中草藥活性成分抗肝纖維化作用及機理研究進展

1、中草藥活性成分抗肝纖維化作用及機理研究進展【關鍵詞】中草藥摘要：從體外實驗、動物實驗、臨床研究等諸方面對中草藥活性成分如枇杷提取物、銀杏葉提取物、丹參提取物、槲皮素、苦杏仁苷、漢防己堿、川芎嗪、葫蘆素、姜黃素在治療肝纖維化方面的國內(nèi)外研究與應用新進展作了分析總結與展望。關鍵詞：中草藥；活性成分；肝纖維化肝纖維化是大多數(shù)慢性肝病所共有的病理特征，是慢性肝病開展到肝硬化的必經(jīng)階段。肝纖維化在進入肝硬變之前尚有逆轉(zhuǎn)的可能,而中藥治療肝纖維化有著悠久的歷史,積累了豐富的經(jīng)歷，逐步成為了國內(nèi)外研究的熱點。近年來,有關學者運用中藥有效成分進展抗肝纖維化研究,效果較為滿意,為探究臨床抗肝纖維化藥物提供了新的

2、途徑。本文就此方面研究進展作一綜述。1中草藥活性提取物1.1枇杷提取物枇杷提取物富含亞麻酸、亞油酸及-谷甾醇等不飽和脂肪酸，具有顯著的肝細胞保護作用。動物實驗發(fā)現(xiàn)枇杷提取物可使二甲基亞硝胺(DN)大鼠肝纖維模型中血清轉(zhuǎn)氨酶程度明顯下降，肝組織內(nèi)轉(zhuǎn)化生長因子1(TGF1)程度下降、羥脯氨酸、膠原纖維含量顯著減少，肝內(nèi)類維甲酸大幅度升高1,提示其可明顯抑制肝臟炎癥及纖維化的開展。1.2銀杏葉提取物(Egb)銀杏葉提取物主要成分為黃酮苷和銀杏內(nèi)酯，具有去除氧自由基、抑制脂質(zhì)過氧化、改善肝臟微循環(huán)等作用。近年用于實驗性肝纖維化動物顯示其有良好的保肝和抗纖維化效果。Egb能有效防止實驗性大鼠肝纖維化的發(fā)

3、生及開展,作用機制可能是通過減輕氧自由基和脂質(zhì)過氧化作用對肝細胞的損傷,抑制肝星形細胞(HS)的增殖,降低型膠原及TGF1的表達,最終抑制肝纖維化的發(fā)生2。劉詩權等3研究了銀杏葉萃取物對大鼠纖維化肝臟核轉(zhuǎn)錄因子(NF-B)的影響后發(fā)現(xiàn)EGb治療組能明顯進步肝組織超氧化物歧化酶(SD)、谷胱甘肽過氧物酶(GSH-px)活性,而丙二醛(DA)、羥脯氨酸(Hyp)含量顯著低于模型組,顯示出明顯的抗氧化作用,并隨著SD和GSH-px活性的升高,EGb治療組NF-BP65的表達顯著降低,說明Egb抗肝纖維化機理是通過抑制氧化應激對NF-B誘導的結果。2中草藥活性單體2.1槲皮素槲皮素(queretin)

4、是植物界分布廣泛,具有多種生物活性的黃酮類化合物。體外研究發(fā)現(xiàn)槲皮素呈濃度依賴性地抑制血小板衍生生長因子(PDGF)促HST6細胞的增殖和TGF1刺激的膠原合成及型原膠原RNA的表達4。近來動物實驗說明，槲皮素能降低鼠l4肝纖維化模型中肝組織膠原的含量，降低誘生型一氧化氮合酶(iNS)的表達，抑制脂質(zhì)過氧化5。LeeES等6予DN致肝纖維化的大鼠連續(xù)4周口服槲皮素(10gkg-1d-1),發(fā)現(xiàn)其能明顯降低ALT、AST、膽紅素程度，升高白蛋白程度，增加肝組織中谷胱甘肽的含量，減少DA、羥脯氨酸含量以及降低TGF1、抑制肝臟HS活化，減少I型膠原RNA的表達。2.2丹參提取物2.2.1丹酚酸丹酚

5、酸(SA-A)是丹參的水溶性成分,具有良好的抗氧化作用。體外研究發(fā)現(xiàn)SA-A可通過抗肝細胞脂質(zhì)過氧化損傷,減輕損傷肝細胞旁分泌對HS的活化。胡義揚等7以不同濃度的SA-A分別作用于l4處理過的體外肝細胞，結果發(fā)現(xiàn)相對于模型組(不加SA-A)，SA-A組那么呈濃度依賴性地明顯抑制培養(yǎng)上清液中ALT，AST活性和過氧化產(chǎn)物DA含量的升高。將上述各組的培養(yǎng)上清液(各組過氧化產(chǎn)物含量不同)作用于HS48h后,模型組(DA含量高)對HS增殖有明顯的促進作用,同時HS的型膠原合成和RNA表達增強,而SA-A組對HS的活化作用明顯減弱。不僅如此，SA-A還能直接影響成纖維細胞增殖及膠原合成。王曉玲等8研究發(fā)

