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1、PAGE PAGE 8課題1DNA的粗提取與鑒定一、選擇題1在混合物中提取DNA分子的基本思路是()A根據(jù)各種大分子的理化性質(zhì)的差異B根據(jù)各種大分子的理化性質(zhì)的共性C根據(jù)各種大分子在細胞內(nèi)的功能D根據(jù)各種大分子的結(jié)構(gòu)和在細胞內(nèi)的位置解析:選A在混合物中提取DNA分子的基本思路是根據(jù)各種大分子的理化性質(zhì)的差異,A正確。2在采用雞血為材料對DNA進行粗提取的實驗中,若需進一步提取雜質(zhì)較少的DNA,可以依據(jù)的原理是()A在物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L的氯化鈉溶液中DNA的溶解度最小BDNA與二苯胺在沸水浴的條件下反應(yīng)呈現(xiàn)藍色CDNA不溶于酒精而細胞中的一些物質(zhì)易溶于酒精D質(zhì)量濃度為0.1 g/
2、mL的檸檬酸鈉溶液具有抗凝血作用解析:選C在物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L的氯化鈉溶液中DNA的溶解度最小,提取的DNA含有的雜質(zhì)較多;DNA與二苯胺在沸水浴的條件下反應(yīng)呈現(xiàn)藍色是鑒定DNA的原理;由于DNA不溶于酒精溶液,而細胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精溶液,因此向含有雜質(zhì)的DNA中加入體積分數(shù)為95%的冷酒精溶液能進一步提純DNA;質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的檸檬酸鈉溶液具有抗凝血作用,其目的是防止血液凝固,而不是提取雜質(zhì)較少的DNA。3在蛋白質(zhì)和DNA的混合液中,要想得到較純的DNA,可采用的方法有()向混合液中加入足量的蒸餾水向混合液中加入DNA水解酶向混合液中加入冷卻的體積分數(shù)為9
3、5%的酒精向混合液中加入蛋白酶ABC D解析:選BDNA分子在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,在冷卻的酒精中可析出,據(jù)此可將DNA和蛋白質(zhì)分離;DNA水解酶能將DNA水解成脫氧核苷酸,而蛋白酶則將蛋白質(zhì)水解成可溶性的多肽,從而將蛋白質(zhì)與DNA分離。4在DNA的粗提取過程中,先后兩次向燒杯中加入蒸餾水的作用分別是()A稀釋血液;沖洗樣品B使血細胞破裂;降低NaCl的濃度使DNA析出C使血細胞破裂;增大DNA的溶解量D使血細胞破裂;提取含雜質(zhì)較少的DNA解析:選B在DNA的粗提取過程中,將血液靜置,上清液去掉后,向血細胞液中加入蒸餾水,使血細胞吸水漲破,使細胞核內(nèi)的遺傳物質(zhì)釋放;第
4、二次是向溶有DNA的物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液中緩緩加入蒸餾水,使NaCl溶液物質(zhì)的量濃度降至0.14 mol/L,析出DNA。5在DNA的粗提取和鑒定實驗中,有兩次DNA的沉淀析出,其依據(jù)的原理是()DNA在NaCl溶液物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L時溶解度最低DNA在冷卻的體積分數(shù)為95%的酒精溶液中能沉淀析出A兩次都是B兩次都是C第一次是,第二次是D第一次是,第二次是解析:選C第一次沉淀析出是利用濃NaCl溶液溶解核內(nèi)DNA之后,加蒸餾水稀釋NaCl溶液至物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L,使DNA溶解度最低而析出;第二次沉淀析出是用冷酒精溶液使DNA凝集并溶解非DN
