子量CK見于扁平上皮、低分子量CK見于腺上皮。 CK陽性的腫瘤有：絕大多數(shù)上皮源性腫瘤，另外脊索瘤、胸腺瘤、滑膜肉瘤、上皮樣肉瘤和上皮性神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤等可呈陽性表達。第五十六張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月胃腺癌CK8陽性食道鱗癌CK5陽性第五十七張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月2.上皮膜抗原(epithelial membrane antigen EMA)EMA在乳腺與皮膚附件腫瘤中表達最強。EMA 敏感性不如CK，在肝細胞癌、基底細胞癌、胚胎癌及許多內(nèi)分泌腫瘤中不表達。EMA 特異性比CK低，在漿細胞瘤、R-S細胞、CD30陽性間變大細胞淋巴

26、瘤、神經(jīng)膜瘤中可表達。EMA與CK兩者同時應(yīng)用可提高診斷準確率。第五十八張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月乳腺小葉增生EMA陽性第五十九張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月非上皮性標志物 第六十張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月1.波形蛋白（Vimentin）絕大多數(shù)間葉組織腫瘤陽性表達。但腎細胞癌、肺大細胞癌、子宮內(nèi)膜癌，甲狀腺癌可呈陽性表達。第六十一張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月惡性纖維組織細胞瘤Vimentin陽性第六十二張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月2.肌組織標志物 結(jié)蛋白（desmin）：平滑肌及橫紋肌腫瘤的標志物 肌

27、動蛋白（actin）：平滑肌及橫紋肌腫瘤的標志物 肌紅蛋白（myoglobim MG）：橫紋肌及其腫瘤的標志物第六十三張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月胃黏膜肌層Desmin陽性第六十四張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月平滑肌肉瘤SMA陽性第六十五張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月扁桃體外橫紋肌Actin-Sarcomeric陽性第六十六張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月3.內(nèi)皮細胞及其腫瘤標志物 第八因子相關(guān)抗原(F8):血管瘤及高分化血管肉瘤表達，低分化血管肉瘤不表達 CD34：血管良惡性腫瘤及胃腸間質(zhì)瘤第六十七張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作

28、于2022年6月血管F8因子陽性第六十八張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月小血管內(nèi)皮細胞CD34陽性第六十九張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月4.組織細胞標志物 CD68 溶菌酶（Lysozyme） 特異性不強、兩者聯(lián)合應(yīng)用較好第七十張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月肝臟kupffer細胞 CD68 AEC染色第七十一張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月惡性纖維組織細胞瘤 溶菌酶 AEC染色第七十二張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月淋巴造血組織標志物1.白細胞共同抗原(LCA, CD45)，漿細胞及R-S細胞不表達。2.CD3 CD45

29、RO T細胞及T細胞淋巴瘤3.CD20 CD79 B細胞及B細胞淋巴瘤4.CD15 CD30 經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤R-S細胞標記物。 5.髓過氧化物酶(MPO) 急性粒細胞白血病、粒細胞肉瘤。第七十三張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月扁桃體CD3（T細胞標志物）第七十四張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月扁桃體CD20(B細胞標志物)第七十五張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月霍奇金淋巴瘤 CD15 R-S細胞標記物第七十六張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月神經(jīng)源性腫瘤標志物1.膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP) 各種膠質(zhì)瘤及室管膜瘤表達， 可與腦膜瘤鑒別;

30、 少突膠質(zhì)瘤陰性。第七十七張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月腦膠質(zhì)瘤GFAP第七十八張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月神經(jīng)源性腫瘤標志物2.S-100蛋白:神經(jīng)鞘瘤、少突膠質(zhì)瘤、星形細胞瘤、黑色素瘤，軟骨及脂肪組織腫瘤敏感性高、特異性較差第七十九張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月惡性黑色素瘤S-100第八十張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月神經(jīng)源性腫瘤標志物3.神經(jīng)纖維細絲蛋白（NF） 神經(jīng)節(jié)瘤、神經(jīng)母細胞瘤、嗜鉻細胞瘤表達。第八十一張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月腦膠質(zhì)瘤NF第八十二張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月4

31、.神經(jīng)特異性烯醇化酶NSE 及嗜鉻素A(CgA)：嗜鉻細胞瘤、副神經(jīng)節(jié)瘤、類癌、尤文肉瘤、Merkel細胞瘤。甲狀腺髓樣癌、肺小細胞癌等。神經(jīng)源性腫瘤標志物第八十三張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月胃神經(jīng)內(nèi)分泌癌CgA第八十四張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月其它人類黑色素瘤抗體（HMB45）黑色素細胞及黑色素瘤標志物淋巴管肌瘤病，血管平滑肌脂肪瘤，肺透明細胞癌，透明細胞肉瘤可表達。第八十五張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月惡性黑色素瘤HMB45第八十六張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月(二)常用抗體細胞內(nèi)準確定位第八十七張，PPT共一百一十二頁

32、，創(chuàng)作于2022年6月(1)細胞膜：E-Cadherin,CD31,CD56Catenin,dystrophinEGFR, HER-2C-kit-CD117LCA,CD20,CD10,CD2,CD5,CD43,CD30EMA,CEA,CA125第八十八張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月HER-2第八十九張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月(2)細胞核：Cyclins,cdk,P16ki67,PCNAMyoD1,MG,TTF-1,CDX-2P53,P63,Rb,WT1TdTER,PR,ARS-100,Calreteninherpes,HBcAg第九十張，PPT共一百一十二頁

33、，創(chuàng)作于2022年6月ER第九十一張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月(3)細胞質(zhì)：lysozyme,CD68,myeloperoxidaseHMB45,Melan Agranzyme Bsyn,CgA,NSE,PTH,ACTH,insulinFVIIIRAgPSA,surfactantCK,VIM,DM,GFAP,NFMG,AFP, HBsAgIg,CD3,CD79a第九十二張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月PCK第九十三張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月(三)免疫組織化學在腫瘤病理學中的應(yīng)用第九十四張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月1.低分化惡性腫瘤的診斷及鑒別診斷 如：低分化癌與肉瘤鑒別 CK vimentin 低分化癌與淋巴瘤鑒別 CK LCA第九十五張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月2.確定轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤的原發(fā)部位 如：淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌 Tg+ 腦轉(zhuǎn)移癌 PSA+第九十六張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月3.確定腫瘤的組織來源如：梭形細胞腫瘤： Vimentin S-100 SMA 圓形細胞腫瘤： LCA S-100 NSE HMB45 CD99 CK等第九十七張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月4.淋巴瘤