6、現(xiàn)10-6lL-1的SA-A能顯著抑制成纖維細胞增殖,且能抑制細胞內(nèi)膠原合成率,但對細胞外膠原的分泌均無明顯影響。因此,SA-A能抑制成纖維細胞增殖及細胞內(nèi)膠原合成。2.2.2丹酚酸鹽丹參中的另一主要水溶性成分丹酚酸鹽(SA-B)已被證實有顯著的抗肝纖維化作用。劉成海等9觀察到丹酚酸鹽(SA-B)可明顯抑制HS增殖,抑制TGF1刺激的HS活化與細胞外基質(zhì)蛋白表達,以及TGF1刺激的HS胞內(nèi)的Sad2/3蛋白表達、磷酸化與核轉(zhuǎn)位,提示對TGF1的HS內(nèi)信號轉(zhuǎn)導與促細胞活化作用的干預是SA-B抗肝纖維化的作用機理之一。新近的研究說明，SA-B體外可抑制活化的及經(jīng)丙二醛(DA)刺激后的HS的增殖細胞

7、核抗原的表達量,從而降低細胞內(nèi)氧化程度,發(fā)揮其抗氧化和抗增殖的作用10。動物實驗發(fā)現(xiàn)SA-B能有效保護l4與DN等化學性中毒大鼠的肝損傷,預防與逆轉(zhuǎn)肝纖維化的形成。臨床對SA-B治療慢性乙型肝炎患者肝纖維化的作用進展觀察,SA-B治療組肝纖維化逆轉(zhuǎn)率達36.67%,患者血清透明質(zhì)酸(HA)、層粘連蛋白(LN)、型前膠原肽(PP)、膠原(-)均全面下降,且無明顯副作用11,顯示了良好的應用前景。2.2.3丹參素丹參素也是丹參的水溶性有效成分之一。鄭元義等12動物實驗發(fā)現(xiàn)丹參素具有顯著抑制HS增殖并促進其凋亡的作用，其作用與其濃度呈正相關性。2.4苦杏仁苷桃仁提取物苦杏仁苷(aygdalin),又

8、稱扁桃苷,具有預防肝纖維化和促進肝纖維化逆轉(zhuǎn)的作用。體外實驗發(fā)現(xiàn)，苦杏仁苷可抑制活化的HS增殖、減少其合成和分泌膠原13。近年來的研究說明,苦杏仁苷可通過進步肝組織膠原酶活性,有效抑制膠原等基質(zhì)成分的合成代謝,修復肝竇內(nèi)皮細胞同肝細胞之間的功能性基底膜,說明其能增加肝血流量,進步膠原酶活性,促進膠原分解14。張曉平等15發(fā)現(xiàn)苦杏仁苷能有效地阻止肝纖維化小鼠血清中型前膠原(P-)、型前膠原(P-)程度升高,從而預防肝纖維化的形成。臨床應用苦杏仁苷靜脈輸注治療40例血吸蟲性肝纖維化患者,結果與對照組比擬,治療組肝脾明顯縮小,尿羥脯氨酸排出顯著增加16。2.5漢防己堿漢防己堿Tetrandrine,

9、Tet為中藥防己的活性成分之一，屬雙節(jié)基異喹啉化合物的生物堿,具有鈣通道拮抗劑作用。臨床和實驗研究均說明Tet對防治肝纖維化有良好的療效。細胞學研究說明,Tet能顯著抑制T6成纖維細胞的膠原合成,明顯抑制肝貯脂細胞It細胞的增殖及轉(zhuǎn)化,有阻斷PDGF促It細胞增殖及膠原合成的作用。分子生物學研究說明,Tet對、型膠原基因的表達具有抑制作用,即在轉(zhuǎn)錄程度上抑制了膠原的合成。實驗研究發(fā)現(xiàn)該藥能抑制l4所誘導的大鼠肝纖維化,顯著減少肝臟總膠原、型膠原、型膠原的含量。將其和HS共同培養(yǎng),可減少細胞內(nèi)DNA含量,但不影響細胞生存,使活性HS的標志-平滑肌肌動蛋白(-SA)表達下降17。進一步研究發(fā)現(xiàn)Te