5、A物質(zhì),達到提純DNA的目的。6DNA粗提取實驗中,應(yīng)盡可能避免DNA斷裂和降解,下列相關(guān)操作可達到此目的的是()A以菜花為材料進行研磨時,可以適當(dāng)加熱以促進DNA溶解B向DNA溶液中迅速加入蒸餾水,使DNA快速析出C以血液為實驗材料時,可加入檸檬酸鈉D向DNA溶液中加入冷卻的酒精并沿同一方向緩慢攪拌解析:選D適當(dāng)加熱不會促進DNA溶解,A錯誤;在0.14 mol/L的NaCl溶液中,DNA的溶解度最低,因此用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14 mol/L,可使DNA析出,B錯誤;以血液為實驗材料時,可加入檸檬酸鈉,以防止血液凝固,但這并不能避免DNA斷裂和降解,C錯誤;DNA不溶于酒精,因
6、此可向DNA溶液中加入體積分數(shù)為95%的冷酒精,并沿同一方向緩慢攪拌析出DNA,D正確。7(2019泰州檢測)下列關(guān)于“DNA粗提取與鑒定實驗”的敘述,正確的是()A洗滌劑能瓦解細胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度B將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍C常溫下菜花勻漿中有些酶類會影響DNA的提取D加入冷卻的酒精后用玻璃棒快速攪拌濾液會導(dǎo)致DNA獲得量增多解析:選C洗滌劑能瓦解細胞膜,但是并不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度,A項不正確;鑒定DNA時,須先將DNA絲狀物溶于2 mol/L的NaCl溶液中,再加入二苯胺試劑并沸水浴加熱,冷卻后變藍,B項不正確;菜花勻漿中含有DN
7、A水解酶,常溫下其活性較高,可催化DNA水解從而影響DNA的提取,C項正確;加入冷卻的酒精后應(yīng)用玻璃棒緩慢地并沿一個方向攪拌濾液,否則會導(dǎo)致DNA絲狀物斷裂進而使獲得量減少,D項不正確。8在利用雞血進行“DNA的粗提取與鑒定”的實驗中,相關(guān)敘述正確的是()A用蒸餾水將NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度調(diào)至0.14 mol/L,濾去析出物B調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分雜質(zhì)C將絲狀物溶解在物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液中,加入二苯胺試劑即呈藍色D用植物替代雞血作為實驗材料,其實驗操作步驟相同解析:選B用蒸餾水將NaCl溶液物質(zhì)的量濃度調(diào)至0.14 mol/L,可使DNA
8、析出,A錯誤;調(diào)節(jié)NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度至2 mol/L,過濾可除去不溶于其中的雜質(zhì);直接加入木瓜蛋白酶也可水解蛋白質(zhì),去除部分雜質(zhì),B正確;在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺試劑呈藍色,C錯誤;如果實驗材料是植物細胞,需要先用洗滌劑溶解細胞膜,D錯誤。9下圖是利用雞血粗提取DNA的基本操作,下表中操作目的不能實現(xiàn)的是()選項燒杯甲中的試劑燒杯乙中的液體或物質(zhì)操作目的A蒸餾水雞血細胞液使雞血細胞吸水漲破B蒸餾水含DNA的濃NaCl溶液除去不溶于低濃度NaCl溶液中的雜質(zhì)C冷卻的酒精含DNA的濃NaCl溶液除去溶于酒精中的雜質(zhì)D2 mol/L NaCl溶液紗布上的黏稠物除去不溶于2 mol/L
9、 NaCl溶液中的雜質(zhì)解析:選B在DNA粗提取實驗中,雞血中加入蒸餾水的目的是使血細胞吸水漲破,A項正確;將燒杯甲中的蒸餾水加入到含DNA的濃NaCl溶液(2 mol/L)的燒杯乙中,其目的是使NaCl溶液的濃度降低至0.14 mol/L,此時DNA在NaCl溶液中的溶解度最小,從而使DNA析出,B項錯誤;DNA不溶于酒精溶液,細胞中的某些蛋白質(zhì)可溶于酒精,因此,將冷卻的酒精加入到含DNA的濃NaCl溶液中,可除去溶于酒精中的雜質(zhì),C項正確;將燒杯甲中的2 mol/L的NaCl溶液加入到燒杯乙中,紗布上的黏稠物中的DNA會溶解在2 mol/L的NaCl溶液中,可除去不溶于2 mol/L的NaC
