高效液相色譜法測定白花蛇舌草中34二羥基苯甲酸甲酯的含量

1、高效液相色譜法測定白花蛇舌草中3，4-二羥基苯甲酸甲酯的含量馬臨李俊明陳玉青李燕郭興杰【摘要】目的創(chuàng)立測定白花蛇舌草中3，4-二羥基苯甲酸甲酯含量的高效液相色譜HPL法。要領(lǐng)接納DS柱(2004.6,5)，以甲醇-0.05%磷酸水溶液(1585，V/V)為活動相,在254n波優(yōu)點檢測。3，4-二羥基苯甲酸甲酯濃度在2.550gl-1范疇內(nèi)與峰面積呈精良的線性干系(r=0.9994；樣品的加樣接納率為100.4%n=9；結(jié)果細密度及重復(fù)性精良，RSD均不大于2.6%。結(jié)論該法輕便、正確，可以作為對白花蛇舌草藥材舉行質(zhì)量操縱的一種定量?！娟P(guān)鍵詞】高效液相色譜法白花蛇舌草3，4-二羥基苯甲酸甲酯白花

2、蛇舌草為茜草科耳草屬植物白花蛇舌草Hedytisdiffusailld的枯燥全草，主產(chǎn)于我國長江以南各剩本品具有清熱解毒、活血化淤、利濕通淋等作用，重要用于腫瘤、黃疸型肝炎、腸炎、肺炎等疾病的治療。白花蛇舌草中含有蒽醌類、黃酮類、環(huán)烯醚苷萜類、甾醇類、酚酸類化合物等13。有關(guān)白花蛇舌草中化學(xué)身分的闡發(fā)與測定大部門是針對此中有用身分齊墩果酸及熊果酸。當(dāng)代藥理研究表白，酚酸類化合物具有顯著的抗氧化、掃除自由基作用，具有抗炎、抗菌、抗癌等作用4，這與白花蛇舌草的作用同等。本文初次從白花蛇舌草中分散得到了酚酸類化合物3，4-二羥基苯甲酸甲酯，并初次創(chuàng)立了高效液相色譜法對來自8個產(chǎn)地的藥材中的該化合物舉

3、行含量測定。1儀器與試藥高效液相色譜儀，包羅L-10AT型泵、SPD-10A型紫外可見檢測器日本島津；ANASTAR色譜事情站天津奧特賽恩斯儀器；十萬分之一天平北京賽多利斯儀器體系。甲醇為色譜純，別的試劑為闡發(fā)純，水為重蒸水(廉價)；3，4-二羥基苯甲酸甲酯比較品為本研究室提取分散，經(jīng)UV、1H-NR及13-NR斷定布局,HPL面積歸一化法測定含量大于98.5；差異產(chǎn)地的白花蛇舌草藥材，從各地藥材市場購置，經(jīng)沈陽藥科大學(xué)孫啟時傳授斷定為白花蛇舌草Hedytisdiffusailld.。2要領(lǐng)與結(jié)果2.2供試品溶液的制備取藥材粉末3g過40目篩，細密稱定，用15倍量90%乙醇加熱回流提取3次，0

4、.5h/次，過濾，歸并濾液。減壓蒸干溶劑。殘渣用活動相溶解并轉(zhuǎn)移至25l量瓶中，定容，搖勻,過0.45濾膜，即得。2.3色譜條件與體系實用性試驗色譜柱為DiansilTDS柱(2004.6,5)；活動相為甲醇-0.05%磷酸水溶液(1585)，流速0.8lin-1；檢測波長254n；柱溫為室溫；進樣量20l。比較品和供試品溶液的色譜圖見圖12。由圖2可見，3，4-二羥基苯甲酸甲酯峰與相鄰峰到達了完全分散。以3，4-二羥基苯甲酸甲酯盤算理論板數(shù)不低于8000。圖1比較品色譜圖略圖2供試品色譜圖略2.5細密度實行取同一供試品溶液，一連進樣6次，記載峰面積，RSD為2.3%，表白要領(lǐng)細密度精良。2.

5、6重復(fù)性實行取同一產(chǎn)地白花蛇舌草藥材，按“2.2項下要領(lǐng)制備6份供試品溶液，測定含量，其均勻值為87.0gg-1，RSD為2.6，結(jié)果表白要領(lǐng)重復(fù)性精良。2.7不變性實行將供試品溶液室溫安排，別離于0，1，2，4，8，12h進樣闡發(fā)，記載峰面積，RSD為2.8，表白供試品溶液至少在12h內(nèi)不變。2.9樣品含量測定取差異產(chǎn)地白花蛇舌草藥材，按“2.2項下要領(lǐng)操縱制備供試品溶液，測定含量。結(jié)果見表1。3討論3.1提取條件的選擇本實行比力了用乙醇、甲醇、水作溶劑，用超聲或回流提取法提取3，4-二羥基苯甲酸甲酯的提取服從。結(jié)果表白，用乙醇回流提取的結(jié)果最正確，故本文選擇乙醇作提取溶劑，接納回流提取的要

6、領(lǐng)。在此底子上，接納正交試驗方案優(yōu)化3，4-二羥基苯甲酸甲酯的提取要領(lǐng)。選擇提取液乙醇濃度、溶劑用量、提取次數(shù)、提取時間4個因素，每個因素3個程度，按L934正交表擺設(shè)實行。以3，4-二羥基苯甲酸甲酯的含量為觀察指標，對正交實行的結(jié)果舉行直不雅和方差闡發(fā)。末了確定提取要領(lǐng)為：取白花蛇舌草藥材粉末3g，細密稱定，加15倍量90%乙醇，加熱回流提取3次，0.5h/次。表1差異泉源白花蛇舌草藥材中3，4-二羥基苯甲酸甲酯的含量略3.2活動相的選擇對甲醇-水、甲醇-0.05%磷酸水溶液2個活動相體系舉行了研究。結(jié)果表白，甲醇-水作活動相時組分色譜峰較寬，柱效低；以甲醇-0.05%磷酸水溶液為活動相，組

7、分色譜峰峰形好，柱效高，分散效能高。3.3結(jié)果闡發(fā)有關(guān)白花蛇舌草中化學(xué)身分的闡發(fā)與測定大部門是針對此中有用身分齊墩果酸及熊果酸。本實行初次創(chuàng)立了測定白花蛇舌草中3，4-二羥基苯甲酸甲酯含量的HPL法。要領(lǐng)輕便、正確，重復(fù)性好，可以為白花蛇舌草藥材的質(zhì)量操縱提供根據(jù)。測定結(jié)果表白，8個產(chǎn)地藥材中3，4-二羥基苯甲酸甲酯的含量范疇在42.287.0gg-1范疇內(nèi)?！緟⒖嘉墨I】1斯建勇，陳迪華，潘瑞樂，等.白花蛇舌草的化學(xué)身分研究J.自然產(chǎn)物研究與開拓，2022，186：942.2譚寧華，王雙明，楊亞濱，等.白花蛇舌草的抗腫瘤活性和開端化學(xué)身分研究J.自然產(chǎn)物研究與開拓，2002，14(5)：33.3Lu,YangJJ,angPY,etal.Aneaylatedfl