同濟醫(yī)院檢驗科ISO15189體系文件06乙型肝炎表面抗原(HBsAg)測定

1、同濟大學附屬同濟醫(yī)院檢驗科免疫組項目操作指導書TJYYJYKMY/XMZ406第2版標題：乙型肝炎表面抗原(HBsAg)測定第4章 第6號第 PAGE 3 頁 共 NUMPAGES 3 頁 目的:測定血清或其它體液中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的含量。 適用范圍:同濟醫(yī)院檢驗科免疫室，僅用于弱陽性復查。 項目名稱：乙型肝炎表面抗原(HBsAg)測定。 檢測方法：微粒子酶免疫法。5 原理：采用微粒子酶免疫分析方法測定HBsAg。待測血清中的HBsAg與包被了HBsAg抗體的免疫微粒子反應,形成免疫復合物，加入堿性磷酸酶標記抗體，抗HBsAg抗體與上述免疫復合物反應形成雙抗體夾心免疫復合物,洗滌

2、后加入酶的熒光底物,產(chǎn)生的熒光強弱與待測的HBsAg含量相關。6. 試劑：6.1 品牌：美國雅培公司。6.2 包裝規(guī)格：100人份。6.3 內(nèi)含物：6.3.1 鼠抗HBsAg抗體包被的微粒（5.1ml）X1。6.3.2 堿性磷酸酶標記的兔抗HBsAg結合物（15.5ml）X1。6.3.3 生物素標記的羊抗IgG（17.6ml）X1。7. 儀器：雅培AXSYM熒光免疫分析儀。8 操作步驟：8.1 打印工作單：8.1.1 打開電腦及打印機電源,8.1.2 雙擊齊效檢驗系統(tǒng),登入自己的工號與密碼；8.1.3 雙擊報告處理,單擊標本申請信息打開標本申請明細信息查詢,打開左上角的所有信息,選擇未生成報告

3、信息。8.1.4 在檢驗項目處選擇HBsAg執(zhí)行查詢,點擊打印申請單，打印出工作單。8.2 排列待測標本：根據(jù)打印出的工作單上的庫位號在標本架中找出相應待測標本,并按工作單上的順序排列到AXSYM熒光免疫分析儀的樣本架上。8.3 上機測試：8.3.1 上機前從冰箱中取出HBsAg試劑盒，檢查試劑量的多少，量少則更換試劑，將試劑放于機器試劑槽中。8.3.2 打開機器，從主菜單中選擇ORDERLIST，按F6后按提示輸入待測標本所架位置編號（S/P）、樣品編號（SID）及選擇該樣品需檢測的項目（如病人標本放在A標本架1號位置，需檢測AFP，則在S/P后填A01，樣品編號為1601則在SID后編16

4、01，PID可省，在項目欄中手指觸摸選擇HBsAg，按F6保存，并按上述方法添加下一個標本。8.3.3 對于有條形碼的標本管，由儀器直接讀取標本管上的條碼信息并與LIS系統(tǒng)進行雙向信息傳輸：在LIS系統(tǒng)中按工作單給與樣本號，選擇生成報告單儀器讀取數(shù)據(jù)條碼排樣選擇儀器下載排樣上傳儀器，在儀器主菜單中選擇ORDERLISTF3(HOST DOWN LOOD)。8.3.4 按F1退出，核對項目申請表中的申請項目是否有誤，如某標本有誤則直接手指觸摸選中該標本，再按F3進行編輯及修改。8.3.5 補足反應杯和纖維杯。8.3.6 按RUN運行。8.4 儀器自動操作流程：吸樣本150ul入RV杯吸緩沖液樣本

5、1：3或1：101自動稀釋吸入酶吸入底物轉移到纖維杯機器自動分析（用時15分鐘）。8.5 結果：儀器自動記錄結果并傳輸?shù)絃IS系統(tǒng)后發(fā)送報告（詳見免疫報告發(fā)送程序）。9. 結果判斷：本實驗cutoff值參考定標均值2，如果樣品檢測值/cutoff值1判斷為陰性，樣品檢測值/cutoff值1判斷為陽性。10. 參考范圍：正常人陰性（S/CO1）。11. 臨床意義：HBsAg在HBV感染早期出現(xiàn)于患者血中，可持續(xù)數(shù)月數(shù)年，乃至終生，是診斷HBV感染最常用的指標。12. 病人準備、標本要求：標本為血清時最好空腹采血，脂血、溶血不可使用。13 注意事項：13.1 試劑盒應置28中保存，使用前試劑應搖勻。13.2 試劑盒內(nèi)容物及標本從冷藏環(huán)境中取出，在37平衡30分鐘后方可使用。13.3 待測標本不可用NaN3防腐。13.4 不同批號的試劑不