10、t能顯著抑制l4誘導肝纖維化大鼠肝組織-fs和-junRNA表達,并能在轉(zhuǎn)錄程度抑制肝纖維化的發(fā)生、開展18。提示Tet可通過調(diào)節(jié)核轉(zhuǎn)錄因子-fs和-junRNA的表達及AP-1DNA結合活性而產(chǎn)生抗肝纖維化作用。此外，Tet還可抑制肝纖維化大鼠組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIP1)RNA的表達,從而促進細胞外基質(zhì)(E)的降解19。臨床觀察研究115例慢性肝病患者口服Tet6個月后,血清HA、P含量顯著降低(0.01),其中14例肝纖維化消失,54例膠原纖維沉積明顯減輕,19例膠原纖維輕度減輕,炎細胞浸潤明顯減輕或消失,It細胞數(shù)量減少,與肝泰樂對照有顯著性差異(0.01)20。2.6川芎嗪川芎

11、嗪(huanxingzine)是川芎的根莖中別離提純的一種生物堿。王紅等21的研究說明l4誘導大鼠肝纖維化后,給予川芎嗪后可降低肝纖維化大鼠血清DA、P、HA及肝組織中的DA、HA含量,說明其抗肝纖維化作用可能局部與其抗脂質(zhì)過氧化作用有關。姬成偉等22進一步發(fā)現(xiàn)川芎嗪能明顯抑制肝星形細胞的增殖與活化，由此推測川芎嗪有可能通過抗脂質(zhì)過氧化而抑制肝星形細胞增殖、活化。臨床上運用川芎嗪治療慢性乙肝肝纖維化82例時發(fā)現(xiàn)經(jīng)川芎嗪治療后患者肝功能及肝纖維化指標(HA、P-、LN、-)較治療前明顯好轉(zhuǎn)23,說明其有較強的抗肝纖維化作用。2.7葫蘆素(uurbitainB)葫蘆素源于甜瓜蒂及絲瓜等植物種子中,

12、為苦味苷元成分。徐天雄等24應用九芝堂肝立克片(每片含葫蘆素0.08g)對46例中度慢性乙型肝炎進展治療,結果說明在一般護肝降酶退黃的根底上加用葫蘆素可增強P-、-的轉(zhuǎn)化及降低HA的程度,抑制膠原和基質(zhì)合成,促進其降解和吸收,從而到達抑制肝內(nèi)纖維化的作用。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.8姜黃素姜黃素uruin是一種從姜黃中提取的酸性酚類物質(zhì)，主鏈為不飽和脂族及芳香族基團。在體外，姜黃素可減少肝星形細胞DNA的合成，下調(diào)型膠原蛋白及其1鏈RNA的表達25。楊偉峰等26發(fā)現(xiàn)姜黃素可顯著抑制HS增殖,使細胞周期停滯于G2/期,并誘導其凋亡,其作用具有時間和劑量依賴性。進一步研究發(fā)現(xiàn)姜黃素對HS并無細胞毒

13、性作用,卻劑量依賴地抑制HS增殖,不同程度抑制型膠原、透明質(zhì)酸和層粘連蛋白分泌27。姜黃素也具有顯著的抗氧化作用。劉永剛等28發(fā)現(xiàn)姜黃素能顯著抑制l4損傷原代培養(yǎng)大鼠肝細胞所引起的ALT、乳酸脫氫酶(LDH)活性的升高,同時抑制DA、N的產(chǎn)生及進步SD活性,明顯改善肝細胞存活率，說明姜黃素能有效抑制l4造成的原代培養(yǎng)大鼠肝細胞損傷，降低氧化應激程度。動物實驗中發(fā)現(xiàn)對于肝纖維化大鼠，連續(xù)30d給予姜黃素300g(kgd)-1口服，可減少肝臟膠原沉積和型膠原RNA的表達25。以上研究說明姜黃素作為一種抗氧化劑可保護肝細胞，抑制HS增殖，減輕肝纖維化程度。3近況與展望經(jīng)過多年的研究,中藥提取物治療肝

14、纖維化獲得了較大成績,發(fā)現(xiàn)了許多新的有效成分并作了較深化的研究,一些單體如甘草甜素、苦參堿、川芎嗪等已試用于臨床,效果較為滿意。雖然近幾年中藥抗肝纖維化的實驗研究已從整體程度到達細胞分子程度,不少已深化到基因表達調(diào)控程度；但中藥抗肝纖維化活性成分的別離純化、療效評定、作用機理方面研究仍較薄弱。再那么肝纖維化病因復雜，其中病毒性肝炎致肝纖維化占大多數(shù)，而目前兼有抗病毒、保肝、抗肝纖維化的有效成分為數(shù)不多，作用有限。在今后的研究工作中,一方面要尋找新的有效成分,另一方面需開展已有的幾種有效成分之間的作用比擬,進一步說明不同成分的主要作用機理,以尋找療效更佳的藥物。參考文獻：1Kusunse，Qiu

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