阿莫西林合成酶標準

1、Q/ABVK湖南福來格生物技術(shù)有限公司企業(yè)標準Q/ABVK 009 2010阿莫西林合成酶（IPA-SA）2010-10-10 實施2010-10-10 制訂湖南福來格生物技術(shù)有限公司發(fā)布Q/ABVK 008 2010本標準依據(jù)GB/T1.1-2000標準化工作導則 第1部分：標準的結(jié)構(gòu)和編寫規(guī)則編寫本標準化由湖南福來格生物技術(shù)有限公司提出。本標準化由湖南福來格生物技術(shù)有限公司起草。本標準主要起草人：柳杏輝、陳梅。本標準的復審周期為三年。本標準2010年10月制定并實施，現(xiàn)用標準為2010年版。Q/ABVK 008 2010阿莫西林合成酶（IPA-SA）1范圍本標準規(guī)定了阿莫西林合成酶（IPA

2、-SA）的技術(shù)要求，試驗方法，檢驗規(guī)則、包裝、運輸、貯存。本標準適應于合成阿莫西林等其他相關(guān)產(chǎn)品的生物催化劑（酶）。2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件， 其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標準，但鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議的各方研究 使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。GB 191包裝儲運圖示標志QB/T 1803-1993工業(yè)酶制劑通用試驗方法QB/T 1804-1993工業(yè)制劑通用檢驗規(guī)則和標志QB/T 1805.3-1993工業(yè)用蛋白酶制劑JJF 1070-2005定量包裝商品凈

3、含量計量檢驗規(guī)則國家技術(shù)監(jiān)督局172號（1997）產(chǎn)品標識標注規(guī)定國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局令（2005）第75號定量包裝商品計量監(jiān)督管理辦法中國藥典2005年版二部。3定義阿莫西林合成酶（IPA-SA）:即本標準中的阿莫西林合成酶（IPA-SA）。4 技術(shù)要求理化指標外觀：本品為黃色或棕色球形顆粒粒徑（250 450 W m）: 95 %活力（28 C、濕品）： 80 u/g?-內(nèi)酰胺酶：不得本出（開環(huán)值w 0.5ml）含水率 60 %凈含量偏差應符合定量包裝商品計量監(jiān)督管理辦法規(guī)定5檢驗方法檢測樣品的準備不含保護溶液的成品酶：直接取樣品進行檢測。含保護溶液的成品酶：取樣品約30g,置5010

4、0ml的2#芯漏斗中，用去離子水洗滌三次，抽干至無水滴流出后備用（若 暫不進行檢測應用干凈干燥的容器密封保存以防水份蒸發(fā)）。外觀檢測取樣品1g左右置透明玻璃容器中，室內(nèi)自然光下目測。粒徑檢測取樣品少量，在微鈉粒度儀（ winner 99）下，按微鈉粒度儀（winner 99）操作規(guī)程對樣品進 行檢測。Q/ABVK 008 2010活力（28 C、濕品）檢測原理青霉素（Pen G）在阿莫西林合成酶（IPA-SA ）作用下轉(zhuǎn)化成 6-APA和苯乙酸，用 NaOH商定苯乙 酸，卞據(jù)NaOH勺消耗量計算阿莫西林合成酶（IPA-SA ）的活力。PnjnllmGK IFA_EA6AFAPAAKCmH 舊

5、KNQ6-CHOIQ+CsH 版 5MW 372 49MW 216.25mw 174 25酶活力定義在一定反應條件下，每克阿莫西林合成酶（ IPA-SA）每分鐘轉(zhuǎn)化Pen G生成6-APA的微摩爾數(shù)。溶液配制0.02mol/L、pH8.0的磷酸鹽緩沖液稱取4.76g K 2HPO-3HQ 0.55g KH 2PO溶解于950ml去離子水中，用 0.1mol/L 的NaOH容液調(diào) pH至8.0 ,再用去離子水定容至 1000ml。5%W霉素鉀溶液稱取青霉素鉀鹽10.00g ,用0.02mol/L、pH8.0的磷酸鹽緩沖液溶解（加 150ml左右），再定 容至200ml,溶液現(xiàn)配現(xiàn)用。0.1mol

6、/L NaOH（參照中華人民共和國藥典）儀器自動滴定裝置（漿式攪拌，恒溫， pH自動滴定儀）。檢測精確稱取樣品200mg于50ml的燒杯中，加入預熱到28c的40ml 5%勺青霉素鉀溶液，開啟攪拌，控制反應溫度 28 C,反應中用 0.1 mol/L NaOH液調(diào)pH至8.0 ,控制反應pH8.0 ,記錄約 10分鐘左右NaOH的消耗體積（ml）。活力（28 C、濕品）計算活力（28 C、濕品）=VNa0H（ml yCNa0H （mol / L 產(chǎn)1000 （u/g） W g T minVNaOH滴定中消耗的 NaOF#積（ml）CNaOH NaOHm的摩爾濃度（mol/L ）W:樣品的重量（

