甲型流感病毒抗原檢測方法

1、關(guān)于甲型流感病毒抗原檢測方法第一張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月預(yù)期用途流感是由流感病毒引起的急性呼吸道傳染病，潛伏期為1-3天，患者發(fā)病突然，主要癥狀有畏寒、頭痛、渾身肌肉疼痛、無力、干咳等。第二張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月萬泰生物甲流感病毒抗原診斷試劑盒采用免疫滲濾技術(shù)，定性檢測人鼻咽拭子或咽拭子樣本中的甲流感病毒抗原。原理：采用雙抗體夾心法原理檢測甲流感病毒核蛋白抗原。硝酸纖維膜上預(yù)包被抗-FluA NP的單克隆抗體，若待測樣品中存在FluA NP抗原，經(jīng)裂解液處理后，抗原可與包被抗體結(jié)合，形成抗原-抗體復(fù)合物（Ag-Ab），隨后加入抗-Flu A NP酶標(biāo)試劑（

2、Ab-HRP）,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物（Ab-Ag-Ab-HRP),最后通過酶催化底物顯色，生成藍(lán)色產(chǎn)物，若樣品中無FluA NP抗原，不顯色。第三張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月注意事項(xiàng)樣本采集不當(dāng)、樣本儲存不當(dāng)、標(biāo)本不新鮮或樣本反復(fù)凍融均會影響檢測結(jié)果。采集的樣本若存在個別高濃度藥物（如鼻腔噴霧藥劑）會影響檢測結(jié)果。檢測試劑僅對樣本中的A型流感病毒抗原提供定性檢測。陽性結(jié)果僅表示樣本中A型流感病毒抗原的存在，而不等作為機(jī)體感染A型流感病毒的唯一標(biāo)準(zhǔn)。陰性結(jié)果并不能完全排除感染A型流感病毒的可能性。結(jié)果陰性但有臨床癥狀存在，建議使用其他臨床方法進(jìn)行測試。第四張，PPT共三十

3、六頁，創(chuàng)作于2022年6月實(shí)驗(yàn)室生物安全 根據(jù)國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會印發(fā)的人感染H7N9禽流感醫(yī)院感染預(yù)防與控制技術(shù)指南的要求：醫(yī)務(wù)人員接觸患者的血液、體液、分泌物、排泄物、嘔吐物及污染物品時應(yīng)戴清潔手套，脫手套后洗手。第五張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月甲型流感病毒抗原檢測盒第六張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月甲型流感病毒抗原檢測第七張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第八張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月樣本采集及送檢注意事項(xiàng)采集拭子應(yīng)使用檢驗(yàn)科提供的專用微生物拭子（切勿使用普通棉簽）。標(biāo)本采集及檢測應(yīng)嚴(yán)格按照相關(guān)防護(hù)要求進(jìn)行防護(hù)，避免感染。本試驗(yàn)使用鼻

4、咽拭子標(biāo)本進(jìn)行檢測。采集樣本用品共兩種，分別是：鼻咽拭子和樣品保存液，臨床需要時到檢驗(yàn)科領(lǐng)取。第九張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月鼻咽拭子樣本檢測結(jié)果與核酸檢測結(jié)果比較，靈敏度達(dá)到91.3%，特異性達(dá)到99.65%。咽拭子樣本檢測結(jié)果與核酸檢測結(jié)果比較，靈敏度達(dá)到71.13%，特異性達(dá)到100%。樣本采集不當(dāng)可能導(dǎo)致陰性結(jié)果。對于進(jìn)行了抗病毒藥物治療的患者，其體內(nèi)病毒含量大為下降，會造成陰性結(jié)果。建議在使用抗病毒藥物前檢測。第十張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月甲型流感病毒抗原檢測鼻腔分泌物采集：收集鼻腔分泌物時，將拭子插入鼻腔中分泌物最多處，輕輕轉(zhuǎn)動并向鼻腔內(nèi)部推動拭子，直

5、至鼻甲（離鼻孔2.0cm-2.5cm）受阻處，貼鼻腔壁轉(zhuǎn)動拭子三次，取出拭子。第十一張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月甲型流感病毒抗原檢測咽喉分泌物采集：將拭子從口腔完全插入咽喉中，以咽后壁、上顎扁桃的發(fā)紅部位為中心，適度用力擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，應(yīng)避免觸及舌部，取出拭子。第十二張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月樣品處理采集完畢的微生物拭子插入檢驗(yàn)科提供的專用樣品保存液中，緊靠管子內(nèi)壁旋轉(zhuǎn)多次使樣品盡可能溶解在溶液中，最后把拭子頭留于瓶中，旋緊蓋子（避免液體漏出）后送檢。見下圖：第十三張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第十四張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月

6、處理后的樣品應(yīng)及時送檢，也可暫存與2-8（不超過12小時），中午、夜間采集的標(biāo)本送到急診化驗(yàn)室2-8密封保存，正常上班后檢測。檢測方法如下圖：第十五張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月1.將樣品充分混勻后，取樣200ul，加 入樣品處理瓶中第十六張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第十七張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第十八張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月滴加14滴裂解液（約400ul）到樣品處理瓶中。充分混勻。第十九張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十一張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十

7、二張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十三張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十四張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月滴加5滴（約200ul）酶標(biāo)試劑到反應(yīng)膜上第二十五張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月等待酶標(biāo)試劑完全滲入后，再等待2-3分鐘，讓其完全反應(yīng)第二十六張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月每次滴加12滴洗滌液洗滌2次第二十七張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月加2滴顯色液顯色，待顯色液完全滲入，再等待2-3分鐘第二十八張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月加1滴終止液，3分鐘內(nèi)判斷結(jié)果。終止5分鐘后的結(jié)果無臨床意義第二十九張，PPT共

8、三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第三十張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第三十一張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第三十二張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月由于陽性樣品的強(qiáng)度不同，檢測點(diǎn)的顯色可能出現(xiàn)顏色深淺的現(xiàn)象。在規(guī)定的觀察時間內(nèi)，不論顏色深淺，即使非常弱的顯色也應(yīng)判定為陽性結(jié)果。第三十三張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月滲濾裝置從包裝中取出后請?jiān)?0分鐘內(nèi)使用。樣品處理瓶蓋必須擰緊防止樣品漏出，滴加時應(yīng)使瓶中液體全部滴到加樣孔中。滴加試劑時瓶口應(yīng)垂直對準(zhǔn)加樣孔，保證液滴體積的準(zhǔn)確性。第三十四張，PPT共三十六頁，創(chuàng)作于2022年6月標(biāo)本的保存用于病毒分離和核酸檢測的標(biāo)本應(yīng)盡快進(jìn)行檢測 。24小時內(nèi)能檢測的標(biāo)本，置于4保存；不能于24小時內(nèi)檢測的標(biāo)本，置于-70或以下保存。（如無70