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1、關(guān)于體液免疫球蛋白測(cè)定第一張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月免疫球蛋白(immunoglobulin, Ig):是由漿細(xì)胞合成和分泌的一組具有抗體活性的蛋白質(zhì)。第二張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月重鏈性質(zhì),Ig分5類:IgG()、IgA()、IgM()、IgD()、IgE()輕鏈性質(zhì),Ig分2型:、Ig占血漿蛋白總量:20%檢測(cè)意義:反應(yīng)機(jī)體的免疫功能、診斷疾病Ig含量:血清 IgG、IgA、IgM:g/L、 IgD、IgE:mg/L 體液 IgG、IgA、IgM:mg/L 第三張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第四張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第五張,P

2、PT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 血清IgG、IgA、IgM 測(cè)定第六張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月IgG的特性和功能IgG于出生后3個(gè)月開始合成,是血清中含量最高的免疫球蛋白IgG多為單體,半衰期約為23天,占血清免疫球蛋白總量的75%80%大多數(shù)抗感染抗體與自身抗體均為IgG類IgG是唯一能通過(guò)胎盤的抗體有四個(gè)亞型(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)第七張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第八張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第九張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月IgM的特性和功能為五聚體,是分子量最大的Ig,稱巨球蛋白。IgM激活補(bǔ)體能力

3、比IgG強(qiáng)天然血型抗體是IgMIgM是個(gè)體發(fā)育過(guò)程最早能產(chǎn)生的抗體,胚胎晚期已能合成,新生兒臍帶血中若IgM水平升高,表示該兒曾有宮內(nèi)感染IgM是抗原刺激后出現(xiàn)最早的抗體,故檢測(cè)IgM水平可用于傳染病的早期診斷有2個(gè)亞型(IgM1、IgM2)第十張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月IgA的特性和功能分為血清型和分泌型兩種,血清型IgA主要由腸系膜淋巴組織中的漿細(xì)胞產(chǎn)生。而分泌型IgA(SIgA)是由呼吸道、消化道、泌尿生殖道等處的固有層中漿細(xì)胞產(chǎn)生。主要存在于初乳、唾液、淚液,以及呼吸道消化道和泌尿生殖道黏膜表面的分泌液中。分泌型IgA的合成和主要作用部位在黏膜分2個(gè)亞型:(IgA1、I

4、gA2)第十一張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第十二張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月一、血清IgG、IgA、IgM測(cè)定測(cè)定方法 單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法 免疫濁度法第十三張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月原理誤差主要原因評(píng)價(jià) 單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法第十四張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月免疫濁度法 直接透射比濁法 速率散射比濁法 注意點(diǎn) 評(píng)價(jià)第十五張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月二、血清IgG、IgA、IgM測(cè)定的臨床意義年齡 年齡與血中Ig含量有一定關(guān)系高Ig血癥: 多克隆Ig增高(感染); 單克隆Ig增高(免疫增殖?。┑虸g血癥: 先天性低Ig血癥(免疫

5、缺陷?。?; 獲得性低Ig血癥(蛋白丟失).第十六張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) 血清IgD、IgE測(cè)定 正常人血清中IgD含量很低,半衰期2.8天。膜結(jié)合型IgD(mIgD)構(gòu)成BCR,是B細(xì)胞分化發(fā)育成熟的標(biāo)志。 未成熟B細(xì)胞僅表達(dá)mIgM 成熟B細(xì)胞表達(dá)mIgM和mIgD 活化的B細(xì)胞或記憶B細(xì)胞mIgD逐漸消失 第十七張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白,主要由黏膜下淋巴組織中的漿細(xì)胞分泌,為親細(xì)胞抗體,引起I型超敏反應(yīng);與機(jī)體抗寄生蟲免疫也可能有關(guān)。第十八張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月一、 血清IgD測(cè)定及臨

