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文檔簡介
1、同濟大學附屬同濟醫(yī)院檢驗科免疫組項目操作指導(dǎo)書TJYYJYKMY/XMZ207第2版標題:乙型肝炎表面抗體測定(定性)第2章 第07號第 PAGE 4 頁 共 NUMPAGES 4 頁1. 目的:檢測血清標本中的乙型肝炎表面抗體(抗-HBs)。2. 適用范圍:同濟醫(yī)院檢驗科免疫室。3. 項目名稱:乙型肝炎表面抗體(HbsAB)(定性)測定。4. 檢測方法:酶免疫分析法。5. 檢測原理:采用純化HbsAg包被反應(yīng)板,加入待測標本,同時加入HbsAg-HRP,當標本中存在抗-HBs時,該抗-HBs與包被HbsAg結(jié)合并與酶結(jié)合物結(jié)合形成HbsAg-抗-HBs-HbsAg-HRP復(fù)合物,加入TMB底
2、物產(chǎn)生顯色反應(yīng),反之則無顯色反應(yīng)。6. 試劑:6.1 品牌:上海實業(yè)科華生物技術(shù)有限公司。6.2 包裝規(guī)格:96人份。6.3 內(nèi)含物:每盒試劑含以下成分:6.3.1 微孔反應(yīng)條:8孔X126.3.2 酶結(jié)合物:6.2mlXl瓶;6.3.3 陽性對照:1.0ml Xl瓶;6.3.4 陰性對照:1.0mlXl瓶;6.3.5 洗滌液(使用前以蒸餾水作25倍稀釋):40mlXl瓶;6.3.6 顯色劑A:8.0mlXl瓶;6.3.7 顯色劑B:8.0mlXl瓶;6.3.8 終止液:7.0mlXl瓶;6.3.9 封片:2片;6.3.10說明書:一份。7. 儀器品牌、型號:意大利Alisei全自動酶免分析儀
3、。8 操作步驟:8.1 打印工作單:8.1.1 打開LIS電腦及打印機電源,8.1.2 雙擊齊效檢驗系統(tǒng),登陸工號與密碼。雙擊報告處理,單擊標本申請信息打開標本申請明細信息查詢,打開左上角的所有信息,選擇未生成報告信息。8.1.3 在檢驗項目處選擇HBSAB執(zhí)行查詢,點擊打印申請單,打印出工作單。8.2 排列待測標本:根據(jù)工作單上的庫位號從標本架中找出相應(yīng)標本,并按工作單上的順序排列在Alisei全自動酶免分析儀的樣本架上。8.3 裝載試劑:開啟Alisei儀,根據(jù)待測標本數(shù)量,點擊控制電腦編輯工作列表,出現(xiàn)試劑及酶標板界面。按照屏幕所示放好洗板液,洗針液,標本試管,預(yù)稀釋管和試劑。8.4 裝
4、載酶標板:點擊Alisei全自動酶免分析儀界面的裝卸反應(yīng)板按鈕進行裝載反應(yīng)板,按項目順序進行裝載。等所有項目酶標板裝載完成后,點擊開始按鈕機器開始檢測。8.5 Alisei分析儀檢測參數(shù):試劑空 白陽性對照陰性對照標 本質(zhì)控品單 孔雙 孔雙 孔單 孔單 孔50ul/孔酶結(jié)合物50ul/孔混勻,37,30分鐘洗滌,洗滌液350ul/孔 5次A液50ul/孔B液50ul/孔混勻,37,15分鐘終止液50ul/孔450/630nm讀取OD值8.6 儀器自動記錄OD值并可打印測定結(jié)果,同時傳入LIS中,發(fā)送報告詳見免疫報告發(fā)送程序。8.7 結(jié)果判斷:(樣品OD值)(陰性對照平均OD值)2.1判斷為陽性
5、,否則陰性。陰性對照OD值低于0.05作0.05計算,高于0.05以按實際OD值計算。9. 參考范圍:正常人陰性。10. 臨床意義:抗-HBs在HBV的中和抗體,有清除HBV,防止再感染的作用。 抗-HBs一般出現(xiàn)于乙肝患者恢復(fù)期,提示感染已終止。注射乙肝疫苗的人,抗-HBs也陽性。11 病人準備、標本要求:標本為血清時最好空腹采血,脂血、溶血不可使用。其它體液標本無特殊要求。12 注意事項:12.1 試劑盒應(yīng)置28中保存,使用前試劑應(yīng)搖勻。12.2 試劑盒內(nèi)容物及標本從冷藏環(huán)境中取出,在37平衡30分鐘后方可使用。12.3 待測標本不可用NaN3防腐。12.4 結(jié)果判斷須在10分鐘內(nèi)完成。12.5 不同批號的試劑不可混用。12.6 手工操作時,封
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