10、l溶液中的雜質(zhì),D項正確。10(2019泰州檢測)甲、乙兩圖為“DNA的粗提取與鑒定”實驗中涉及的兩個操作裝置圖。相關(guān)敘述正確的是()A圖甲的燒杯和圖乙的試管中所用溶劑都為NaCl溶液,但兩者濃度不同B圖乙試管經(jīng)稍稍加熱后即可觀察到一支試管中的溶液明顯變藍,另一支試管中的溶液不變藍C圖甲操作需用玻璃棒迅速攪拌以使DNA析出,并纏繞在玻璃棒上D圖乙操作中所用的二苯胺需現(xiàn)配現(xiàn)用以達到較好的鑒定效果解析:選D圖甲燒杯中為冷酒精溶液,圖乙試管中為NaCl溶液,A錯誤;圖乙試管需要在沸水中加熱5 min,B錯誤;圖甲用玻璃棒沿一個方向輕輕攪拌,卷起絲狀物,C錯誤;圖乙操作中所用的二苯胺最好現(xiàn)配現(xiàn)用,否則
11、二苯胺會變成淺藍色,D正確。二、非選擇題11如圖是“DNA粗提取與鑒定”的相關(guān)實驗步驟。請據(jù)圖分析回答下列問題。(1)雞血細胞是進行該實驗較好的實驗材料,這是因為_。從雞血細胞中釋放出核物質(zhì)的處理方法是_。(2)圖A表示釋放核物質(zhì)后進行過濾的過程,過濾后取_(填“濾液”或“析出物”)進行下一步實驗;圖B表示的相關(guān)操作過程中,加入2 mol/L NaCl溶液的作用是_;圖C表示在濾液中加入冷卻的95%的酒精,其目的是_。(3)為鑒定實驗所得絲狀物的主要成分是DNA,可滴加_溶液,結(jié)果絲狀物被染成綠色。(4)圖D中a試管為對照組,b試管為實驗組。a試管現(xiàn)象_;b試管現(xiàn)象_。在沸水中加熱的目的是_,
12、同時說明DNA對高溫有較強的_。a試管在實驗中的作用是_。b試管中溶液顏色的變化程度主要與_有關(guān)。解析:圖A表示釋放核物質(zhì)后進行過濾的過程,紗布上的過濾物主要是細胞膜、核膜的碎片等雜質(zhì),而DNA主要存在于下面的濾液中,所以過濾后應(yīng)取濾液進行下一步實驗。DNA不溶于冷酒精,而其他一些物質(zhì)可以溶于冷酒精,從而可進一步提純DNA。甲基綠為比較常用的細胞核染色劑,染色后細胞核中染色體呈綠色,可以用來鑒定DNA。答案:(1)雞血細胞核中DNA含量豐富,材料易得向雞血細胞溶液中加入蒸餾水并攪拌(2)濾液溶解DNA分子提取雜質(zhì)更少的DNA(或去除脂溶性雜質(zhì))(3)甲基綠(4)溶液不變藍溶液變藍加快顏色反應(yīng)速
13、度耐受性對照加入DNA(絲狀物)的多少12以下是有關(guān)DNA粗提取實驗的閱讀材料:A核酸極不穩(wěn)定,在較為劇烈的化學(xué)、物理因素和酶的作用下很容易降解。但檸檬酸鈉溶液對DNA具有保護作用。BDNA核蛋白在1 mol/L NaCl溶液中溶解度很高,但在0.14 mol/L NaCl溶液中的溶解度很低;而RNA核蛋白溶于0.14 mol/L NaCl溶液。C用苯酚處理,可使蛋白質(zhì)變性,且留在苯酚層內(nèi);在DNA溶液中加入2.5倍體積、體積分數(shù)為95%的酒精,可將DNA分離出來。DDNA在強酸環(huán)境下,水解產(chǎn)生脫氧核糖等小分子物質(zhì),它與二苯胺酸性溶液反應(yīng),能生成藍色化合物。E實驗材料與器械:檸檬酸鈉溶液、石英
14、砂、0.14 mol/L NaCl溶液、1 mol/L NaCl溶液、蒸餾水、苯酚、95%酒精、二苯胺試劑、濃硫酸、花椰菜、研缽、燒杯、漏斗、玻璃棒、量筒、石棉網(wǎng)、酒精燈、吸管、試管等。F實驗步驟:研磨得勻漿過濾得濾液濾液稀釋6倍離心處理得沉淀物沉淀物再溶解加苯酚靜置后去上清液提取出DNADNA鑒定。請根據(jù)以上材料回答下列問題:(1)研磨時,取10 g花椰菜,加適量的石英砂、_和_。(2)將濾液稀釋6倍,其目的是_。(3)取沉淀物,置于2 mL 1 mol/L NaCl溶液中,使DNA核蛋白再次溶解,再加2 mL苯酚充分振蕩后靜置,待其分層后棄其上層的苯酚。該步驟的目的是除去_。(4)將剩余溶