6、床意義 測(cè)定方法: 放射免疫分析法 化學(xué)發(fā)光免疫分析法 免疫比濁法 酶聯(lián)免疫吸附法第十九張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 IgD:生物功能不詳 增高:類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、變態(tài)反應(yīng)性疾病、 敗血癥、新生兒溶血病 降低:意義不大第二十張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月二、 血清IgE測(cè)定及臨床意義測(cè)定方法總IgE測(cè)定:放射免疫分析法 化學(xué)發(fā)光免疫分析法 免疫比濁法 酶聯(lián)免疫吸附法特異性IgE測(cè)定:免疫斑點(diǎn)法 酶聯(lián)免疫吸附法第二十一張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月IgE臨床意義: 增高:變態(tài)反應(yīng)性疾病、寄生蟲感染、病毒感染、自身免疫性疾病。 降低:意義不大第二十二張,PPT共

7、四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第三節(jié) 尿液及腦脊液Ig測(cè)定 正常人尿液中的Ig含量甚微,當(dāng)機(jī)體的免疫功能異?;蜓装Y反應(yīng)引起腎臟疾病時(shí),可導(dǎo)致腎小球?yàn)V過(guò)膜分子屏障破壞或電荷屏障受損,從而引起球蛋白及其他大分子蛋白質(zhì)漏出增多。 生理情況下,Ig根據(jù)其分子量大小,通過(guò)血腦屏障的難易度不同,IgG、IgA、IgM在腦脊液中的濃度遞減。病理狀態(tài)時(shí),腦脊液組分發(fā)生改變。第二十三張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第二十四張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月分子屏障:腎小球?yàn)V過(guò)屏障第二十五張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月電荷屏障:1上皮細(xì)胞 2基底膜 3內(nèi)皮細(xì)胞 4被濾過(guò)物質(zhì)第二十六張

8、,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月一、尿液Ig測(cè)定及臨床意義尿液: 腎小球?yàn)V膜受損程度:選擇性蛋白尿指數(shù)(selective proteinuria index,SPI)標(biāo)本:晨尿或隨機(jī)尿SPI(尿IgG血清IgG)(尿TRF血清TRF)SPI0.1 選擇性 微小病變型腎病SPI0.2 非選擇性 膜性腎病、膜增殖性腎炎、腎病綜合癥 第二十七張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月增高有臨床意義:腎病、免疫增殖病 可根據(jù)尿內(nèi)Ig增高的類型幫助鑒別診斷腎小球疾病的種類第二十八張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月二、腦脊液Ig測(cè)定及臨床意義腦脊液: 血腦屏障受損程度:白蛋白商值白蛋白商

9、值(ALB quotient,QALB):QALB(AlbCSFAlbS)1000QALB9時(shí),提示血腦屏障無(wú)明顯受損 915 輕度受損 急慢性病毒感染、多發(fā)性硬化、神經(jīng)梅毒、帶狀皰疹神經(jīng)節(jié)炎、腦萎縮 1533 中度受損 急性神經(jīng)疏螺旋體病、條件致病性腦膜炎、吉蘭巴雷綜合征 33100 重度受損 化膿性腦膜炎、單純皰疹性腦炎、結(jié)核性腦膜炎等細(xì)菌感染性疾病 100 完全破裂 第二十九張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月區(qū)分鞘內(nèi)免疫球蛋白來(lái)源:IgG生成指數(shù)和24hIgG合成率IgG生成指數(shù)QIgGQalb(QIgG=IgGCSF/IgGS,Qalb=AlbCSF/Albs)IgG合成率/2

10、4h=(IgGCSF-IgGS/541)-(AlbCSF-AlbS/243) (IgGS/AlbS) 0.43500IgG生成指數(shù)和24hIgG合成升高時(shí),表明CSF中的IgG主要有中樞神經(jīng)系統(tǒng)鞘內(nèi)合成,多見于多發(fā)性硬化癥第三十張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第四節(jié) 血清IgG亞類測(cè)定及臨床意義Ig亞類:IgG1、IgG2、IgG3、IgG4,其含量依次下降測(cè)定方法: 單向免疫擴(kuò)散法 免疫比濁法(常用) 放射免疫分析法 酶聯(lián)免疫吸附法第三十一張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月臨床意義:IgG亞類的含量隨年齡的不同而變化IgG亞類缺陷可表現(xiàn)為:反復(fù)呼吸道感染、腹瀉、中耳炎、鼻竇

