同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科ISO15189體系文件06乙型肝炎表面抗原(HBsAg)測(cè)定

1、同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫組項(xiàng)目操作指導(dǎo)書TJYYJYKMY/XMZ406第2版標(biāo)題：乙型肝炎表面抗原(HBsAg)測(cè)定第4章 第6號(hào)第 PAGE 3 頁(yè) 共 NUMPAGES 3 頁(yè) 目的:測(cè)定血清或其它體液中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的含量。 適用范圍:同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室，僅用于弱陽(yáng)性復(fù)查。 項(xiàng)目名稱：乙型肝炎表面抗原(HBsAg)測(cè)定。 檢測(cè)方法：微粒子酶免疫法。5 原理：采用微粒子酶免疫分析方法測(cè)定HBsAg。待測(cè)血清中的HBsAg與包被了HBsAg抗體的免疫微粒子反應(yīng),形成免疫復(fù)合物，加入堿性磷酸酶標(biāo)記抗體，抗HBsAg抗體與上述免疫復(fù)合物反應(yīng)形成雙抗體夾心免疫復(fù)合物,洗滌

2、后加入酶的熒光底物,產(chǎn)生的熒光強(qiáng)弱與待測(cè)的HBsAg含量相關(guān)。6. 試劑：6.1 品牌：美國(guó)雅培公司。6.2 包裝規(guī)格：100人份。6.3 內(nèi)含物：6.3.1 鼠抗HBsAg抗體包被的微粒（5.1ml）X1。6.3.2 堿性磷酸酶標(biāo)記的兔抗HBsAg結(jié)合物（15.5ml）X1。6.3.3 生物素標(biāo)記的羊抗IgG（17.6ml）X1。7. 儀器：雅培AXSYM熒光免疫分析儀。8 操作步驟：8.1 打印工作單：8.1.1 打開(kāi)電腦及打印機(jī)電源,8.1.2 雙擊齊效檢驗(yàn)系統(tǒng),登入自己的工號(hào)與密碼；8.1.3 雙擊報(bào)告處理,單擊標(biāo)本申請(qǐng)信息打開(kāi)標(biāo)本申請(qǐng)明細(xì)信息查詢,打開(kāi)左上角的所有信息,選擇未生成報(bào)告

3、信息。8.1.4 在檢驗(yàn)項(xiàng)目處選擇HBsAg執(zhí)行查詢,點(diǎn)擊打印申請(qǐng)單，打印出工作單。8.2 排列待測(cè)標(biāo)本：根據(jù)打印出的工作單上的庫(kù)位號(hào)在標(biāo)本架中找出相應(yīng)待測(cè)標(biāo)本,并按工作單上的順序排列到AXSYM熒光免疫分析儀的樣本架上。8.3 上機(jī)測(cè)試：8.3.1 上機(jī)前從冰箱中取出HBsAg試劑盒，檢查試劑量的多少，量少則更換試劑，將試劑放于機(jī)器試劑槽中。8.3.2 打開(kāi)機(jī)器，從主菜單中選擇ORDERLIST，按F6后按提示輸入待測(cè)標(biāo)本所架位置編號(hào)（S/P）、樣品編號(hào)（SID）及選擇該樣品需檢測(cè)的項(xiàng)目（如病人標(biāo)本放在A標(biāo)本架1號(hào)位置，需檢測(cè)AFP，則在S/P后填A(yù)01，樣品編號(hào)為1601則在SID后編16

4、01，PID可省，在項(xiàng)目欄中手指觸摸選擇HBsAg，按F6保存，并按上述方法添加下一個(gè)標(biāo)本。8.3.3 對(duì)于有條形碼的標(biāo)本管，由儀器直接讀取標(biāo)本管上的條碼信息并與LIS系統(tǒng)進(jìn)行雙向信息傳輸：在LIS系統(tǒng)中按工作單給與樣本號(hào)，選擇生成報(bào)告單儀器讀取數(shù)據(jù)條碼排樣選擇儀器下載排樣上傳儀器，在儀器主菜單中選擇ORDERLISTF3(HOST DOWN LOOD)。8.3.4 按F1退出，核對(duì)項(xiàng)目申請(qǐng)表中的申請(qǐng)項(xiàng)目是否有誤，如某標(biāo)本有誤則直接手指觸摸選中該標(biāo)本，再按F3進(jìn)行編輯及修改。8.3.5 補(bǔ)足反應(yīng)杯和纖維杯。8.3.6 按RUN運(yùn)行。8.4 儀器自動(dòng)操作流程：吸樣本150ul入RV杯吸緩沖液樣本

5、1：3或1：101自動(dòng)稀釋吸入酶吸入底物轉(zhuǎn)移到纖維杯機(jī)器自動(dòng)分析（用時(shí)15分鐘）。8.5 結(jié)果：儀器自動(dòng)記錄結(jié)果并傳輸?shù)絃IS系統(tǒng)后發(fā)送報(bào)告（詳見(jiàn)免疫報(bào)告發(fā)送程序）。9. 結(jié)果判斷：本實(shí)驗(yàn)cutoff值參考定標(biāo)均值2，如果樣品檢測(cè)值/cutoff值1判斷為陰性，樣品檢測(cè)值/cutoff值1判斷為陽(yáng)性。10. 參考范圍：正常人陰性（S/CO1）。11. 臨床意義：HBsAg在HBV感染早期出現(xiàn)于患者血中，可持續(xù)數(shù)月數(shù)年，乃至終生，是診斷HBV感染最常用的指標(biāo)。12. 病人準(zhǔn)備、標(biāo)本要求：標(biāo)本為血清時(shí)最好空腹采血，脂血、溶血不可使用。13 注意事項(xiàng)：13.1 試劑盒應(yīng)置28中保存，使用前試劑應(yīng)搖勻。13.2 試劑盒內(nèi)容物及標(biāo)本從冷藏環(huán)境中取出，在37平衡30分鐘后方可使用。13.3 待測(cè)標(biāo)本不可用NaN3防腐。13.4 不同批號(hào)的試劑不