7、g）T:滴定時間（min）?-內(nèi)酰胺酶檢測溶液配制（1）磷酸鹽緩沖液（pH7.0）取磷酸氫二鉀9.64g與磷酸二氫鉀3.14g ,加去離子水至1000ml。6-APA溶液配制稱取0.627g6-APA ,用100ml磷酸鹽緩沖液（pH7.0）溶解。（3）醋酸鈉緩沖液（pH4.5）取冰醋酸69.3 ml,加水至1250 ml,另取結(jié)晶醋酸鈉 136.5g,加去離子水至1000 ml,再將兩溶 液混合均勻。0.005mol/L碘滴定液（參照中華人民共和國藥典）Q/ABVK 008 20100.05mol/L的碘滴定液用pH4.5的醋酸-醋酸鈉緩沖液稀釋10倍即得。該溶液最好現(xiàn)配現(xiàn)用。0.005mo

8、l/L硫代硫酸鈉滴定液（參照中華人民共和國藥典）0.01mol/L硫代硫酸鈉滴定液用去離子水稀釋20倍即得。該溶液最好現(xiàn)配現(xiàn)用。測定樣品：量取6-APA溶液50ml,置100ml的錐形瓶中，加入總酶活為 100U&右的固定化酶，記錄固定化酶的重量W樣（g）,置恒溫振蕩器37c振搖1小時（振蕩頻率160rppm）,快速取出過濾。精密量取濾液2ml（也可直接從上層取清液，注意不能有酶），立即加至已加入0.005mol/L碘滴定液10ml的250ml的碘量瓶中，在室溫暗處放置15分鐘，用0.005mol/L的硫代硫酸鈉滴定液滴定，至近終點時，加淀粉指示液5滴，繼續(xù)滴定至藍色消失，記錄消耗的硫代硫酸鈉

9、滴定液體積V樣（ml）?？瞻祝撼患訕悠吠猓溆嗖僮魍?，記錄消耗的硫代硫酸鈉滴定液體積V空（ml）。計算：開環(huán)值=（V空-V樣）X 100+U+ W樣（ml）含水率檢測稱取樣品約1g,用快速水份測定儀（紅外），按水份測定儀（紅外）操作規(guī)程，于130 c對樣品進行檢測（可采用其它干燥設(shè)備在130c下干燥失重的方法檢測）。凈含量偏差檢測按JJF1070規(guī)定進行。6檢驗規(guī)則組批生產(chǎn)中混料后，同一罐消毒固定化酶為一個批號。出廠檢驗產(chǎn)品需經(jīng)生產(chǎn)單位的質(zhì)檢部門按本標準的要求檢驗合格，開具合格證書后方可出廠。出廠檢驗項目：外觀、酶活力、？-內(nèi)酰胺酶。抽樣：同一批產(chǎn)品中，分別從上、中、下部位各取30-40g

10、,混合均勻，隨意抽檢。型式試驗產(chǎn)品在下列情況之一時應進行型式試驗：a）新產(chǎn)品試制鑒定正式生產(chǎn)后，如材料、結(jié)構(gòu)、工藝有較大改變，可能影響產(chǎn)品性能時；b）產(chǎn)品長期停產(chǎn)，恢復生產(chǎn)時；c）出廠檢驗結(jié)果與上次型式試驗有較大差異時；d）國家質(zhì)量監(jiān)督機構(gòu)提出型式檢驗要求時；e）連續(xù)生產(chǎn)時每兩年進行一次。型式試驗項目：為本標準規(guī)定的全部項目或按檢驗細則的規(guī)定執(zhí)行。抽樣：從出廠檢驗合格的產(chǎn)品中隨機制取有代表性的樣品進行檢驗，或按檢驗細則的規(guī)定執(zhí)行。判定檢驗中若有不合格項目，可從該批產(chǎn)品中重新加倍抽樣復檢，并以復檢結(jié)果作為最后判定依據(jù)，或按檢驗細則的規(guī)定執(zhí)行。Q/ABVK 008 20107 標志、包裝、運輸和貯存標志產(chǎn)品的包裝標志必須符合國家技術(shù)監(jiān)督局172號（ 1997）產(chǎn)品標識標注規(guī)定，有以下內(nèi)容：制造廠名稱及地址；生產(chǎn)日期；產(chǎn)品名稱/型號；產(chǎn)品