實(shí)驗(yàn)探究酵母菌數(shù)量變化

1、關(guān)于實(shí)驗(yàn)探究酵母菌數(shù)量變化第一張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月關(guān)注本實(shí)驗(yàn)中的幾個關(guān)鍵點(diǎn)：酵母菌的計數(shù)利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)，是一種常用的微生物計數(shù)法，也叫做顯微鏡直接計數(shù)法。優(yōu)點(diǎn)：直觀、快速。適用于稀釋的菌懸液（或孢子懸液），即液體培養(yǎng)基中菌體的計數(shù)。此法計得的是活菌體和死菌體的總和，又稱為總菌計數(shù)法。第二張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月酵母菌的計數(shù)（1）計數(shù)工具血球計數(shù)板實(shí)物圖正面圖側(cè)面圖計數(shù)室滴液處血球計數(shù)板是一種專門用于計算較大單細(xì)胞微生物的一種儀器。計數(shù)時，常采用樣方法。 第三張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月酵母菌的計數(shù)（1）計數(shù)工具血球計數(shù)板放大后的

2、計數(shù)池每塊計數(shù)板由H形凹槽分為2個同樣的計數(shù)池。每個計數(shù)池分為9個大方格。第四張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月25個中格16個小格16個中格25個小格25X16 = 400小格16X25 = 400小格每個計數(shù)室（大方格）共有400小格，總?cè)莘e為0.1mm3*抽樣檢測：516=80個小格抽樣檢測：425=100個小格第五張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月酵母菌的計數(shù)（2）計算： 每毫升培養(yǎng)液中的酵母菌細(xì)胞數(shù)是多少？酵母細(xì)胞個數(shù)/mL=所數(shù)小方格中細(xì)胞總數(shù)x400 x104x稀釋倍數(shù)所數(shù)的小方格數(shù)第六張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月例2:酵母菌的計數(shù)通常用血球計數(shù)板進(jìn)行，血

3、球計數(shù)板每個大方格容積為0.1mm3 ，由400個小方格組成?，F(xiàn)對某一樣液進(jìn)行檢測，如果一個小方格內(nèi)酵母菌過多，難以計數(shù)，應(yīng)先 后再計數(shù)。若多次重復(fù)計數(shù)后，算得每個小方格中平均有5個酵母菌，則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有 個。例1 :在用血球計數(shù)板（2mm2mm方格）對某一稀釋50倍樣品進(jìn)行計數(shù)時，發(fā)現(xiàn)在一個計數(shù)室內(nèi)（蓋玻片下的培養(yǎng)液厚度為0.1mm）酵母菌平均數(shù)為16，據(jù)此估算10mL培養(yǎng)液中有酵母菌 個。2x1072108稀釋第七張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月例3 檢測員將1 mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測的方法檢測每毫升藍(lán)藻的數(shù)量；將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取少許培養(yǎng)液

4、使其自行滲入計數(shù)室，并用濾紙吸去多余液體。已知每個計數(shù)室由2516400個小格組成，容納液體的總體積為01 mm3?，F(xiàn)觀察到圖中該計數(shù)室所示a、b、c、d、e 5個中格80個小格內(nèi)共有藍(lán)藻n個，則上述水樣中約有藍(lán)藻 個mL。 5n105第八張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月酵母菌的計數(shù)（3）計數(shù)的操作稀釋：將酵母菌培養(yǎng)液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂尲訕悠罚涸谇鍧嵏稍锏难蛴嫈?shù)板蓋上蓋玻片，再用無菌細(xì)口滴管將稀釋的酵母菌液由蓋玻片邊緣滴入一小滴（將計數(shù)室充滿即可），讓菌液沿縫隙自行滲入計數(shù)室。注意不可有氣泡產(chǎn)生。第九張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月（3）計數(shù)的操作顯微計數(shù)：靜止5分鐘后，先用低倍

5、鏡（1610）找到計數(shù)室所在的位置。然后根據(jù)血球計數(shù)板規(guī)格，每個計數(shù)室選取5個（或4個）中方格中的菌體進(jìn)行計數(shù)。每個小方格內(nèi)約有5-10個菌體為宜。對于壓在小方格界線上的酵母菌應(yīng)取相鄰兩邊及頂角計數(shù)。如遇酵母出芽，芽體大小達(dá)到母細(xì)胞的一半時，即作為兩個菌體計數(shù)。計數(shù)一個樣品要從兩個計數(shù)室中計得的值來計算樣品的含菌量。第十張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月酵母菌的計數(shù)（4）血球計數(shù)板的清洗：使用完畢后，將血球計數(shù)板在水龍頭上用水柱沖洗，切勿用硬刷洗刷，洗完后自行晾干或用吹風(fēng)機(jī)吹干。鏡檢，觀察每個小格內(nèi)是否有殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈，則必須重復(fù)洗滌至干凈為止。第十一張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月酵母菌的計數(shù)（5）注意事項：進(jìn)行計數(shù)前，應(yīng)先將試管搖勻，目的是使酵母菌在培養(yǎng)液中混合均勻，以減少計數(shù)誤差。顯微鏡計數(shù)時，對于壓在小方格界線上的酵母菌，應(yīng)取相鄰兩邊及頂角計數(shù)。若一個小方格內(nèi)酵母菌數(shù)量過多，難以數(shù)清時，則可將培養(yǎng)液稀釋一定倍數(shù)后再計數(shù)。本實(shí)驗(yàn)無對照實(shí)驗(yàn)，酵母菌每天的數(shù)量變化可形成前后對照。血球計數(shù)板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用浸泡和沖洗的方法清洗。第十二張，P