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文檔簡介
1、關(guān)于實驗探究酵母菌數(shù)量變化第一張,PPT共十四頁,創(chuàng)作于2022年6月關(guān)注本實驗中的幾個關(guān)鍵點:酵母菌的計數(shù)利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù),是一種常用的微生物計數(shù)法,也叫做顯微鏡直接計數(shù)法。優(yōu)點:直觀、快速。適用于稀釋的菌懸液(或孢子懸液),即液體培養(yǎng)基中菌體的計數(shù)。此法計得的是活菌體和死菌體的總和,又稱為總菌計數(shù)法。第二張,PPT共十四頁,創(chuàng)作于2022年6月酵母菌的計數(shù)(1)計數(shù)工具血球計數(shù)板實物圖正面圖側(cè)面圖計數(shù)室滴液處血球計數(shù)板是一種專門用于計算較大單細胞微生物的一種儀器。計數(shù)時,常采用樣方法。 第三張,PPT共十四頁,創(chuàng)作于2022年6月酵母菌的計數(shù)(1)計數(shù)工具血球計數(shù)板放大后的
2、計數(shù)池每塊計數(shù)板由H形凹槽分為2個同樣的計數(shù)池。每個計數(shù)池分為9個大方格。第四張,PPT共十四頁,創(chuàng)作于2022年6月25個中格16個小格16個中格25個小格25X16 = 400小格16X25 = 400小格每個計數(shù)室(大方格)共有400小格,總?cè)莘e為0.1mm3*抽樣檢測:516=80個小格抽樣檢測:425=100個小格第五張,PPT共十四頁,創(chuàng)作于2022年6月酵母菌的計數(shù)(2)計算: 每毫升培養(yǎng)液中的酵母菌細胞數(shù)是多少?酵母細胞個數(shù)/mL=所數(shù)小方格中細胞總數(shù)x400 x104x稀釋倍數(shù)所數(shù)的小方格數(shù)第六張,PPT共十四頁,創(chuàng)作于2022年6月例2:酵母菌的計數(shù)通常用血球計數(shù)板進行,血
3、球計數(shù)板每個大方格容積為0.1mm3 ,由400個小方格組成。現(xiàn)對某一樣液進行檢測,如果一個小方格內(nèi)酵母菌過多,難以計數(shù),應(yīng)先 后再計數(shù)。若多次重復計數(shù)后,算得每個小方格中平均有5個酵母菌,則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有 個。例1 :在用血球計數(shù)板(2mm2mm方格)對某一稀釋50倍樣品進行計數(shù)時,發(fā)現(xiàn)在一個計數(shù)室內(nèi)(蓋玻片下的培養(yǎng)液厚度為0.1mm)酵母菌平均數(shù)為16,據(jù)此估算10mL培養(yǎng)液中有酵母菌 個。2x1072108稀釋第七張,PPT共十四頁,創(chuàng)作于2022年6月例3 檢測員將1 mL水樣稀釋10倍后,用抽樣檢測的方法檢測每毫升藍藻的數(shù)量;將蓋玻片放在計數(shù)室上,用吸管吸取少許培養(yǎng)液
4、使其自行滲入計數(shù)室,并用濾紙吸去多余液體。已知每個計數(shù)室由2516400個小格組成,容納液體的總體積為01 mm3?,F(xiàn)觀察到圖中該計數(shù)室所示a、b、c、d、e 5個中格80個小格內(nèi)共有藍藻n個,則上述水樣中約有藍藻 個mL。 5n105第八張,PPT共十四頁,創(chuàng)作于2022年6月酵母菌的計數(shù)(3)計數(shù)的操作稀釋:將酵母菌培養(yǎng)液進行適當?shù)南♂尲訕悠罚涸谇鍧嵏稍锏难蛴嫈?shù)板蓋上蓋玻片,再用無菌細口滴管將稀釋的酵母菌液由蓋玻片邊緣滴入一小滴(將計數(shù)室充滿即可),讓菌液沿縫隙自行滲入計數(shù)室。注意不可有氣泡產(chǎn)生。第九張,PPT共十四頁,創(chuàng)作于2022年6月(3)計數(shù)的操作顯微計數(shù):靜止5分鐘后,先用低倍
5、鏡(1610)找到計數(shù)室所在的位置。然后根據(jù)血球計數(shù)板規(guī)格,每個計數(shù)室選取5個(或4個)中方格中的菌體進行計數(shù)。每個小方格內(nèi)約有5-10個菌體為宜。對于壓在小方格界線上的酵母菌應(yīng)取相鄰兩邊及頂角計數(shù)。如遇酵母出芽,芽體大小達到母細胞的一半時,即作為兩個菌體計數(shù)。計數(shù)一個樣品要從兩個計數(shù)室中計得的值來計算樣品的含菌量。第十張,PPT共十四頁,創(chuàng)作于2022年6月酵母菌的計數(shù)(4)血球計數(shù)板的清洗:使用完畢后,將血球計數(shù)板在水龍頭上用水柱沖洗,切勿用硬刷洗刷,洗完后自行晾干或用吹風機吹干。鏡檢,觀察每個小格內(nèi)是否有殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈,則必須重復洗滌至干凈為止。第十一張,PPT共十四頁,創(chuàng)作于2022年6月酵母菌的計數(shù)(5)注意事項:進行計數(shù)前,應(yīng)先將試管搖勻,目的是使酵母菌在培養(yǎng)液中混合均勻,以減少計數(shù)誤差。顯微鏡計數(shù)時,對于壓在小方格界線上的酵母菌,應(yīng)取相鄰兩邊及頂角計數(shù)。若一個小方格內(nèi)酵母菌數(shù)量過多,難以數(shù)清時,則可將培養(yǎng)液稀釋一定倍數(shù)后再計數(shù)。本實驗無對照實驗,酵母菌每天的數(shù)量變化可形成前后對照。血球計數(shù)板使用后,切勿用硬物洗刷,可采用浸泡和沖洗的方法清洗。第十二張,P
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