實(shí)驗(yàn)一生長(zhǎng)譜法

1、關(guān)于實(shí)驗(yàn)一生長(zhǎng)譜法第一張，PPT共十二頁，創(chuàng)作于2022年6月實(shí)驗(yàn)一用生長(zhǎng)譜法測(cè)定微生物的營(yíng)養(yǎng)要求第二張，PPT共十二頁，創(chuàng)作于2022年6月一、目的要求學(xué)習(xí)并掌握生長(zhǎng)譜法測(cè)定微生物營(yíng)養(yǎng)需求的基本原理和方法。第三張，PPT共十二頁，創(chuàng)作于2022年6月二、基本原理微生物的生長(zhǎng)繁殖需要適宜的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境；在缺乏某種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的、含有指示劑的培養(yǎng)基上接入某種微生物，再在接菌平板上置入這種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，經(jīng)一定條件培養(yǎng)后 , 即可通過指示劑變化情況來判斷對(duì)不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用情況。該法可以定性、定量地測(cè)定微生物對(duì)各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求，在微生物育種、營(yíng)養(yǎng)缺陷型鑒定以及飲食制品質(zhì)量檢測(cè)等諸多方面具有重要用途。第四張，P

2、PT共十二頁，創(chuàng)作于2022年6月三、實(shí)驗(yàn)器材菌種 大腸桿菌 (Escherichia coli) 、枯草芽孢桿菌 (Bacillus subtilis)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) 培養(yǎng)基（ 合成培養(yǎng)基） (NH4 )3 PO4 1 g, KCl 0.2 g, MgSO4 7H2O 0.2 g, 豆芽汁 10 mL, 瓊脂 20 g, 蒸餾水定容至 1L pH 7.05,加入 12mL 0.04%的溴甲酚紫作指示劑 (pH5.26.8) , 將顏色由黃色調(diào)為紫色。1 105 Pa滅菌 25 min。溶液和試劑 A葡萄糖、B乳糖、C麥芽糖、D蔗糖、E木糖、F半

3、乳糖。器具無菌培養(yǎng)皿、吸管、鑷子、牙簽、酒精燈、接種環(huán)等 , 另備試管無菌水 6支。第五張，PPT共十二頁，創(chuàng)作于2022年6月四、操作步驟配制培養(yǎng)基制作糖浸片將圓形打孔器 (d=0.8 cm) 打下的濾紙片 , 置入不同糖的飽和溶液中浸泡 10 min后 , 取出置 28培養(yǎng)箱中烘干備用 (最好置紫外燈下滅菌 20 30min)。制備菌懸液在已培養(yǎng) 24h的大腸桿菌 (E.coli) 等 3種斜面內(nèi)分別倒入5ml無菌水，用接種環(huán)輕輕刮下菌苔，振蕩，制成菌懸液。制平板混菌法在無菌平板內(nèi)加入上述菌懸液(1ml菌懸液/10ml培養(yǎng)基），倒入溶化冷卻至50OC左右的合成培養(yǎng)基，輕輕搖勻。涂布法將溶化

4、冷卻至50OC左右的合成培養(yǎng)基倒入無菌培養(yǎng)皿，待其凝固后，加入0.5ml菌懸液，用玻棒涂布均勻。第六張，PPT共十二頁，創(chuàng)作于2022年6月對(duì)照：培養(yǎng)基+菌0+糖0（1）處理：培養(yǎng)基+菌+糖（3混菌，3涂布）培養(yǎng)基+菌+糖0（3，混菌或涂布）培養(yǎng)基+菌0+糖（1）第七張，PPT共十二頁，創(chuàng)作于2022年6月分小區(qū)植糖在冷凝后的平皿背面 , 用記號(hào)筆畫出 6個(gè)均勻的植糖區(qū)域 (圖1) , 用無菌鑷子分別取代號(hào)為 A、B、C、D、E、F的 6種糖浸片各 1張對(duì)號(hào)放入用兩種方法接菌的平板的對(duì)應(yīng)區(qū)域中 , 并輕輕按壓 , 以免在進(jìn)行倒置培養(yǎng)時(shí)糖片脫離培養(yǎng)基平板。培養(yǎng)及觀察將已放置糖浸片后的平皿置于37

5、條件下 , 培養(yǎng) 18 24 h后 , 觀察濾紙片周圍有無菌落生長(zhǎng)以及指示劑變色程度。四、操作步驟圖 1平板分區(qū)示意圖第八張，PPT共十二頁，創(chuàng)作于2022年6月五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告結(jié)果繪圖，表示大腸桿菌等三種菌在平板上的生長(zhǎng)狀況。分析繪制表格，說明大腸桿菌等三種菌利用六種糖的情況。如何保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性？第九張，PPT共十二頁，創(chuàng)作于2022年6月實(shí)驗(yàn)安排及分組情況第一次課（第四周）：講述實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，完成實(shí)驗(yàn)步驟1：配培養(yǎng)基，滅菌第二次課（第六周）：完成實(shí)驗(yàn)步驟2、3、4、5、6等撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告分組4個(gè)人一組，分成6組，每組作兩種制平板方式。第十張，PPT共十二頁，創(chuàng)作于2022年6月注意事項(xiàng)1.做實(shí)驗(yàn)之前要想好要準(zhǔn)備哪些東西，準(zhǔn)備多少；滅菌時(shí)要想好要滅哪些東西，要滅多少。2.要嚴(yán)格無菌操作。3.加入菌懸液后要趁培養(yǎng)基尚未凝固及時(shí)倒平板，否則將會(huì)出現(xiàn)平板尚未倒好培養(yǎng)基已經(jīng)凝固于三角瓶中。4.放濾紙片時(shí)要對(duì)號(hào)入座并輕輕按壓