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文檔簡介
1、關(guān)于分光光度測定方法第一張,PPT共十二頁,創(chuàng)作于2022年6月一、普通分光光度法1.單組分的測定 通常采用 A-C 標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量測定。2.多組分的同時(shí)測定 若各組分的吸收曲線互不重疊,則可在各自最大吸收波長處分別進(jìn)行測定。這本質(zhì)上與單組分測定沒有區(qū)別。 若各組分的吸收曲線互有重疊,則可根據(jù)吸光度的加合性求解聯(lián)立方程組得出各組分的含量。 A1= a1bca b1bcb A2= a2bca b2bcb 第二張,PPT共十二頁,創(chuàng)作于2022年6月二、示差分光光度法(示差法) 普通分光光度法一般只適于測定微量組分,當(dāng)待測組分含量較高時(shí),將產(chǎn)生較大的誤差。需采用示差法。即提高入射光強(qiáng)度,并采用濃度
2、稍低于待測溶液濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比溶液。 設(shè):待測溶液濃度為cx,標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為cs(cs cx)。則: Ax= b cx As = b cs x s =b(cx cs )=bc 測得的吸光度相當(dāng)于普通法中待測溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度之差。 第三張,PPT共十二頁,創(chuàng)作于2022年6月示差分光光度法(示差法) AAx As =b(cx cs )=bc 測得的吸光度相當(dāng)于普通法中待測溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度之差A(yù) 。 示差法測得的吸光度與c呈直線關(guān)系。由標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)的c值,則待測溶液濃度cx : cx = cs + c 第四張,PPT共十二頁,創(chuàng)作于2022年6月示差法標(biāo)尺擴(kuò)展原理: 普通法:
3、 cs的T=10%;cx的T=5% 示差法: cs 做參比,調(diào)T=100% 則: cx的T=50% ;標(biāo)尺擴(kuò)展10倍第五張,PPT共十二頁,創(chuàng)作于2022年6月三、雙波長分光光度法 不需空白溶液作參比;但需要兩個(gè)單色器獲得兩束單色光(1和2);以參比波長1處的吸光度A1作為參比,來消除干擾。在分析渾濁或背景吸收較大的復(fù)雜試樣時(shí)顯示出很大的優(yōu)越性。靈敏度、選擇性、測量精密度等方面都比單波長法有所提高。 A A2 A1 (2 1)b c 兩波長處測得的吸光度差值A(chǔ)與待測組分濃度成正比。1和2分別表示待測組分在1和2處的摩爾吸光系數(shù)。 第六張,PPT共十二頁,創(chuàng)作于2022年6月關(guān)鍵問題: 測量波長
4、2和參比波長1的選擇與組合 以兩組分x和y的雙波長法測定為例:設(shè):x為待測組分,y為干擾組分,二者的吸光度差分別為: Ax和Ay,則該體系的總吸光度差A(yù)x+y為: Ax+y = A x + A y 如何選擇波長1 、2有一定的要求。第七張,PPT共十二頁,創(chuàng)作于2022年6月選擇波長組合1 、2的基本要求是: 選定的波長1和2處干擾組分應(yīng)具有相同吸光度,即: Ay = A y2 A y1 = 0故: Ax+y = A x=(x2x1)bcx此時(shí):測得的吸光度差A(yù)只與待測組分x的濃度呈線性關(guān)系,而與干擾組分y無關(guān)。若x為干擾組分,則也可用同樣的方法測定y組分。 可采用作圖法選擇符合上述兩個(gè)條件的
5、波長組合。 在選定的兩個(gè)波長1和2處待測組分的吸光度應(yīng)具有足夠大的差值。第八張,PPT共十二頁,創(chuàng)作于2022年6月四、導(dǎo)數(shù)分光光度法 導(dǎo)數(shù)分光光度法在多組分同時(shí)測定、渾濁樣品分析、消除背景干擾、加強(qiáng)光譜的精細(xì)結(jié)構(gòu)以及復(fù)雜光譜的辨析等方面,顯示了很大的優(yōu)越性。 利用吸光度(或透光度)對波長的導(dǎo)數(shù)曲線來進(jìn)行分析: 0 e-bc假定入射光強(qiáng)度0 在整個(gè)波長范圍內(nèi)保持恒定: dI 0 /d0則:dI/d0 bc e -bc d/d 0 bc d/d 第九張,PPT共十二頁,創(chuàng)作于2022年6月導(dǎo)數(shù)分光光度法 dI/d 0 bc d/d 一階導(dǎo)數(shù)信號與試樣濃度呈線性關(guān)系; 測定靈敏度依賴于摩爾吸光系數(shù)對波長的變化率d/d。吸收曲線的拐點(diǎn)處d/d最大,故其靈敏度最高(見圖)。 同理可以導(dǎo)出其二階和三階導(dǎo)數(shù)光譜(略) 第十張,PPT共十二頁,創(chuàng)作于2022年6月請選擇內(nèi)容:第一節(jié) 基本原理第二節(jié) 紫外-可見分光光度計(jì)第三節(jié) 顯色與測量條件的選擇第四節(jié)
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