15、液中的DNA提取出來的方法是_。(5)證明提取物確實是DNA分子的方法是_。解析:(1)在研磨時加入少許石英砂是為了增大摩擦力,加快研磨的速度。加入1 mol/L NaCl溶液是為了溶解DNA核蛋白,而加入檸檬酸鈉溶液是為了保護DNA不被破壞。(2)在0.14 mol/L NaCl溶液中,DNA核蛋白的溶解度最低,所以要將1 mol/L NaCl溶液稀釋,使DNA核蛋白析出。(3)前一步提取的是DNA核蛋白,而需要的是DNA,因此需要把DNA核蛋白進一步提純。用苯酚處理,可使蛋白質(zhì)變性,且留在苯酚層內(nèi),用這樣的方法可以去除蛋白質(zhì)。(4)根據(jù)題中所給信息,在DNA溶液中加入2.5倍體積、體積分數(shù)
16、為95%的酒精,可將DNA分離出來,可用玻璃棒攪成團取出。(5)DNA在強酸環(huán)境下,水解產(chǎn)生脫氧核糖等小分子物質(zhì)。它與二苯胺酸性溶液反應(yīng),能生成藍色化合物。用此種方法可以鑒定所提取的物質(zhì)是否為DNA。答案:(1)1 mol/L NaCl溶液檸檬酸鈉溶液(2)使DNA核蛋白的溶解度逐漸降低(3)蛋白質(zhì)(4)向下層DNA溶液中加2.5倍體積、體積分數(shù)為95%的酒精,并用玻璃棒沿一個方向攪拌,在玻璃棒上的成團物即是DNA(5)用適量的濃硫酸處理提取物,再滴加二苯胺酸性溶液試劑數(shù)滴,反應(yīng)后有藍色出現(xiàn)即可證明提取物是DNA13如圖表示以雞血為實驗材料進行DNA的粗提取與鑒定的操作程序,請分析回答下列問題
17、:(1)步驟一中,向雞血細胞液中加入_并攪拌,可使雞血細胞破裂。(2)步驟二中,過濾后收集含有DNA的_。(3)步驟三、四的操作原理是_。步驟四通過向溶液中加入_調(diào)節(jié)NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度至_mol/L時,DNA將會析出,過濾去除溶液中的雜質(zhì)。(4)步驟七:向步驟六過濾后的_中,加入等體積的冷卻的_,靜置23 min,溶液中會出現(xiàn)_色絲狀物,這就是粗提取的DNA。(5)步驟八:DNA遇_試劑,沸水浴5 min,冷卻后,溶液呈_色。解析:紅細胞應(yīng)用蒸餾水,使之吸水漲破。DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,在2 mol/L的NaCl溶液中DNA溶解,在0.14 mol/L的NaCl溶液
18、中DNA析出。可通過加入蒸餾水將2 mol/L NaCl溶液稀釋為0.14 mol/L的NaCl溶液使DNA析出。DNA不溶于冷酒精,遇二苯胺沸水浴加熱呈藍色。答案:(1)蒸餾水(2)濾液(3)DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,通過控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì)蒸餾水0.14(4)濾液酒精白(5)二苯胺藍14DNA的粗提取與鑒定實驗中,A、B、C、D、E五個小組除下表中所列處理方法不同外,其他操作步驟均相同且正確,但實驗結(jié)果卻不同。請回答下列問題:組別實驗材料提取核物質(zhì)時加入的溶液去除雜質(zhì)時加入的溶液DNA鑒定時加入的試劑A雞血蒸餾水體積分數(shù)為95%的酒精(25 )二苯胺B菜花蒸餾水體積分數(shù)為95%的酒精(冷卻)雙縮脲C人血漿蒸餾水體積分數(shù)為95%的酒精(冷卻)二苯胺D人血細胞2 mol/L的氯化鈉0.14 mol/L的氯化鈉雙縮脲E雞血蒸餾水體積分數(shù)為95%的酒精溶液(冷卻)二苯胺(1)實驗材料選擇錯誤的組別是_,其原因是_。(2)若實驗步驟(不包括實驗材料)均正確,但得不到DNA的組別是_。(3)沸水浴中試管顏色變藍的組別是_;藍色較淡的是_,其原因是_。(4)B組實驗不成功的最主要原因是_。解析:(1)人的血漿中沒有
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