11、炎、支擴(kuò)以及哮喘等IgA缺乏癥常伴有IgG2缺陷,某些病毒感染IgG1、IgG2、IgG3下降顯著IgG亞類異常增高主要見于型變態(tài)反應(yīng)第三十二張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第五節(jié) M蛋白測(cè)定及臨床意義 M蛋白: B淋巴細(xì)胞或漿細(xì)胞單克隆異常增殖產(chǎn)生的異常單克隆免疫球蛋白 臨床上多見于多發(fā)性骨髓瘤、高丙種球蛋白血癥、惡性淋巴瘤、重鏈病、輕鏈病等 第三十三張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月M蛋白測(cè)定蛋白區(qū)帶電泳:經(jīng)典方法 計(jì)算蛋白含量和百分比免疫比濁法: 免疫球蛋白定量 準(zhǔn)確性高、快速免疫電泳: M蛋白分型免疫固定電泳: M蛋白分型及鑒定,分辨 率高第三十四張,PPT共四十四頁(yè)

12、,創(chuàng)作于2022年6月GAMIgG-型M蛋白Marker 免疫固定電泳模式圖第三十五張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第六節(jié) 輕鏈測(cè)定及臨床意義本周蛋白的檢測(cè) 樣本:尿液 方法:免疫電泳、加熱沉淀(簡(jiǎn)便易行)Ig和-Ig定量檢測(cè) 樣本:尿液、血液 方法:?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法、免疫比濁法(常用,準(zhǔn)確、快速)應(yīng)用:M蛋白血癥的分型及鑒定第三十六張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第七節(jié) 冷球蛋白的檢測(cè)冷球蛋白: 在低溫下發(fā)生沉淀,加溫后又復(fù)溶的免疫球蛋白 在低溫時(shí)產(chǎn)生冷沉淀的機(jī)制尚不十分明確 多數(shù)冷球蛋白為免疫復(fù)合物,其抗原可以是外源 性的,也可以是內(nèi)源性的第三十七張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)

13、作于2022年6月冷球蛋白的類型及臨床意義 I型:為單克隆冷球蛋白型,占25%40%;最常見為IgG或IgM。多見于免疫增生性疾病 型:?jiǎn)慰寺『投嗫寺』旌闲屠淝虻鞍?,?5%25%;最常見的組合為IgMIgG。多見于自身免疫性疾病 型:多克隆混合型冷球蛋白,約占50% ;最常見的組合為IgMIgG。多見于自身免疫性疾病以及感染性疾病 第三十八張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月標(biāo)本:在體溫條件下采集和保存靜脈血4ml,不加抗凝劑檢測(cè):靜脈血 水浴 離心 冰箱37370-412h沉淀24h內(nèi),單克隆冷球蛋白數(shù)天后出現(xiàn)為混合型冷球蛋白驗(yàn)證:將冷沉淀物置于pH4.0的0.1M乙酸鈉緩沖液 加熱35d第三十九張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月重點(diǎn)腎小球?yàn)V過(guò)膜破壞程度、血腦屏障受損程度評(píng)價(jià)指標(biāo)冷球蛋白檢測(cè)第四十張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月1.免疫應(yīng)答主要分為哪幾個(gè)階段?2.什么是免疫球蛋白?其分子基本結(jié)構(gòu)?3.免疫球蛋白分類及亞類?4.血清免疫球蛋白測(cè)定方法有哪些?5.比較單向免疫擴(kuò)散法和速率散射比濁法優(yōu)缺點(diǎn)。6.免疫球蛋白IgG、IgA、IgM測(cè)定有何臨床意義?思考題第四十一張,PPT共四十四頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月7.免疫球蛋白IgG亞類測(cè)定有何臨床意義?8.單向免疫擴(kuò)散測(cè)定中

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